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GENERALIDADES DE

LOS PROCESOS
BIOTECNOLOGICOS

Biotecnologa
Es la aplicacin de los principios cientficos
y de ingeniera al procesamiento de
materiales por agentes biolgicos para
proveer bienes y servicios.
Es aquel proceso de produccin que
involucra el uso de un agente biolgico.

La Biotecnologa Produce
Bienes y Servicios

Bienes:
Todos
los
productos
(alimentos, productos farmacuticos,
insumos industriales, etc.)

Servicios:
Todo
especficamente con
(purificacin de agua
efluentes, extraccin
petrleo, etc.)

lo
relacionado
las prestaciones
o tratamiento de
de derrames de

Produccin de bienes

Materiales

Materias primas: pueden ser compuestos


orgnicos e inorgnicos (Ej. Azcar)

Agentes biolgicos: microorganismos,


clulas animales, clulas vegetales (Ej.
Levadura)

La levadura convierte el azcar en alcohol y se


obtiene un producto con valor agregado,
adems que este proceso biotecnolgico
permite obtener una ganancia.

Agentes biolgicos
Pueden
o
no
estar
genticamente. Ejemplos:

modificados

Bacterias: E. coli, Streptomyces, Bacillus


Hongos: Levaduras, Aspergillus
Algas
Clulas animales y vegetales
Plantas y animales transgnicos

Proceso Biotecnolgico
Comprende distintas etapas (operaciones), estas etapas de son,
esencialmente, similares independientemente del organismo
utilizado y del producto buscado.
1.- Seleccin/ optimizacin del agente biolgico
Se debe buscar factores que caractericen a los m.o. industriales.
Estos factores pueden incorporarse a un agente biolgico
mediante el uso de ingeniera gentica
2.- Produccin del compuesto de inters
Se lleva a cabo en bioreactores o fermentadores

Proceso Biotecnolgico
3.- Recuperacin y purificacin del producto
El objetivo es recuperar la mayor cantidad de producto
con la pureza requerida al menor costo posible.
4.- Terminado
Es la etapa final del proceso de produccin donde el
producto se lleva a su concentracin final, se agregan
conservantes y se envasa.

APLICACIONES DE LA
BIOTECNOLOGA

Tiene cuatro grandes ramas, designadas con


colores:
LABIOTECNOLOGA
VERDE:Es
aquella
dedicada a dar productos y servicios en el
rea agroalimentaria. Apuntan a realizar los
productos ms atractivos para quien los
consume, que tardan ms en degradarse, que
son ms sabrosos o que pueden darnos ms
nutrientes.
LA BIOTECNOLOGA AZUL: Se ocupa de la
aplicacin
de
mtodos
moleculares
y
biolgicos a los organismos marinos y de agua
dulce. Tiene como fin aumentar la oferta de
productos del mar y la seguridad y el control
de la proliferacin de microorganismos
nocivos transmitidos por el agua.

LABIOTECNOLOGA ROJA: Comprende las


aplicaciones teraputicas, diagnsticas, de salud
animal y de investigacin biomdica. Lo que se
persigue es curar, no con drogas sintetizadas en
un laboratorio sino con sustancias producidas por
procesos biolgicos a nivel celular o por
organismos vivos como bacterias.

LABIOTECNOLOGA
BLANCA:
Busca
reemplazar a las tecnologas contaminantes por
otras ms limpias o amigables con el ambiente.
Bsicamente, emplea organismos vivos y enzimas
para obtener productos ms fciles de degradar, y
que requieran menos energa y generen menos
desechos durante su produccin.

LOS MICROORGANISMOS
COMO REACTORES QUMICOS

Los Microorganismos
La definicin de microorganismo considera
que es un organismo microscpico constituido
por una sola clula o agrupacin de clulas.
Se consideran como tales a las bacterias, los
hongos (levaduras y hongos filamentosos muy
pequeos), e incluye tambin a los virus.
LEVADURAS

HONGOS

BACTERIAS

Clasificacin
de Microorganismos
Segn su Fuente de Carbono
Auttrofos: carbono inorgnico.
Hetertrofos: carbono orgnico.

