Está en la página 1de 106

DIAGNOSTICO DE

LEUCEMIAS AGUDAS

De la morfologa a la

biologa molecular

LEUCEMIAS AGUDAS

Proliferacin clonal de blastos


con detencin en la maduracin
en la mdula sea

SIGNOS Y SINTOMAS
DE
Signo o Sntoma
LLA
LMA
PRESENTACION
Fiebre
Hemorragia

50%
42%

Coagulopata

Infrecuente

Frecuente

Adenopatas

Frecuente

Infrecuente

Hepatoesplenomegalia

Frecuente

Infrecuente

Dolor seo
Dolor abdominal

10-20%
Frecuente

30%
30%

18%
Infrecuente

CONSECUENCIAS DE LA
EXPANSIN
CELULAR
OTROS ORGANOS
DESTRUCCION DE
MEDULA OSEA
BLASTOS
Fallo medular
perifrico

Hepatoesplenomegalia

Hiperuricemia

a) anemia

Adenopatas

Hipercalcemia

b) Neutropenia
infecciones

Infiltracin en
SNC, piel y
testculos

Hiperkalemia

c)Trombocitopenia
Sangrado
Dolor seo
Dolor Abdominal

CID

DIAGNOSTICO

Evaluacin morfolgica ( > 30%


de blastos en MO
Evaluacin citoqumica
Clasificacin inmunolgica
Clasificacin citogentica
Evaluacin molecular

DIAGNOSTICO MORFOLOGICO (FAB)

MORFOLOGIA EN LAL L1 (FAB)

Tamao pequeo
Ncleo regular y
redondo
Nucleolo no visible o
pequeo
Citoplasma escaso
Basofilia
citoplasmtica ligera

MORFOLOGIA LAL L1 (FAB)

MORFOLOGIA LAL L1 (FAB)

Morfologa LAL L2 (FAB)

Tamao nuclear
grande y
heterogneo
Ncleo Regular con
hendiduras
Nucleolo grande
Citoplasma
abundante
Basofilia
citoplasmtica

Morfologa LAL L2 (FAB)

Morfologa LAL L3 (FAB)

Tamao celular
grande y
homogeneo
Ncleo regular,
oval o redondo
Nucleolo grande
Citoplasma
moderado
Basofilia fuerte
Vacuolas

Morfologa LAL L3 (FAB)

CITOQUIMICA EN LAL
TdT PAS

L1

L2

L3

+/+/+/-

Mieloperoxidasa

SudanNegroB

ANAE

CITOQUIMICA EN LAL

MORFOLOGIA EN LAM (FAB)

LAM M0

(Mielomonocitica)

(indiferenciada)

LAM M1

(Mieloblastica sin
maduracin)

LAM M2

- LAM M4 Eo
LAM M5 (Monoctica)
- M5a (monoblastica)
- M5b (monocitca con
maduracin)

(Mieloblastica con
maduracin)

LAM M3

(Promielocitica)

LAM M4

LAM M6

(Eritroleucemia)

LAM M7

(Megacarioblastica)

MORFOLOGIA LAM M0

MORFOLOGIA LAM M1

MORFOLOGIA LAM M1

MORFOLOGIA LAM M2

MORFOLOGIA LAM M2

MORFOLOGIA LAM M3

MORFOLOGIA LAM M3

MORFOLOGIA LAM M4

MORFOLOGIA LAM M4

MORFOLOGIA LAM M5

MORFOLOGIA LAM M5

MORFOLOGIA LAM M6

MORFOLOGIA LAM M6

MORFOLOGIA LAM M7

MORFOLOGIA LAM M7

CITOQUIMICA EN LAM
Mieloperoxidasa

M0

M1
M2
M3
M4
M5
M6
M7

+
+
+
+
+/+
-

S.Negro B

ANAE

PAS

+
+
+
+
+/+
-

+
+
-

CITOQUIMICA EN LAM
MIELOPEROXIDASA

DIAGNOSTICO
INMUNOLOGICO

Asignar el linaje a la proliferacin blastica


Establecer existencia de leucemias
bilineales, bifenotipicas/hibridas
Establece maduracin y pronostico ?

Empleo de anticuerpos para identificar antigenos


en una suspensin celular o en un corte tisular
La visualizacion del complejo Ag-Ac se logra al
marcar el Ac con un indicador,como fluorocromo o
una enzima que puede observarse por microscopio
Produccion de anticuerpos:
-Policlonales: se producen en diferentes
celulas,diferentes unas de otras y reaccionan con
distintos epitopos del mismo antigeno
-Monoclonales: son derivados de una sola celula
clonada y son especificos para un determinado
epitopo en un solo antigeno

Produccin de AcMo
Cultivo de
clulas de
mieloma

Fusin de clulas y cultivo en placa


en medio selectivo
Deteccin de hbridos que sintetizan
el anticuerpo deseado

Clulas de mieloma
HGPRT-Ig-

Clulas B
HGPRT+lg+

Inmunizacin
Adaptado de Khler et al. Nature. 1975;256:495.

