MECANISMOS DE

TRANSFERENCIA DE
MATERIAL
GENTICO

1. CONJUGACIN
2. TRANSFORMACIN
1.TRANSDUCCIN

Gentica
Bacteriana

Mecanismos de transferencia de material gentico

en bacterias

 Conjugacin es el proceso de apareamiento de

bacterias mediante el cual se transfiere informacin

gentica.

Es el proceso mediante el cual se transfiere una hebra

sencilla de DNA desde una bacteria donadora a una
bacteria receptora
Ocurre tanto en bacterias gram negativas (p ej.
Escherichia y Pseudomonas) como en bacterias gram
positivas (p ej. Enterococcus, Streptococcus, Bacillus)

Edward Tatum (1909 1975)

Joshua Lederberg (1925 2008)

Reciben el Premio Nobel en 1958

Por su aportacin en la
regulacin de los procesos
qumicos e investigaciones
sobre recombinacin gentica
en bacterias

En 1946 Lederberg y Tatum demostraron la recombinacin

gentica en bacterias utilizando Escherichia coli
CON UN EXPERIMENTO MUY SENCILLO
Cepa A
met- bio- thr+leu+thi+

No hay
colonias

Mezcla

SI hay
colonias!!!

Cepa B
Met+ bio+ thr-leu-thi-

No hay
colonias

El investigador Bernard Davis demostr que para el proceso

de conjugacin se requiere de contacto celular

No hubo
crecimiento
en medio
mnimo

No hubo
crecimiento
en medio
mnimo

Caracteristicas generales del proceso de

conjugacion
1. Se requiere contacto clula-clula (pili)
2. La transferencia de DNA ocurre en una sola direccin:
donadora

receptora NO VICEVERSA

3. La clula donadora posee un plsmido particular que le da

la capacidad de la transferencia: plsmido F de fertilidad
4. La transferencia de DNA ocurre por un poro (pili, sistema
ITS4 de secrecin)
5. La transferencia del DNA reqiere energa de la clula
donadora: principalmente ATP

Plsmido F plsmido de Fertilidad

Mpa del plsmido

R388 de Escherichia coli

Componentes del plsmido F

Genes

Funcin

traA, traL, traE, traB,

traV, traC, traW, traU,
traF, traQ, traH, traG

Sntesis del pili

traS, traT

Exclusin de la
superficie

traN, traG

Estabilizar el
apareamiento

Tra M, traY
(exonucleasa), traD,
traI (helicasa), traZ

Transferencia del DNA

Fin P, finO, traJ

Regulacin

Clula donadora

Celula receptora

Pili
conjugativo

Cromosoma
bacteriano

Plsmido F

Cromosoma
bacteriano

En la actualidad se sigue generando investigacin acerca

de los aspectos moleculares y factores de regulacin
durante la conjugacin.

Cmo se inicia la conjugacin?

1. Establecer contacto clula-clula

F+

F-

ELEMENTOS DEL SISTEMA DE TRANSFERENCIA DE DNA

(estn codificados por el plsmido F)

2. Transferencia del DNA

El aparato de transferencia se puede dividir en tres
mdulos funcionales:

I. Formacin de un complejo
multiproteco: RELAXASOMA
Protenas de unin a oriT

Qu protenas forman el
RELAXASOMA?

II. Sistema de secrecin tipo IV: es

un complejo multiproteco anclado en
la membrana donde el sustrato es
secretado
Participacin de la protena: T4CP:
protena conjugativa acopladora

Sistema de
transferencia del
DNA durante la
conjugacin

TIPO DE CRUZAS DURANTE LA CONJUGACIN

F+ X F - = ????
Una de las cadenas del DNA F es
cortada y se separa de la otra cadena.
Se transfiere esa cadena a la otra
clula, mientras que se comienza a
replicar el DNA de la cadena que se
qued en la clula F+

DONADORA

RECEPTORA

La cadena de DNA recin

transferida tambin se replica.
Las dos clulas contienen un
plsmido F integro, por lo que
ambas son F+
TRANSCONJUGANTE

El Plsmido F puede integrarse en el

cromosoma bacteriana y generar bacterias Hfr
(high frequency of recombination)

Hfr X F- = ????

Ocurre transferencia de material

gentico, sin embargo, no se
transfiere el cromosoma completo
pues las clulas se separan.
La secuencia total
correspondiente al plsmido F
no se transfiere.

Como se transfiri un
fragmento del DNA
cromosomal, hay homologa
con el cromosoma de la clula
receptora y ocurre
recombinacin con alta
frecuencia (Hfr)

CONJUGACIN F
En clulas Hfr ocurre con baja frecuencia que F se
escinda del cromosoma y forme un plsmido circular
nuevamente. Cuando esto ocurre, F acarrea consigo
genes adyacentes del cromosoma que ahora se
encuentran formando parte del plsmido F.
Entonces, a ste se le llama plsmido F.

CONJUGACIN F

Los plsmidos F tambin pueden

ser transferidos por conjugacin

Con esta transferencia se pueden

crear clulas diploides parciales
(merocigotos).

Ciclo de
conjugacin
en E. coli

Qu ocurre en las bacterias gram positivas?

Algunas bacterias como E. faecalis excretan unos
pptidos similares a feromonas
El proceso de conjugacin es similar al de las
bacterias gram negativas

Transferencia en Streptomyces

Aplicaciones de la conjugacion en la
ingeniera gentica

Aplicaciones de la conjugacin en la
ingeniera gentica
Utilizacin de
Agrobacterium tumefaciens

Generacin de plantas transgnicas mediado por

A. tumefaciens

QU VAMOS A HACER PARA COMPROBAR LA

CONJUGACIN EN LA PRCTICA?
Receptora
Jm1452 StrR

conjugacin

Donadora
W3110/KmTn3
Fenotipo???

Fenotipo???

Sembrar en estreptomicina
solamente?

2. Transferencia del DNA