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Princpios da Biologia

Molecular Microbiana

Pelczar Cap. 13, Pg. 332-357


Nogueira & Silva Filho Pg. 36-49

Definio
Gentica (do grego genno; fazer nascer)
a cincia da hereditariedade e da variabilidade dos organismos.

A variabilidade uma
caracterstica necessria dos
organismos vivos , tanto quanto
sua constncia.

Estrutura do DNA
Nucleotdeos

A=
T
C
G

Estrutura do DNA

Procariotos - A Clula Duplica o


Material Gentico Antes da Diviso
Os microrganismos apresentam
Celular
elevadas velocidades metablicas.
Em algumas horas vrias geraes
podem surgir
Ex: E. coli: 3 geraes em 1 hora.

clones

Replicao do DNA em Procariotos

Nogueira & Silva Filho, 2010

Replicao do DNA em Eucariotos

Eucariotos: superenovelamento estabilizado


pelas histonas

Em Archaea tanto histonas


quanto DNA girase

Transcrio, Traduo e Sntese de


Protenas
Transcrio (DNA RNA)
Uma fita do DNA serve de molde (sense strand)
Tem Uracil (U) no lugar de Timina (T)
RNA fita simples
Trs tipos de RNA com diferentes funes:
mRNA (RNA mensageiro): especifica a sequncia de aa
tRNA (RNA de transferncia): usa a informao
contida no mRNA e traduz essa informao em uma
sequncia de aa
rRNA (RNA ribossmico): forma os ribossomos
responsveis pela traduo do RNA em protenas

Transcrio do DNA

Pelczar et al., 2009

2a base
U

1a
base

UUU (Phe/F) Fenilalanina


UUC (Phe/F) Fenilalanina
U UUA (Leu/L) Leucina
UUG (Leu/L) Leucina

UCU (Ser/S) Serina


UCC (Ser/S) Serina
UCA (Ser/S) Serina
UCG (Ser/S) Serina

UAU (Tyr/Y) Tirosina


UAC (Tyr/Y) Tirosina
UAA "Ocre" (Stop)
UAG "mbar" (Stop)

UGU (Cys/C) Cistena


UGC (Cys/C) Cistena
UGA "Opala" (Stop)
UGG (Trp/W)
Triptofano

CUU (Leu/L) Leucina


CUC (Leu/L) Leucina
C CUA (Leu/L) Leucina
CUG (Leu/L) Leucina

CCU (Pro/P) Prolina


CCC (Pro/P) Prolina
CCA (Pro/P) Prolina
CCG (Pro/P) Prolina

CAU (His/H) Histidina


CAC (His/H) Histidina
CAA (Gln/Q) Glutamina
CAG (Gln/Q) Glutamina

CGU (Arg/R) Arginina


CGC (Arg/R) Arginina
CGA (Arg/R) Arginina
CGG (Arg/R) Arginina

AUU (Ile/I) Isoleucina


AUC (Ile/I) Isoleucina
A AUA (Ile/I) Isoleucina
AUG (Met/M) Metionina, Start

ACU (Thr/T)Treonina
ACC (Thr/T)Treonina
ACA (Thr/T)Treonina
ACG (Thr/T)Treonina

AAU (Asn/N) Asparagina


AAC (Asn/N) Asparagina
AAA (Lys/K) Lisina
AAG (Lys/K) Lisina

AGU (Ser/S) Serina


AGC (Ser/S) Serina
AGA (Arg/R) Arginina
AGG (Arg/R) Arginina

GCU (Ala/A) Alanina


GCC (Ala/A) Alanina
GCA (Ala/A) Alanina
GCG (Ala/A) Alanina

GAU (Asp/D) cido


asprtico
GAC (Asp/D) cido
asprtico
GAA (Glu/E) cido
glutmico
GAG (Glu/E) cido
glutmico

GUU (Val/V) Valina


GUC (Val/V) Valina
G GUA (Val/V) Valina
GUG (Val/V) Valina

GGU (Gly/G) Glicina


GGC (Gly/G) Glicina
GGA (Gly/G) Glicina
GGG (Gly/G) Glicina

Transcrio, Traduo e Sntese de


Protenas
Traduo (DNA Protenas)
Participao do: mRNA e tRNA

cdon

Aminocidos
Protenas

anticdon

Variabilidade em Microrganismos

A variabilidade est associada a duas propriedades:


Gentipo: potencial total herdado
Procariotos: cromossomo + qualquer DNA presente (p. ex. Plasmdeos)
Eucariotos: cromossomo + DNA organelas (mitocndrias e cloroplastos)

Fentipo: expresso de uma poro do gentipo.


