Está en la página 1de 73

UV-VISIBLE

Hernndez Tejeda Karla Mara


Alma lidia Manzo Cortes
Lupita
Abad
Vilchis Gmez Doane Santaluca

Medicin de la transmitancia y la absorbancia.


Ley de Beer.
Efectos del ruido instrumental en los anlisis
espectrofotomtricos.
Instrumentacin.
La magnitud de las absortividades molares.
Especies absorbentes.
Aplicaciones cualitativas de la espectroscopa de
absorcin en las regiones ultravioleta y visible.
Anlisis cuantitativo mediante mediciones de
absorcin.
Titulaciones fotomtricas y espectrofotomtricas.
Mtodos espectrofotomtricos cinticos.
Estudios espectrofotomtricos de iones
complejos.

Medicin de la transmitancia y la
absorbancia

La medida de la emisin y
la absorcin de la luz por
parte de las sustancias se
conoce como
espectrofotometra.
Los instrumentos
especficos utilizados para
la espectrofotometra se
denominan
espectrofotmetros,
espectrorradimetros o
espectrmetros.

La produccin y la
deteccin de la radiacin
requiere de diferentes
tcnicas en diferentes
regiones del espectro
electromagntico. Sin
embargo en todos los
mtodos espectromtricos
se miden
fundamentalmente dos
variables:
La longitud de onda de la
radiacin.
La cantidad de radiacin
de dicha longitud de onda.

Mtodos pticos

Mtodos
espectroscpicos.
Son aquellos en los que
existe intercambio de
energa entre la
radiacin
electromagntica y la
materia. En estos
mtodos se miden
espectros causados por
transiciones entre
distintos niveles
energticos.

Mtodos no espectroscpicos. Se
caracterizan porque no hay intercambio
de energa como consecuencia de la
interaccin materia-radiacin
electromagntica. Aqu ocurren cambios
en la direccin o propiedades fsicas de la
radiacin electromagntica.

Los mtodos de absorcin han sido, hasta


el momento, los de uso ms
generalizado. Se basan en la absorcin
selectiva de radiacin por la misma
especie a determinar o por un producto
de transformacin de dicha especie.

La espectrofotometra de absorcin en las


regiones ultravioleta y visible del espectro
electromagntico es, posiblemente, la ms
utilizada en la prctica del anlisis
cuantitativo de todas las tcnicas
espectroscpicas. Asimismo, puede resultar
como auxiliar para la determinacin de
estructuras de especies qumicas.

El trmino generalmente usado en la medida de


la radiacin absorbida es el de absorciometra,
normalmente se utiliza el trmino colorimetra
cuando se trabaja en la regin visible del
espectro y se emplean aparatos que utilizan
filtros para seleccionar la radiacin utilizada. Por
otra parte el trmino espectrofotometra suele
aplicarse cuando la radiacin se extiende a las
regiones ultravioleta e infrarroja, y adems, se
utilizan monocromadores en lugar de filtros

En la regin ultravioleta la zona de mayor


de inters en la prctica analtica
ordinaria es la denominada como
ultravioleta prximo (200-400nm)
pues la ultravioleta lejano o ultra violeta
al vaco presenta el inconveniente de que
el oxgeno atmosfrico absorbe en esa
regin, siendo necesario eliminarlo del
instrumento de medida.

Ley de Beer

Cuando un haz de radiacin monocromtica de


una determinada longitud de onda atraviesa
una capa de disolucin conteniendo una
especie absorbente, la potencia(energa por
unidad de tiempo y unidad de rea) del haz
incidente Po se atena disminuyendo hasta P

Se define a la transmitancia, T, como la


fraccin de radiacin incidente que
consigue atravesar la muestra. Vara de
0-1 y puede expresarse tambin como
porcentaje

Un parmetro de mayor utilidad en la


prctica es la absorbancia, definida como

Para una capa de disolucin absorbente


de espesor infinitamente pequeo, db, la
disminucin de la potencial radiante, dP,
es proporcional a la propia potencia
incidente, P, a la concentracin de la
especie absorbente, C, y al espesor, db:
dP= -k P C db
Donde k es una constante de
proporcionalidad. Reagrupando la
ecuacin anterior e integrando se
obtiene:

Dicha ecuacin se le conoce como Ley de


Beer. La cual es fundamental en anlisis
cuantitativo al relacionar la absorbancia
con la concentracin.

