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 En el laboratorio se pueden cultivar microorganismos en medios nutritivos o cultivo puro, por lo cual es necesario conocer qué clase de nutrientes requieren las bacterias. Factores ambientales como temperatura, nivel de oxígeno y concentración osmótica del medio son críticos para cultivar los microorganismos.  El análisis de la composición de la célula microbiana revela que más del 95% del peso seco de la célula está constituido por unos pocos elementos: carbono, oxígeno, hidrógeno, nitrógeno, azufre, fósforo, potasio, calcio, magnesio y hierro  Estos se denominan macroelementos o macronutrientes, porque los microorganismos los captan en cantidades relativamente grandes. Los primeros seis (C, O, H, N, S Y P) son componentes de los hidratos de carbono, lípidos, proteínas y ácidos nucleicos. Los cuatro macroelementos restantes se encuentran en la célula en forma de cationes y desempeñan diversos papeles.  Todos los organismos incluidos los microorganismos, requieren diversos micronutrientes (u oligoelementos) o elementos traza, además de los macroelementos. La mayoría de las células necesitan los micronutrientes: manganeso, cinc, cobalto, molibdeno, níquel y cobre.  A continuación se presentan incisos en los cuales se observa la diversidad de los tipos nutricionales que existen en las bacterias     Todos los organismos vivos requieren de una fuente de energía. Las planta verdes pueden utilizar la energía radiante de la luz y se designan como fotótrofos. Los animales, dependen de la oxidación (la pérdida de electrones de un átomo) de compuestos químicos, para obtener su energía. Estos organismos se denominan quimiotrofos. Todos los organismos vivos o bien fototrofos o bien quimiotrofos, ambos tipos existen en las bacterias.  Muchas bacterias requieren sólo dióxido de carbono como fuente de carbono. Todos estos organismos son autótrofos (del griego autos-yo mismo y trophealimentación), que poseen la cualidad de la quimiosíntesis y la de la fotosíntesis. Si obtienen su energía a partir de la luz son fotoautotrofos y si obtienen su energía al oxidar compuestos químicos, son quimioautotrofos.  Los microorganismos que requieren compuestos orgánicos como fuente de carbono son heterótrofos o bacterias heterotróficas (del griego heteros-otros). Las fuentes de carbono que utilizan pueden ser hidratos de carbono, amino, ácidos grasos, etc., diferentes combinaciones de nitrogenadas (nitratos, amoníacos). Los microorganismos heterotróficos se dividen en saprófitos y parásitos.  Saprófitos (del griego sapros-putrefacto y phyton-vegetal). Son microorganismos que viven a costa de sustancias orgánicas que se encuentran en el medio exterior. A este grupo pertenece la mayoría de las especies bacterianas que habitan el planeta. También se les conoce con la denominación de metatróficas.     Parásitos (del griego parásitos-que como a costa de otro). Estos son microorganismos que viven en la superficie o en el interior de otro organismo, hospedero, a costa del cual se alimentan. También reciben el nombre de paratróficos, ya que se alimentan de sustancias orgánicas del hombre y de los animales   Los microorganismos tienen solamente dos fuentes de átomos de hidrógeno o electrones. Los litotrofos (esto es, que comen piedras), utilizan sustancias inorgánicas reducidas como fuente de electrones, mientras que los organotrofos obtienen electrones o hidrógeno de compuestos orgánicos.  Los autótrofos fotolitotróficos (fotoautotrofos) utilizan energía lumínica y CO2 como fuente de carbono. Los heterótrofos quimioorganotróficos (quimioheterotrofos, quimioorganoheterotrofos o heterótrofos) emplean compuestos orgánicos como fuentes de energía, hidrógeno, electrones y carbono para realizar la biosíntesis. Todos los microorganismos patógenos son quimioheterotrofos.  