Hibridoma
seleccionado

Crecimiento
de cultivo
en masa
Anticuerpo
monoclonal
(AcMo)

CITOMETRIA DE FLUJO

Tcnicas
inmunofluorescentes,
Inmunofenotipificacion

En la diferenciacin y maduracin celular se


expresan genes, algunos de los productos
especficos se expresan en la superficie celular,
esto permite caracterizar subpoblaciones celulares.

El estudio de los patrones antigenicos expresados


por una leucemia o un linfoma se denomina
INMUNOFENOTIPIFICACION
Se utiliza para confirmar el linaje mieloide o
linfoide en leucemia aguda, en linfomas se realiza
para identificar proceso linfoide clonal y clasificar
estos transtornos.

CITOMETRIA DE FLUJO

CITOMETRIA DE FLUJO

CITOMETRIA DE FLUJO

CITOMETRIA DE FLUJO

CLASIFICACION
INMUNOLOGICA DE LAL
(Lnea B)

FENOTIPO

Pro- B
B- comn
Pre-B
B

CD19

CD22

CD10

IgC-u IgS

TdT

+/-

-/+

CLASIFICACION
INMUNOLOGICA DE LAL
(Lnea T)

Fenotipo
PreT
T Precoz
T Cortical
Tmedular

TdT

CD7

CD3c

CD2

CD3s

CD1

CD4 CD8

+
+
+
+

+
+
+

+
+
+
+

+
+
+

+
-

+
+/-

+
-/+

CLASIFICACION INMUNOLOGICA

FENOTIPO

Pre B temprana

Pre-B

Pre B transicional

B Madura

Frecuencia %
55-60
20-25
3-5
2-3
13-15

CLASIFICACION
INMUNOLOGICA DE LAM
TdT

DR

M0

+/-

M1

M3

M4 M5

M6
(CD71
)
M7
(CD41
CD42)

CD33
+

CD13
+

CD14
-

CARIOTIPO EN LEUCEMIAS

22

El Cromosoma Ph y el
Gene bcr-abl
Cromosoma 22
9 q+

Cromosoma 9
cbcr

2-11

c-abl

Ph (or 22q-)

22

2-11
2-11

bcr
bcr-abl
abl

FUSION
PROTEIN
WITH
TYROSINE
KINASE
ACTIVITY

Traslocacin t(9;22)

Exons

p210BcrAbl
p185BcrAbl

Introns
CML Breakpoints
ALL Breakpoints

Estructura del gene bcr-abl

ALTERACIONES
CITOGENETICAS EN LAL

Anomalas numricas
Hiperdiploidia 20 % ( nios)

Anomalas Estructurales

t (12;21)
t (1;14)
t (1;19)
t (9;22)
t ( 4;11)
t (8;14)

25%
8%
6%
4%
4%
2%

22

El Cromosoma Ph y el Gene bcr-abl

Cromosoma 22
9 q+

Cromosoma 9
cbcr

2-11

c-abl

Ph (or 22q-)

22

2-11
2-11

bcr
bcr-abl
abl

FUSION
PROTEIN
WITH
TYROSINE
KINASE
ACTIVITY

Traslocacin t(9;22)

Exons

p210BcrAbl
p185BcrAbl

Introns
CML Breakpoints
ALL Breakpoints

Estructura del gene bcr-abl

ALTERACIONES
CITOGENETICAS EN LAL

Anomalas numricas
Hiperdiploidia 20 % ( nios)

Anomalas Estructurales

t (12;21)
t (1;14)
t (1;19)
t (9;22)
t ( 4;11)
t (8;14)

25%
8%
6%
4%
4%
2%

ALTERACIONES
CITOGENETICAS EN LAM

t (8;21)
t (15;17)
Inv 16

LAM M2
LAM M3
LAM M4 eo

ALTERACIONES
CITOGENETICAS EN LAM
CARIOTIPO EN LEUCEMIAS

Sistema de clasificacin de la Organizacin Mundial de la Salud

Expresin de mutacion FLT3 como blanco en


LAM

Las mutaciones en este receptor implican su activacin potenciando la


proliferacin de las clulas leucmicas y bloqueando la respuesta apopttica
celular frente a la quimioterapia convencional.

PRONOSTICO EN LAM

TRATAMIENTO.

Tratamiento de LAL :
-Induccion a la remision
-Profilaxis a SNC (QT intratecal)
-Consolidacion
-Mantenimiento e intensificaciones

Tratamiento de LAM:
-Induccion a la remision ( 7+3)
-Consolidacion ( QT con dosis altas de Citarabina versus
TMO)

MUCHAS GRACIAS