La constante recibe el nombre de


absortividad molar, cuando la
concentracin se expresa en Molaridad y
el camino ptico, b, en centmetros. La
absortividad es una propiedad
caracterstica de la sustancia absorbente
y depende de la longitud de onda.

La proporcionalidad entre la absorbancia


y la concentracin nicamente se cumple
para disoluciones muy diluidas,
observndose desviaciones ms o menos
acusadas al aumentar la concentracin

Las desviaciones en la Ley de Beer se


pueden clasificar de la siguiente forma:

Desviaciones reales

La absortividad depende del ndice de


refraccin, n, segn la expresin

A su vez el ndice de refraccin depende de


la concentracin, por ende la absortividad no
es rigurosamente constante para cualquier
concentracin, provocando desviaciones
negativas, sin embargo, en la prctica para
concentraciones inferiores a 10-3M puede
prescindirse de la influencia de este factor.

Desviaciones
instrumentales

Uso de radiacin no monocromtica.


La deduccin de la lay de Beer se hizo
sobre la base de utilizar la radiacin
monocromtica, lo cual, en sentido
estricto nunca se cumple.

Presencia de radiacin parsita. El


haz de radiacin que sale de un
monocromador suele estar contaminado
por pequeas cantidades de radiacin
parsita o dispersada originada por
reflexin de los distintos componentes
pticos, dispersin por partculas de
polvo atmosfrico, etc.

Errores de lectura. Errores


indeterminados en la lectura de la
transmitancia o absorbancia siempre
estn presentes y es necesarios tenerlos
en cuenta. En ocasiones pequeos
errores en la lectura pueden ocasionar
errores grandes en la concentracin.

Desviaciones qumicas

Influencia del
equilibrio. Cuando
la sustancia
problema interviene
o forma de parte de
un sistema en
equilibrio con otras
especies, el
desplazamiento del
equilibrio implica una
modificacin en la
concentracin y, por
consecuencia, en la
absorbancia.

Influencia del disolvente.


Influencia de la temperatura.
Presencia de impurezas en los
reactivos.
Interacciones entre especies
absorbentes.
Interacciones soluto-radiacin
electromagntica.

Efectos del ruido instrumental en


los anlisis espectrofotomtricos

La exactitud y precisin de los anlisis


espectrofotomtricos estn a menudo
limitadas por el error indeterminado, o
ruido propio del instrumento.

Caso I

La incertidumbre en el caso I se
encuentra a menudo en los
espectrofotmetros o fotmetros
ultravioleta y visible menos costosos que
estn equipados con medidores o
lectores digitales de resolucin limitada.

Caso II

Este tipo de incertidumbre


limita la precisin de los
instrumentos de mayor
calidad. Tiene su origen en
el ruido de disparo que
debe esperarse siempre
que el paso de electricidad
incluya la transferencia de
carga a travs de una
unin tal como el
movimiento de electrones
del ctodo al nodo de un
tubo fotomultiplicador.

Caso III

Una de las causas de este problema es la


lenta deriva en la seal de salida radiante
de la fuente y es conocido tambin como
ruido de parpadeo de la fuente. Dicho
efecto puede minimizarse mediante el
uso de fuentes de alimentacin de
potencial constante o mediante un
sistema de divisin del haz

INSTRUMENTACIN

Hay cientos de instrumentos hechos y modelos de donde


elegir. Algunos son sencillos y baratos, otros son equipos
complejos, controlados por computadora, que pueden
efectuar barridos.

Con frecuencia, los instrumentos ms sencillos son slo


tiles en la regin visible para mediciones cuantitativas a
una sola longitud de onda.

Los instrumentos ms complejos tienen la aptitud de


efectuar barridos espectrales a resoluciones que se
pueden elegir, son capaces de medir en las regiones
ultravioleta y visible, compensar las fluctuaciones en la
intensidad de la fuente y varias otras caractersticas

Componentes de los
instrumentos

Los instrumentos para medir la absorcin


de radiacin ultravioleta, visible y en el
infrarrojo cercano estn compuestos por
uno o ms de los siguientes componentes:
1) fuentes,
2) selectores de longitud de onda,
3) recipientes para la muestra,
4) transductores de radiacin y
5) procesadores de seal y dispositivos de
lectura.

