CROMATOGRAFA

CROMATOGRAFA

CROMATOGRAFA
CROMATOGRAFA

cromatogr
afa

CROMATOGRAFA
lquida

Qu es la
cromatografa?

nn11997722: :
e
C
A
P
U
I
segn la IUPAC e
DDeeffnniciciinn segn la
aaqquueellllaass
n
o
s
s
a
c
f
n basadas
ggr
cas ascoi
mmaato
f
o
r

r
c
s
o
nn, , basadas
a
t
ic
n
ccnicas cro
r
a
p
e
s
i
e
LLaasst
c
d
ra ifestan lass
t cipalmente
e sepeam
d
e
t
aannifestan la
n
in
r
e
p
,
lm
a
u
q
d
a
ccnnicicaass, princip
id
m
t
c
e
qu , siguiendoouunn
t diferencia ddeevveelolocidad
ppaassaa, siguiensde
l
a
la
eennlala diferencia
c
z
e
ddeeuunnaammezclataaplas, por ruunnaafafase
s
ia
c
n
a
t
s
ssuustancias
, po adas por uunnaa
ltltipiplelesseetapasa

m
n
e
r
o
s
ce o en m lquida, arrrrasstrtradas pola
ppro
ss
a
o
n
rocersia
,
a
a
a
e
d
s
id
li
u

s
s
q
le
l
,
la
a
o
u
n
ea
ciona
sean ccuales sd
, slida
eessta
tacionavrilia, liquididaaooggaass, , seain
s
cciaias dee
n
e
r
e
f
m
u
d
q
e
s
li
s
a
fafase mvil, e motivan l las diferen
tivandes.
ccaauussaassqquue mo
vveeloloccididaades.

cromatograf
a
tiene
n

fase
estacionara

fase
mvil
pueden
ser:

slid
o

lquid
o

lquid
o

gas

Cromatografa
lquida
puede
ser

plana

En
columna

F.
MVIL

CROMATOGRAFA LQUIDA
PLANA

En papel

eluyente: disolvente o mezcla de ellos,

fcilmente evaporable.

Fase estacionara: papel

de fltro

En capa fna

Fase
estacionaria=
placa
:
adsorbente, los ms usados slica gel
(SiO2 ) y alumina (Al2O3), adherido a
un soporte de plstico, vidrio o
aluminio.
Normalmente
recubierto
por
un
indicador
fluorescente

CROMATOGRAFA EN
CAPA FINA

En capa fna

La fase mvil asciende

por capilaridad a travs
de la fase estacionaria,
compitiendo con sta
por los analitos.

Los compuestos ms polares quedarn ms

adsorbidos por la fase estacionaria mientras
que los menos polares avanzarn ms con el
eluyente.

En capa fna

En capa fna
Usos:
- Determinar el grado de pureza de un compuesto.
Se puede determinar as, por ejemplo, la
efectividad de una etapa de purifcacin.
- Comparar muestras. Si dos muestras corren igual
en placa podran ser idnticas. Si, por el contrario,
corren distinto entonces no son la misma sustancia.
- Realizar el seguimiento de una reaccin. Es
posible estudiar cmo desaparecen los reactivos y
cmo aparecen los productos fnales o, lo que es lo
mismo, saber cuando la reaccin ha acabado.

En capa fna
Ejempl
os:

Cromatografa
lquida

plana

puede
ser

En
columna

En columna

Cromatografa en
columna
Se puede
clasifcar

Segn
naturaleza
f.m
puede
ser

norm
al

inver
sa

Segn
mecanismo
separacin
intercam
bio inico

adsorcin
reparto

afnida
d
exclusi
n
molecul

En columna

norm
al
Cromatogra
fa segn la
naturaleza
de la f.m

tiene

f.m poco
polar

puede
ser

invers
a

f.e
polar

tiene

f.e poco
polar
f.m
polar

En columna
fsic
o
Cromatograf
a segn
fundamento
de su
actuacin

puede
ser

fsicoqumico
qumic
o
bioqumic
o

exclusi
n
adsorci
n
partici
n
intercambio
inico
afnidad

Cromatografa
adsorcin

F.E SLIDO
ACTIVO

Fundamento:
diferencias de solubilidades en
f.m y de retencin en f.e de los
componentes de la mezcla

Cromatografa
particin

F.E UN LQUIDO ADSORBIDO

O LIGADO A UN SLIDO
Fundamento:
INERTE
Separacin debida a la
diferencia de solubilidades
entre ambas fases. Similar al
fenmeno de extraccin

Cromatografa
exclusin

F.E MATERIAL
POROSO INERTE
(GEL)
Fundamento:
separacin del soluto segn su
tamao y estructura molecular

Cromatografa
afnidad
F.E SOPORTE SLIDO
CON UNA
SUPERFICIE
ACTIVADA AL QUE SE
Fundamento: ENLAZA UN
LIGANDO
DE
Adsorcin reversible
y
selectiva, basadaAFINIDAD
en el
acoplamiento llave-cerradura,
entre el analito y ligando

Cromatografa intercambio
inico

F.E SLIDO CON

Fundamento:
CARGA
La f.e tiene grupos cargados
que interaccionan
electroestticamente con iones
de signo contrario de la f.m

En columna
Suele llevar
acoplado un
detector de manera
que se obtienen los
cromatogrmas

En ellos se
representa la seal
medida frente al
tiempo o volumen
de eluyente.
VOLUMEN DE SOLVENTE

En columna

tiempo o volumen de eluyente nos ayudar a determinar que ana

La altura y anchura del pico, nos ayudara a
cuantificar cuanto analito hay.