Proceso de Bioseparacin

Unidad I
RUPTURA CELULAR
CLASE 4

Visto anteriormente
Ruptura celular. Usos
Mtodos NO mecnicos
Ttto Enzimtico, Shock osmtico,
Solubilizacin
Teora, metodologa.
Ventajas, desventajas, ejemplos

Resistencia
Temperatura
a:

Ruptura
Celular

Medios alcalinos
Detergentes
Enzimas
Esfuerzos de corte

Mtodos
NO
mecnicos
Mtodos
mecnicos

Mtodos mecnicos

Pequea Escala
Ultrasonificacin
Molino con abrasivos
Homogenizadores

Gran Escala
Homogenizadores a alta
presin
Molinos de bolas o perlas

Ultrasonificacin
Se producen zonas de baja presin en el lquido
El lquido se transforma en gas formndose pequeas
burbujas
Las burbujas colapsan debido a los cambios de presin.
Se producen fuertes esfuerzos de corte en el lquido que
rompen las clulas.

Ultrasonificacin
Desventajas
Produccin de radicales libres
Destruccin del producto por las
ondas
Destruccin del producto por la
temperatura
Altos costos
Requerimientos de energa a
considerar

Modelo emprico

: concentracin del producto liberado

Cmx : mxima concentracin del material liberado
t : tiempo
: constante de tiempo

Clulas de levadura fueron dispuestas a vibraciones

ultrasnicas para realizar la disrupcin o ruptura celular.
La concentracin del producto liberado en la solucin fue
medida durante el proceso, tal como lo muestra la
siguiente tabla:
Tiempo (s)

Concentracin (mg/mL)

60

3,49

120

4,56

PREDIGA la concentracin del producto final, si la

disrupcin

celular

mediante

realizada durante 240 s,

ultrasonificacin

fue

Molino con abrasivos

Se utilizan agentes abrasivos como bolas de vidrio.
El sistema se hace vibrar produciendo:
Colisiones de las bolas con la biomasa
Fuertes esfuerzos de corte.
Ruptura celular.
Finalmente se separan las bolitas y los desechos
celulares, recuperndose el sobrenadante.

Homogenizadores
Generan altos esfuerzos de corte produciendo ruptura de las
clulas.

mbolos

Cuchillas

Pistones

Mtodos mecnicos

Pequea Escala
Ultrasonificacin
Molino con abrasivos
Homogenizadores

Gran Escala
Homogenizadores a alta
presin
Molinos de bolas o perlas

Homogenizadores a alta presin

Mtodo NO selectivo
Se componen de:
Pistn a alta presin
Laboratorio
Industria

Vlvulas

Homogenizadores a alta
presin

Presin
Alimentac
in
0,1-0,5
MPA

Presin Mxima
Compresin
60 MPA

Homogenizadores a alta
presin

Configuracin de las vlvulas usadas en el

homogenizador

Homogenizadores a alta
presin
Mecanismo de Desintegracin celular

Homogenizadores a alta
presin
Presin de operacin

Liberacin de D-glucosa-6fosfato-deshidrogenasa de
S.Cerevisiae

Homogenizadores a alta
presin
Presin de operacin

Homogenizadores a alta
presin
Tipo de vlvula

Homogenizadores a alta
presin
Tipo de vlvula

Homogenizadores a alta
presin
Localizacin del producto

Temperatura

Homogenizadores a alta
presin
Nmero de pasadas

Ruptura
Celular
Mtodos
NO
mecnicos
Mtodos
mecnicos

Molino de bolas o
perlas

Homogenizadores a alta
presin

Diseo

Protena liberada R/Rm

Homogenizadores a alta
presin

Nmero de pasadas

Cmo saber el nmero de

pasadas?

Homogenizadores a alta
presin
Integrando la ecuacin anterior llegamos lo
siguiente:

Por lo
general:

Se llega finalmente a la ecuacin

de diseo:

Homogenizadores a alta
presin
ESCALAMIENTO
Potencia consumida.

Porcentaje de Protena
liberada

Homogenizadores a alta
presin
Efecto en la Temperatura

Densidad
Calor
Especfico

Diferencia
de
Temperatur
a

Ruptura
Celular
Mtodos
NO
mecnicos
Mtodos
mecnicos

Molino de bolas o
perlas

Molinos de bolas o
perlas

Los discos, barras o anillos permiten solo el paso de

las clulas a travs de la cmara, no as el de las
bolas

Molinos de bolas o perlas

Caractersticas de
Diseo de la cmara
Longitud/Dimetro
Volumen de la cmara

Molinos de bolas o perlas

Mecanismo
Transporte de energa cintica
desde el agitador hacia las bolas
de vidrio.
Formacin de perfiles de velocidad
al interior de la cmara.
Se generan esfuerzo de corte,
aumentando la frecuencia y
fuerza de las colisiones en las
bolitas y las clulas.

Molinos de bolas o perlas

Molinos de bolas o perlas

Velocidad del
agitador

Molinos de bolas o perlas

Molinos de bolas o perlas

Diseo del
agitador

Molinos de bolas o perlas

Molinos de bolas o perlas

Velocidad de
alimentacin

Molinos de bolas o perlas

Tamao de las bolitas de
vidrio

Escala

Tipo de clula

Localizacin
del producto
de inters

Molinos de bolas o perlas

Carga de bolitas de vidrio

Concentracin celular
40-50 % en peso
hmedo.

Efecto de la
temperatura

ptima entre 5-15

C

Molinos de bolas o perlas

Tiempo de residencia

Molino de bolas o perlas.

DISEO
Operacin BATCH
Cmo medir el grado de rompimiento?

Direct
a

Indirect
a

Molino de bolas o perlas. DISEO

Al igual que los homogenizadores de alta presin, la
cintica de rompimiento se considera de 1er orden.

Molino de bolas o perlas

ESCALAMIENTO

Molino de bolas o perlas

ESCALAMIENTO

: densidad de la suspensin
N: velocidad de rotacin de los impeler
D: dimetro del impeler.
c: constante