Segn su Fuente de Energa


Quimitrofos: energa qumica.
Fottrofos: energa solar (luz).

Segn su Estructura
Procariontes: no poseen ncleo ni organelo
Eucariontes: poseen ncleo y organelos.

La
fermentacin
El proceso comn que

interviene en la
fabricacin del pan, el vino y los quesos
(por citar slo algunos alimentos), es la
fermentacin
que
realizan
los
microorganismos presentes en la materia
prima.
En el sentido biolgico la fermentacin es
un proceso de obtencin de energa en
condiciones anaerbicas (ausencia de
oxgeno) que puede generar como producto
final cido lctico (fermentacin lctica, por
las bacterias cido-lcticas) o etanol
(fermentacin alcohlica por levaduras).

Reacciones biolgicas
La reaccin de la fermentacin lctica sera:
Glucosa ---------> cido Lctico + energa +
H2O
La reaccin de la fermentacin alcohlica sera:
Glucosa -------> Etanol + energa + CO2
En el contexto industrial, se denomina
fermentacin a un proceso microbiano a gran
escala, tanto si se realiza en condiciones
aerbicas como anaerbicas.

Diferencia entre
fermentacin y cultivo
Una fermentacin es un proceso biolgico o
bioproceso que consiste en la descomposicin
de la materia orgnica por m.o. fermentadores
(bacterias y hongos)
Un cultivo tambin es un bioproceso; pero
generalmente se asocia a organismos o
microorganismos
superiores
(en
orden
jerrquico) a las bacterias; los cultivos son casi
todos del reino eucariota.

Levaduras en la produccin de
bebidas alcohlicas
La fermentacin a gran escala por accin de las
levaduras es responsable de la produccin de
alcohol para fines industriales y de bebidas
alcohlicas .
Una levadura conocida como Saccharomyces
cerevisiae es la responsable de la transformacin
del azcar en alcohol, el fenmeno ms
trascendental en la produccin de vinos.

Condiciones
1.- Temperatura: ambientales
una levadura puede

resistir
temperaturas muy bajas.. El calor excesivo, sin
embargo, las mata. Si la temperatura comienza a
aumentar, la actividad de las levaduras se vuelve
ms y ms lenta y lo que se debe hacer es tratar de
bajar lentamente porque cerevisiae no soporta los
cambios bruscos de temperatura. A unos 18 grados
esta levadura puede hacer muy bien su trabajo.
2.- Oxgeno:
La Saccharomyces cerevisiae
necesita oxgeno para poder vivir y multiplicarse,
ella puede estar sin l por un tiempo razonable. Una
aireacin al comienzo de la fermentacin en blanco
asegura una buena cantidad de levaduras que se
multiplicarn y harn bien su trabajo cuando el aire
falte.

Condiciones ambientales

19

3.- Alcohol: Saccharomyces cerevisiae puede


trabajar bien en medios alcohlicos como lo son los
mostos transformndose en vino, aunque no resiste
extremos. Ms all de los 14 grados de alcohol, su
trabajo se hace muy lento.
4.- El anhdrido sulfuroso: esta sustancia es
importantsima para hacer un buen vino. Algunas de
sus propiedades son un alto poder antisptico,
antioxidante y macerativo. A dosis controladas,
Saccharomyces cerevisiae no tiene problemas.

BIOREACTORES Y
BIOCATALIZADORES

Que es un biorreactor?

Un biorreactor es por un dispositivo biotecnolgico


que debe proveer internamente un ambiente
controlado que garantice y maximice la produccin
y el crecimiento de un cultivo vivo; esa es la parte
biolgica
Externamente el biorreactor es la frontera que
protege ese cultivo del ambiente externo:
contaminado y no controlado
El biorreactor debe por tanto suministrar los
controles necesarios para que la operacin o
proceso (bioproceso) se lleve a cabo con economa,
alto rendimiento (productividad) y en el menor
tiempo posible; esa es la parte tecnolgica.