Fuentes

Cuando se trata de mediciones de absorcin molecular


es necesario disponer de una fuente continua cuya
potencia radiante no cambie en forma brusca en un
intervalo considerable de longitudes de onda.

Lmparas de deuterio e hidrgeno. La excitacin


elctrica del deuterio o hidrgeno a baja presin
produce un espectro continuo en la regin ultravioleta.
El mecanismo por el cual se produce dicho espectro
requiere la formacin inicial de una especie molecular
excitada y luego su disociacin para dar dos especies
atmicas ms un fotn ultravioleta.

a) Lmpara de deuterio del tipo que se usa en los


espectrofotmetros y b) su espectro. La grfica es la
irradiancia El (proporcional a la energa radiante) contra
la longitud de onda. Observe que la intensidad mxima
se presenta a 225 nm. Por lo regular, los instrumentos
cambian de deuterio a tungsteno a 350 nm.

Lmparas de filamento de
tungsteno.

La fuente ms comn de radiacin visible y del infrarrojo


cercano es la lmpara de filamento de tungsteno.
La distribucin de energa de esta fuente se aproxima a
la del cuerpo negro , por lo que depende de la
temperatura.
En la mayor parte de los instrumentos de absorcin, la
temperatura de trabajo del filamento es 2870 K; as, la
mayor parte de la energa emitida corresponde a la
regin del infrarrojo.
La lmpara de filamento de tungsteno es til para la
regin de longitudes de onda comprendida entre 350 y
2500 nm.

a) Lmpara de deuterio del tipo que se usa en los


espectrofotmetros y b) su espectro. La grfica es la
irradiancia El (proporcional a la energa radiante) contra
la longitud de onda. Observe que la intensidad mxima
se presenta a 225 nm. Por lo regular, los instrumentos
cambian de deuterio a tungsteno a 350 nm.

Diodos emisores de luz.

Lmparas de arco de
xenn.

Tipos de instrumentos

Instrumentos para la regin


visible.

Instrumentos de haz nico para


la regin ultravioleta/ visible.

APLICACIONES A LA
ESPECTROMETRA POR
ABSORCION MOLECULAR
EN LAS REGIONES
ULTRAVIOLETA Y VISIBLE

Las medidas de absorcin en las regiones ultravioleta


y visible se utilizan ampliamente para identificar y
determinar una enorme cantidad de especies
inorgnicas y orgnicas.

los mtodos de absorcin molecular en las regiones


ultravioleta/visible son las ms utilizados de todas las
tcnicas de anlisis cuantitativo en los laboratorios
qumicos, ambientales, forenses y clnicos en todo el
mundo.

LA MAGNITUD DE LAS
ABSORTIVIDADES MOLARES

En la espectrometra por absorcin molecular en las


regiones ultravioleta y visible, se observan
absortividades molares (valores E -que van desde cero
hasta un mximo del orden de 105 L mol -1 cm-1 .

Para un mximo de absorcin particular, la magnitud


de E depende de la seccin transversal de captura de
las especies y de la probabilidad de que tenga lugar
una transicin que absorba energa

Se ha demostrado que la relacin entre E y estas variables es

E =8.7 X 10_19 PA

Donde:
P: es la probabilidad de la transicin
A: el rea blanco de la seccin transversal en centmetros cuadrados por molcula.
A partir de estudios de difraccin de electrones y de rayos X se ha determinado que el rea
para las molculas orgnicas representativas es de alrededor de 1015 cm2 /molcula, y que
las probabilidades de transicin varan de cero a uno.
Para las transiciones permitidas de acuerdo con la mecnica cuntica, los valores de P estn
comprendidos entre 0.l y 1, lo que ocasiona bandas de absorcin intensas (E mx 10_4 a
10_5 L mol_1 cm_1 ).
Los picos de absorcin con absortividades molares menores que 103 se clasifican como de
baja intensidad. Son el resultado de transiciones prohibidas cuya probabilidad de suceder es
menor que 0.01.