Condies ambientais tambm podem influenciar o fentipo
Ex. Azomonas spp.
- meio com sacarose: colnias mucosas e grandes
- meio sem sacarose: colnias secas e pequenas

VARIAES GENOTPICAS
Ocorre graas a dois
mecanismos:
1) Mutaes
Alteraes (hereditrias) na sequncia de
nucleotdeos de um gene.
- Geralmente resultam em pequenas alteraes
genticas (uma em vrios milhes de clulas)

2) Recombinao gentica
Elementos genticos contidos em dois genomas
diferentes so reunidos numa unidade nova combinao de genes.
- Provoca alteraes mais significativas.

VARIAES GENOTPICAS
Mutaes
Mudanas hereditrias na sequncia
de nucleotdeos de um gene
Diferentes tipos
Substituio de bases (troca de bases)
Mutaes de remoo (remoo de
bases)
Adio ou perda de bases (protenas no
funcionais)
Mutaes sem sentido (trmino da
cadeia de aa)
Mutaes silenciosas (no acarreta

Substituio de uma Base


(pontual)

COMO DETECTAR MUTAES?

Mutantes resistentes crescendo dentro de


uma zona de inibio

AGENTES MUTAGNICOS
Agentes qumicos: anlogos de
base
Radiaes: raios-X, luz ultravioleta
Transposons

AGENTES MUTAGNICOS
Agentes qumicos: anlogos de
base
Radiaes: raios-X, luz ultravioleta
Transposons

Agentes mutagnicos e seu modo de ao


Agente
Anlogos de base
5-bromouracil
2-aminopurina

Ao
Substitui T, mas pareia
com G
Substitui A, mas pareia
com C

Qumicos que reagem com o DNA


cido nitroso (HNO2)
Desamina A e C
Hidroxilamina (NH2OH)
Agentes alquilantes
Monofuncional (ex. sulfonato de
etil metano)
Bifuncionais (ex. gs mostarda,
nitrosoguanidina)
Corantes intercaladores
Acridinas, brometo de etdio
Radiao
Ultravioleta
Radiao ionizante (ex. raios X)

Reage com C

Resultado
Troca de AT por GC
Troca de AT por GC

Troca de AT por GC
Troca de GC por AT
Troca de GC por AT

Metilao de G, que passa


a parear com T
Ligao cruzada das fitas de
DNA, a regio cortadadeleo
pela DNA polimerase

Troca de GC por AT

Inserem-se entre nucleotdeos

Microinseres e
microdelees

Formao de dmeros de
pirimidina
Formao de radicais livres que
quebram o DNA

Reparos podem levar


erros ou delees

Mutao pontual e

AGENTES MUTAGNICOS
Agentes qumicos: anlogos de
bases
Radiaes: raios-X, luz ultravioleta
Transposons

Mutagnese por elementos


transponveis
* transposase
* repeties invertidas
* baixa frequncia: 10-5 a 10-7 por gerao (1/10,000,000)

RECOMBINAO GENTICA
Formao de um novo gentipo
Trocas de material gentico entre dois
cromossomos homlogos (crossing
over)
eucariotos: MEIOSE
procariotos:RECOMBINAO

RECOMBINAO GENTICA
Transformao
Avery, MacLeod & McCarthy (1944)

Conjugao
Ledeberg & Tatum (1946)

Transduo
Zinder & Ledeberg (1952)

Recombinao Gentica

Transformao

Recombinao Gentica

Conjugao
Natureza:
- Contato entre clulas
- Plasmdeo ou cromossomo

Nogueira & Silva Filho, 2010

Recombinao Gentica

Transduo

Natureza:
- Vrus como vetor (bacterifagos ou
fagos)
- Generalizada e Especializada