El conjunto birreactor-sistema
de cultivo debe cumplir con los
siguientes objetivos:
Mantener las clulas uniformemente distribuidas en todo el
volumen de cultivo.
Mantener constante y homognea la temperatura.
Minimizar los gradientes de concentracin de nutrientes
Prevenir la sedimentacin y floculacin.
Permitir la difusin de gases nutrientes a la velocidad
requerida por el cultivo.
Mantener el cultivo puro.
Mantener un ambiente asptico.
Maximizar el rendimiento y la produccin.
Minimizar el gasto y los costos de produccin.
Reducir al mximo el tiempo.

Clasificacin de los biorreactores


Clasificacin operativa
El modo de operacin de un sistema de cultivo, es
sinnimo del modo de operar del birreactor o
fermentador. ste no solo influye en el diseo
propio del reactor, tambin, en el modelo cintico
de crecimiento del cultivo y en el proceso de
produccin.

Existen
tres
modos
bsicos de operacin:
Discontinuo: Se coloca dentro del biorreactor la carga total
de cada proceso (tanda o lote) de cultivo o fermentacin y
para luego dejar que se lleve a cabo el proceso productivo o
la fermentacin por el tiempo que sea necesario; el cul se
denomina tiempo de retencin.
Semicontinuo : Se alimenta una lnea de entrada o
alimentacin para que el sistema de cultivo tenga un
producto
(biomasa)
con
mximo
de
crecimiento
(exponencial) y aumente la productividad.
Continuo (quimioestato): Se alimenta una lnea de
entrada o alimentacin y se drena una lnea de salida o
lavado; de manera que los flujos o caudales de ambas lneas
sean iguales y la produccin sea continua.

Clasificacin de los Bioreactores


Clasificacin Biolgica
Los sistemas biolgicos deben interaccionar con el ambiente
externo para poder crecer y desarrollarse; es por eso que los
biorreactores se clasifican biolgicamente de acuerdo al
metabolismo procesal del sistema de cultivo:
Anaerbico: Equipos dedicados a m.o. de metabolismo
degradativo (Bacterias); estos m.o. son autnomos y
nutricionalmente independientes; sus clulas no respiran, en
cambio, utilizan vas alternas, donde una molcula orgnica,
producida durante el proceso metablico, es utilizada como
aceptor de electrones, en un proceso bioqumico conocido
como respiracin oxidativa; esta molcula es reducida a
producto orgnico en un proceso comnmente denominado
fermentacin.

Facultativo: Reactores ambivalentes, dedicados a m.o.


que tienen la capacidad de vivir o sobrevivir entre
ambientes: aerbico y anaerbico; son m.o. de
metabolismo mixto por lo que, pueden tanto degradar
(catabolismo) como construir (anabolismo) materia
orgnica, a partir de diferentes sustratos, tanto
orgnicos como inorgnicos. Pese a su versatilidad, sus
mayores representantes son microorganismos que
presentan relaciones parsitas o simbiontes tales como:
hongos y levaduras, por lo que no son muy extensos.
Aerbico: Reactores dedicados a m.o. y clulas que
respiran; por lo que su metabolismo es constructivo y
deben obtener sus nutrientes de diferentes fuentes. Sus
principales grupos estn representados por: bacterias y
microorganismos aerbicos, plantas y animales; cuyas
clulas se puedan cultivar en suspensiones celulares o
bien, en diferentes arreglos artificiales o modificadas.