Los heterótrofos fotoorganotróficos (fotoorganoheterotrofos) utilizan materia orgánica como dador de electrones y fuentes de carbono, entre estos se encuentran algunas bacterias púrpuras y verdes fotosintéticas. Los autótrofos quimiolitotróficos (quimiolitoautotrofos) oxidan compuestos inorgánicos reducidos, como moléculas de hierro, nitrógeno o azufre para liberar energía y electrones para la biosíntesis.  Algunos tipos de bacterias requieren nitrógeno atmosférico, algunas utilizan compuestos inorgánicos de nitrógeno y otras requieren nitrógeno procedente de compuestos orgánicos nitrogenados.  Algunas bacterias requieren compuestos orgánicos de azufre, algunas son capaces de utilizar compuestos inorgánicos de azufre y algunas utilizan el azufre elemental. El fósforo lo proporciona usualmente fosfatos, por ejemplo sales del ácido fosfórico.  Las bacterias también requieren elementos como sodio, potasio, calcio, manganeso, hierro, cinc, cobre y cobalto para su crecimiento.  Aunque todas las bacterias requieren vitaminas en sus procesos metabólicos normales, algunas son capaces de sintetizar sus requerimientos totales de vitaminas a partir de otros compuestos del medio. Otras no crecen a menos que se le proporcione en el medio, una o vitaminas ya preformadas.  Al igual que todos los organismos vivos necesitan el agua para sus funciones metabólicas y para el crecimiento; en las bacterias, todos los nutrientes deben estar en solución para que puedan penetrar en el organismo.  Muchos microorganismos carecen de una o más enzimas esenciales, por lo cual no pueden elaborar todos los constituyentes indispensables, sino que deben obtenerlos, o a sus precursores, del ambiente. Los compuestos orgánicos que son necesarios porque son componentes celulares esenciales, o sus precursores, y no pueden sintetizarse por el organismo, se denominan factores de crecimiento. Existen tres clases de factores de crecimiento: 1.) aminoácidos, 2.) purinas y pirimidinas, y 3.) vitaminas.  Los aminoácidos se necesitan para la síntesis de proteínas y las purinas y pirimidina, para la síntesis de ácidos nucleicos. Las vitaminas son moléculas orgánicas pequeñas que normalmente forman la totalidad o parte de los cofactores enzimáticos y sólo se requieren cantidades pequeñas para el crecimiento.     Condiciones físicas requeridas para el crecimiento Temperatura La temperatura afecta a la tasa de crecimiento y a la cantidad total de crecimiento del organismo. Las variaciones de temperatura pueden alterar ciertos procesos metabólicos, así como la morfología de la célula. Cada especie de bacteria crece a temperaturas dentro de una cierta gama de valores. Sobre esta base, pueden clasificarse a las bacterias como:     psicrófilas o criófilos: que crecen de °0 C a 30 °C, mesófilas que crecen de 25 °C a 40 °C y Termófilas: que crecen a temperaturas superiores a 40 °C con una tasa máxima y tienen el límite superior a los 70 °C (Bacillus stearothermophilus, Thermoactinomyces vulgaris) Los límites de desarrollo de algunas bacterias termófilas se extiende a la región mesofílica. A esas especies se les conoce como termófilas facultativas o euritermófilas.  Otras que pertenecen a las termófilas crecen mejor a temperaturas superiores a los 60 °C y no se desarrollan a temperatruas que están en la región mesofílica, estas especies se denominan termófilas verdaderas, termófilas obligatorias o estenotermófilas.   Termotolerantes: pueden crecer todavía a 50 °C (Methylococcus capsulatus). Termófilos extremos: son aquellos microorganismos que tienen su óptimo crecimiento por encima de los 65 °C (Thermus aquaticus, Sulfolobus) , algunos de ellos pueden crecer a temperaturas por encima de los 70 °C (especies del género Bacillus y Clostridium) o incluso por encima de los 80 °C (Sulfolobus acidocaldarius) o incluso a 105 °C (Pyrodictium occultum, una bacteria reductora de sulfato anaeróbica estricta).  