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Preparacin de

Medios de Cultivo
Universidad Mayor de San Simn
Lic. Gabriela S: Navia Rojas

Nutricin bacteriana
Es el proceso por el cual los seres vivos toman

del medio, los compuestos qumicos que


necesitan para llevar a cabo sus procesos
energticos y biosintticos que les permiten
crecer y reproducirse.
Los requerimientos nutricionales de cada

grupo microbiano estn dados por la


composicin qumica de las clulas
Algunos tienen requerimientos nutricionales
muy simples

Nutricin microbiana
Las clulas estn compuestas de:

1. Macromolculas: polisacridos, lpidos,


cidos nucledos y protenas (Las protenas son
las ms abundantes).
2. Agua: El agua es el solvente ideal para los
organismos vivos debido a su polaridad y a su
cohesin (unin de molculas)

Nutricin
Los microorganismos requieren para su

desarrollo y actividad celular compuestos


qumicos: nutrientes.

Dependiendo de las cantidades que se

requieran se habla de macronutrientes y


micronutrientes.

Existen diferencias en cuanto a los

requerimientos nutricionales de cada


microorganismo.

Nutrientes
MACRO

MICRO

Carbono

Cromo

Nitrgeno

Cobalto

Fsforo

Cobre

Azufre

Manganeso

Potasio

Niquel

Magnesio

Selenio

Sodio

Tungstero

Calcio

Vanadio y Zinc

Hierro

Tipos Nutricionales
TIPO

FUENTE DE ENERGIA

FUENTE DE CARBONO

EJEMPLOS

Fotoautotrofas

Luz

CO2

Algas y Cianobacterias

Fotoheterotrofas

Luz

Compuestos orgnicos

Algas

bacterias

fotosintticas.

Quimioautotrofas

o Qumica

littrofas

Quimioheterotrofas
heterotrofas

Compuesto

inorgnico: Pocas bacterias

H2, NH, NO2, H2S, CO2.

o Qumica

Compuesto
glucosa

Orgnico: La mayora son bacterias

Clasificacin de los moo segn la


temperatura

Efecto del oxigeno sobre el


crecimiento de moo
1. Aerobios estrictos
2. Anaerobios
3. Aerobios

facultativos
4. Microaerofilos
5. Anaerobios
aerotolerantes

Medios de cultivo
Los moo son seres vivos que tienen exigencias para su

desarrollo, por esto es importante conocer las


exigencias nutricionales y condiciones fsicas requeridas
Conjunto de nutrientes con determinadas condiciones

ambientales que permiten crecimiento y reproduccin.

Factores de crecimiento
Tienen que estar disponibles los nutrientes

adecuados.
a) Tienen que estar disponibles oxgeno y otros
gases, tal como se requiera.
b) Es necesario un cierto grado de humedad o
el medio tiene que ser de la reaccin adecuada.
c) Tienen que prevalecer las relaciones de
temperaturas adecuadas.
d) El medio tiene que estar estril.
e) Tiene que evitarse la contaminacin.

Un medio de cultivo satisfactorio para


microbiologa tiene que contener:
Donantes y captadores de fuentes de hidrgeno

Carbn, Nitrgeno; azufre, fsforo, sales inorgnicas


vitaminas (en algunos casos)
Extractos de carne o levaduras, peptona es una fuente
fcilmente disponible de N y C
Otras sustancias promotoras del crecimiento
Ciertas bacterias requieren la adicin de otros
nutrientes (suero, sangre, yema de huevo) Sales: Ca,
Mn, Mg,Na,K
Colorantes: como indicadores de actividad metablica,
o por sus poderes de inhibidores selectivos
Agar, gelatina o albmina para cambiarle de lquido a
un estado slido o semislido

La esterilizacin (libres de todas aquellas

formas que puedan influenciar o impedir el


normal crecimiento) de los medios de cultivo
es por medio del autoclave en el cual el vapor
de agua a presin es el agente esterilizante
El medio se distribuye en tubos o frascos que

se tapan con algodn no absorbente o tapn


poco apretado, papel aluminio y se colocan
stos en el autoclave
En la operacin de autoclavado, se debe

permitir que salga todo el aire encerrado y


sustituir el aire frio completamente por vapor.

Clasificacin segn la consistencia


Lquidos (TSB, EC)
Semislidos (MIO) (2 %)
Slidos (TSI, AN, MC) (15

% agar)

Clasificacin por su composicin


Los medios de cultivo se dividen acorde a sus caractersticas:
Bsicos: para conteo, bacterias no exigentes (AN, Plate
count, TSA)
Enriquecidos: son bsicos o comunes y se les aade
suplementos (Agar Sangre, Baird Parquer)
Selectivos: tienen sustancias que permiten seleccionar
grupos de bacterias (MC, m-FC, XLD, SS)
Diferenciales: permiten distinguir entre dos o mas
bacterias por caractersticas de colonias. Se basa en
demostrar propiedades
especificas (pruebas bioqumicas TSI, LIA, Baird Parquer,
Agar Eosina Azul de Metileno (EMB):
Transporte: para envi o tomas de muestras, aseguran la
viabilidad (agar Stuar, Claklus)

Preparacin de los medios de


cultivo
Siempre preparar los medios con agua

destilada.
Es necesario ajustar siempre el pH (NaOH o
HCl)
Todos los utensilios deben estar
perfectamente limpios (horno o autoclave).
Todos los medios deben esterilizarse de
alguna forma (filtracin, autoclave).

Los medios se preparan en matraces cnicos

con tapa (rosca o papel aluminio)


Se pesa la cantidad de medio requerida, se
disuelve o suspende en el agua hasta disolver
el agar.
Se ajusta el pH (OHNa o HCl).
Se esteriliza a 1.5 at 121C por 15 min
Se espera a que enfre (42C o hasta que se
pueda sostener el recipiente sin quemarse la
mano)
Servir 20 ml Aprox. en cada caja de Petri

Inoculacin de moo

Mtodos de Siembra
Siembra por estra

Vertido en placa

Siembra en superficie

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