CATALIZADORE
Scatalizador es una sustancia (Compuesto o elemento ) capaz de
Un
acelerar (catalizador positivo ) o retardar (catalizador negativo o
inhibidor ) una reaccin qumica, permaneciendo este mismo
inalterado (no se consume durante la reaccin). A este proceso se
llama catlisis.
En el mundo natural hay catalizadores biolgicos o biocatalizadores, lo
mas importante son las enzimas, de naturaleza proteica aun que
tambin existe cidos ribonucleicos denominados ribozimas
Los catalizadores pueden ser de dos tipos:
Homogneos.- Cuando los catalizadores estn en la misma fase
que los reactivos.
Heterogneos o de contacto.- Cuando los catalizadores estn en
distintas fases que los reactivos

Biocatalizadores
Un biocatalizador es un catalizador de las reacciones
bioqumicas
de
los
seres
vivos.
Se
consideran
biocatalizadores las enzimas, las hormonas y las vitaminas.
Un biocatalizador reduce la energa de activacin de una
reaccin qumica, haciendo que sta sea ms rpida o ms
lenta. Cada reaccin qumica en un ser vivo, ya sea unicelular
o multicelular, requiere la presencia de uno o ms
biocatalizadores (enzimas), pues si no existieran stas
ocurriran en desorden total.

Enzimas
Las enzimas son los
catalizadores
biolgicos
que
facilitan
las
reacciones qumicas que
tienen lugar en los seres
vivos.
Sin
ellas
las
reacciones
qumicas
seran tan lentas que la
vida se detendra

Enzimas que se emplean en


diferentes procesos de la industria
alimenticia
INDUSTRIA

ENZIMAS

Lctea

Tripsina. Lactasa

Quesera

Quimosina
(renina). Lactasa.
Lipasa

Helados

Lactasa. Glucosaisomerasa

Crnicas

Papana. Fiscina.
Bromelina

USOS
Enmascara el gusto a xido.
Fabricacin de leche delactosada,
evita la cristalizacin de leche
concentrada.
Coagulacin de las protenas de
la leche (casena). Influencia en
el sabor y aceleracin de la
maduracin.
Evita la textura arenosa
provocada por la cristalizacin.
Permite la utilizacin de jarabes
de alta fructosa.
Ablandamiento de carnes.
Produccin de hidrolizados.

INDUSTRI
A

ENZIMAS

USOS
Mejora la calidad del pan.
Amilasa. Proteasa. Disminuye la viscosidad de la
Panificaci
Lipoxidasa.
pasta. Produce una miga muy
n
Lactasa
blancaMejora la coloracin de la
superficie.
Usadas para licuar la pasta de
Amilasas. Papana. malta. Evitan la turbidez durante
Cervecera
Pepsina
la conservacin de ciertos
productos.
Mejoran la clarificacin y
Vinificaci Pectinasas.
extraccin de jugos. Evitan el
n
Glucosa-oxidasa
oscurecimiento y los sabores
desagradables.
Mejoran la clarificacin de jugos.
Conversin de la glucosa en
Pectinasas.
Bebidas
fructosa (jarabes de alta
Glucosano
fructuosa). Aumenta la
isomerasa.
alcohlica
solubilidad y disminuye la
Tannasa. Glucosas
turbidez del t. Evita el
oxidasa

ESTEQUIOMETRIA DE
CRECIMIENTO CELULAR Y
DE LA FORMACION DE
PRODUCTOS

CRECIMIENTO DE MICROORGANISMOS
El estudio cintico de los reactores nos permite
conocer el volumen y flujo de operacin y es por
ello que se hace necesario contar con modelos
matemticos que describan el crecimiento y/o
formacin de productos en un cultivo del que
conocemos su curva de crecimiento.

CICLO DE CRECIMIENTO DE
POBLACIONES
En un cultivo bacteriano en medio lquido, se pueden
diferenciar cuatro fases en laevolucinde los parmetros que
miden el crecimiento microbiano:

CICLO DE CRECIMIENTO DE
POBLACIONES
1.- Fase lago de adaptacin:
Es la fase durante la que los microorganismos adaptan
sumetabolismoa las nuevas condiciones ambientales (de
abundancia de nutrientes) para poder iniciar el crecimiento
exponencial.
2.-Fase exponencial o logartmica:
En ella lavelocidadde crecimiento es mxima y el tiempo de
generacin es mnimo. Durante esta fase las bacterias
consumen los nutrientes del medio a velocidad mxima.