Hipertermófilos: son bacterias que crecen por encima de los 80 °C y 100 °C. La temperatura de incubación que permite el crecimiento más rápido en un período de tiempo corto (12 a 24 horas) se conoce como temperatura óptima de crecimiento.    Respiración de microorganismos La respiración bacteriana, constituye un proceso complejo, que se acompaña de liberación de energía, la cual es necesaria a los microorganismos para la síntesis de diferentes compuestos orgánicos. La respiración es un proceso de oxidación de las sustancias orgánicas por el oxígeno, con liberación de energía. Por el tipo de respiración, todos los microbios se dividen en aerobios (aeróbicos) y anaerobios (anaeróbicos). Entre unos y otros existen formas intermedias.   Aerobios obligados: se desarrollan bien cuando la atmósfera contiene 21% de oxígeno. Crecen en la superficie de los medios de cultivo líquidos y sólidos (vibrión colérico, sarcinas, micobacterias tuberculosas, etc.)  Microbios microaerófilos: necesitan una cantidad de oxígeno poco importante (alrededor del 1%), como las bacterias de la fermentación láctea y otras).  Aerobios facultativos: pueden reproducirse en ausencia de oxígeno molecular (la mayoría de los microorganismos patógenos y saprófitos)  Bacterias capnófilas: exigen la presencia de pequeñas concentraciones de oxígeno y una elevada concentración de ácido carbónico (las brucellas del tipo bovino y otras).  Anaerobios obligados: la presencia de oxígeno molecular es nociva, constituyento un factor inhibidor de su crecimiento (clostridios del tétano, del botulismo, etc.)    pH el pH es una medida de la actividad de los iones de hidrógeno de una solución, que se define como el valor negativo del logaritmo de la concentración de iones de hidrógeno (expresado en moles). El pH afecta el crecimiento microbiano. Cada especie tiene un rango definido de pH para su crecimiento y un pH óptimo. De acuerdo a esto se encuentra la siguiente clasificación Acidófilos: tienen un valor de pH óptimo de crecimiento entre 0 y 5,5,  Neutrófilos: pH entre 5,5, y 8,0  Alcalófilos: prefieren un rango de pH entre 8,5 y 11,5  Alcalófilos extremos: tienen un valor de pH óptimo de crecimiento de 10 o más.  Solutos y actividad de agua  Los procariotas pueden contener canales sensibles a la presión osmótica, que se abren para permitir la salida de solutos cuando la osmolaridad del entorno se vuelve más baja que la del citoplasma.   La mayoría de las bacterias, algas y hongos poseen una pared celular rígida que mantiene la forma e integridad celular, pero cuando se colocan microorganismos con pared celular rígida en ambientes hipertónicos, disminuye le nivel de agua celular, la célula se contrae, y la membrana plasmática se separa de la pared celular. Este proceso se denomina plasmólisis. Esta situación deshidrata la célula y puede dañar la membrana plasmática, normalmente la célula no muere, pero es inactiva metabólicamente y deja de crecer   Los microorganismos difieren enormemente en cuanto a su capacidad para adaptarse a hábitat con una actividad de agua baja. Microorganismos osmotolerantes: son aquellos que pueden crecer en un rango amplio de actividad del agua o concentración osmótica. Estos microorganismos tienen que realizar un esfuerzo adicional para crecer en hábitat con un valor bajo de aw, porque deben mantener una concentración interna de solutos elevada para poder retener agua. Muchos hongos son osmotolerantes y, por ello, especialmente importantes en el deterioro de alimentos salados o deshidratados.  Halófilos: se adaptan bien a condiciones hipertónicas que necesitan niveles elevados de cloruro sódico para crecer.  Presiones hidrostáticas  Barófilo: crece más rápido a altas presiones hidrostáticas. 