CICLO DE CRECIMIENTO DE
POBLACIONES
3.-Fase estacionaria:
Las clulas en fase estacionaria desarrollan un metabolismo
diferente al de la fase de exponencial y durante ella se produce
una acumulacin y liberacin de metablicos secundarios que
pueden tener importancia en el curso de las infecciones o
intoxicaciones producidas por bacterias.
4.-Fase de muerte:
Se produce una reduccin del nmero de bacterias viables del
cultivo.
Las fases, parmetros y cintica de crecimiento discutidas para
el caso de los medios lquidos se presentan tambin en los
slidos.

La estequiometria es de
aplicacin en bioprocesos, que
permite:
1. El balance de masa y energa
2.Determinarel rendimiento terico y
compararlo con el rendimiento actual del
producto.
3.Chequearla consistencia de datos dela
fermentacin experimental
4. Formulacin del medio de nutrientes.

CARACTERISTICAS DE UN M.O.
INDUSTRIAL
1.-Un microorganismo de uso industrial
debe producir la sustancia de inters
2.-.-Debe estar disponible en cultivo puro;
(axnico)
3.-Debe ser genticamente estable
4.-Debe crecer en cultivos a gran escala.
5.- Otra caracterstica importante es que el
microorganismo industrial crezca
rpidamente
6.-Produzca el producto deseado en un
corto perodo de tiempo.

CARACTERISTICAS DE UN
M.O. INDUSTRIAL
7.-El microorganismo debe tambin crecer
en un relativamente barato medio de
cultivo disponible en grandes cantidades.
8.- Adems, un microorganismo industrial
no debe ser patgeno para el hombre o
para los animales o plantas.
9.-Otro requisito importante es la facilidad
de separar las clulas microbianas del
medio de cultivo; la centrifugacin es
dificultosa o cara a gran escala.

FACTORES FSICOS Y QUMICOS


QUE INFLUYEN EN EL
CRECIMIENTO

Temperatura: Cada microorganismo tiene una temperatura


de crecimiento adecuada. Si estudiamos la variacin de la
velocidad de crecimiento en funcin de la temperatura de
cultivo, Existe una temperatura mnima por debajo de la que
no hay crecimiento; a temperaturas mayores se produce un
incremento lineal de la velocidad de crecimiento con la
temperatura de cultivo hasta que se alcanza la temperatura
ptima a la que la velocidad es mxima. Por encima de esta
temperatura ptima, la velocidad de crecimiento decae
bruscamente y se produce la muerte celular
Tipos de microorganismos en funcin de sus temperaturas de
crecimiento mnima, mxima y ptima

Actividad de agua: Se denomina actividad de agua a la


relacin entre la presin de vapor de agua del substrato de
cultivo (P) y la presin de vapor de agua del agua pura (P0).
Cuando un microorganismo se encuentra en un substrato
con una actividad de agua demasiado baja, su crecimiento
se detiene. Esta detencin del crecimiento no suele llevar
asociada la muerte del microorganismo, sino que ste se
mantiene en condiciones de resistencia durante un tiempo
ms o menos largo.
La gran mayora de los microorganismos requiere unos
valores de actividad de agua muy altos para poder crecer.
De hecho, los valores mnimos de actividad para diferentes
tipos de microorganismos son, a ttulo orientativo, los
siguientes:
Bacterias

aw >0.90,
Levaduras aw>0.85,
Hongos filamentosos aw>0.80

pH: Es un parmetro crtico en el crecimiento de


microorganismos
ya
que
cada
tipo
de
microorganismo slo puede crecer en un rango
estrecho de pH fuera del cual mueren
rpidamente.
El pH interno en la mayora de los microorganismo
est en el rango de 6.0 a 7.0.
Los rangos de pH tolerables por diferentes tipos de
microorganismos son, tambin, distintos. Hay
microorganismos acidfilos que pueden vivir a
pH=1.0 y otros alcalfilos que toleran pH=10.0

Potencial redox: indica la capacidad del


substrato para aceptar o donar electrones, esto es:
sus caractersticas oxidantes o reductoras. Uno de
los factores que intervienen en el potencial redox,
aunque no el nico, es la concentracin de
oxgeno [O2].
En general, cuando un microorganismo requiere
un ambiente oxidante se dice que desarrolla un
metabolismo oxidativo (o respirativo) mientras que
los microorganismos que requieren ambientes
reductores (o menos oxidantes) realizan un
metabolismo fermentativo.
Por otra parte, hay microorganismos que pueden
desarrollar ambos tipos de metabolismo. Esto es:
en
presencia
de
oxgeno
desarrollan
un

Formula del medio y


factores de rendimiento

Frmula emprica para clulas


microbianas
En 1956, una de las primeras frmulas empleadas para
representar clulas microbianas fue C5H7O2N, durante
un estudio de tratamiento biolgico de aguas residuales
que contenan casena.
Actualmente se sabe que las proporciones msicas de
cada elemento varan de:
Microorganismo a microorganismo.
Dependiendo el tipo de sustrato del que se este

obteniendo energa.
Dependiendo los nutrientes presentes en el medio.
Si se trata de una cepa pura o de un consorcio
bacteriano.

La tabla siguiente, muestra diferentes


frmulas empricas para el proceso de
metanognesis a partir de distintos sustratos.

Metanognesis es la formacin de metano por microbios. Es una forma de


metabolismo microbiano muy importante y extendida. En la mayora de los entornos,
es el paso final de la descomposicin de la biomasa.

Rendimiento y crecimiento
microbiano

El crecimiento de la clula es un fenmeno muy complejo, se


puede tener una descripcin del mismo de manera sencilla.
La ecuacin comnmente usada es la de Monod:

Rendimiento y crecimiento
microbiano

Considerando que el rendimiento microbiano se encuentra


en relacin con las velocidades de aparicin y desaparicin
de las diferentes especies, de manera una vez caracterizado
el comportamiento de una de ellas, se puedan obtener las
dems.

Por lo tanto los rendimientos se definen como la relacin


entre el producto obtenido y el sustrato consumido
(usualmente la fuente de carbono y energa). Por ejemplo el
rendimiento celular se define como:

X y S representan la concentracin de biomasa y sustrato


respectivamente.

Rendimiento y crecimiento
microbiano

En la prctica, para el clculo del Yx/s se emplea la


expresin:

Si adems de microorganismos se forma algn producto en


particular, el rendimiento en producto estar dado por:

Se ha encontrado que la composicin elemental de


un microorganismo dado durante un cultivo no se
modifica mayormente, lo que es ms las
composiciones elementales de distintos tipos de
microorganismos
(bacterias
y
hongos)
son
semejantes.
De este modo se puede definir un "microorganismo
promedio" como aqul cuya composicin es (%
p/p):
C

= 46.5 % p/p
H = 6.49 % p/p
0 = 31.0 % p/p

Teniendo en cuenta la composicin media anterior, es

posible escribir la "frmula mnima" de un


microorganismo promedio como:

En la que est representado el 95% p/p de la biomasa y


con fines netamente prcticos definir "un C-mol de
biomasa" como la cantidad de biomasa que contiene
un tomo gramo de Carbono.

Puesto que los rendimientos estn referidos a 1 Cmol de fuente de Carbono y energa, resulta

La sumatoria del rendimiento de la biomasa,


rendimiento del producto deseado y rendimiento
de CO2 debe ser igual a la unidad.

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