ANALISIS CUANTITATIVO MEDIANTE


MEDICIONES DE ABSORCIN

La espectroscopa de absorcin basada


en la radiacin ultravioleta y visible es
una de las herramientas ms tiles con
las que cuenta el cientfico para el
anlisis cuantitativo.
Las aplicaciones de los mtodos
cuantitativos de absorcin ultravioletavisible no slo son numerosas, sino que
abarcan todos los campos en los que se
requiere informacin qumica

Aplicaciones en especies absorbentes


La determinacin espectrofotomtrica de cualquier
compuesto orgnico que contiene uno o ms de estos
grupos es factible.
Tambin numerosas especies inorgnicas absorben
radiacin UV y visible, por lo que son susceptibles a la
determinacin directa.
Aplicaciones en especies no absorbentes
Numerosos reactivos reaccionan en forma selectiva con
especies no absorbentes y generan productos de gran
absorcin en las regiones ultravioleta y visible. Por lo
regular, la aplicacin satisfactoria de tales reactivos en
el anlisis cuantitativo requiere que la reaccin en que
se forma el color sea casi completa. Con frecuencia, la
absortividad molar del producto es varios rdenes de
magnitud superior a la de la especie antes de la
reaccin.

Seleccin de la longitud de
onda

Por lo regular, para


obtener la mayor
sensibilidad las medidas
de absorbancia
espectrofotomtricas se
hacen a una longitud de
onda correspondiente a
un pico de absorcin
porque el cambio en la
absorbancia por unidad
de concentracin es
mayor en este punto.

Variables que influyen en la


absorbancia

Entre las variables comunes que influyen


en el espectro de absorcin de una
sustancia estn la naturaleza del
solvente, el pH de la solucin, la
temperatura, las altas concentraciones
del electrolito y la presencia de
sustancias que interfieren.

Determinacin de la relacin entre

absorbancia y concentracin

El mtodo de los patrones


externos es el que se usa con
frecuencia para establecer la
relacin entre absorbancia y
concentracin. Despus de
decidir las condiciones para
el anlisis, se prepara la
curva de calibracin a partir
de una serie de soluciones
patrn que abarquen el
intervalo de concentracin
esperado en las muestras.

Mtodo de adicin
estndar

El mtodo de adicin estndar puede adoptar varias


formas. La que se selecciona con mayor frecuencia
para los anlisis fotomtricos y espectrofotomtricos,
requiere la adicin de uno o ms volmenes iguales
de solucin patrn a alcuotas de la muestra.
Si se quiere ahorrar tiempo o muestra, es posible
efectuar un anlisis de adicin estndar usando slo
dos incrementos de muestra.En este caso, una sola
adicin de Vs mL de patrn se aadira a una de las
dos muestras. Este procedimiento se basa en la
ecuacin

TITULACIONES FOTOMETRICAS Y
ESPECTROFOTOMETRICAS

Son tiles para localizar el punto de


equivalencia de una titulacin, siempre que el
analito, el reactivo o el producto de la
titulacin absorban radiacin. Otra posibilidad
es que un indicador absorbente proporcione el
cambio de absorbancia necesario para
localizar el punto de equivalencia.
Una curva de titulacin o valoracin
fotomtrica es una representacin grfica de la
absorbancia, corregida por los cambios de
volumen, en funcin del volumen del titulante.

Con el fin de obtener curvas de titulacin


con parte lineales que se puedan
extrapolar, los sistemas absorbentes
deben apegarse a la ley de Beer.
Adems, las absorbancias deben
corregirse por los cambios de volumen,
multiplicando la absorbancia observada
por (V + v)/V, donde V es el volumen
original de la solucin y v es el volumen
de titulante aadido.

Instrumentacin. Por lo regular, las


titulaciones fotomtricas se llevan a cabo
con un espectrofotmetro o un fotmetro
modificado de tal modo que el recipiente
de titulacin est estacionario en la
trayectoria de la luz. Como opcin se
puede utilizar una celda tipo sonda.
Para las titulaciones fotomtricas se usan
tanto fotmetros de filtro como
espectrofotmetros.

Aplicaciones. Con frecuencia, las titulaciones


fotomtricas proporcionan resultados ms exactos
que el anlisis fotomtrico directo porque para
determinar el punto final se usan los datos
procedentes de varias mediciones.
Los puntos finales que se obtienen a partir de las
curvas de titulacin fotomtrica en un segmento
lineal poseen la ventaja de que los datos
experimentales se toman bastante lejos de la regin
del punto de equivalencia, donde la absorbancia
cambia de manera gradual y por la misma razn, se
pueden titular soluciones ms diluidas mediante
deteccin fotomtrica.

METODOS ESPECTROFOTOMETRICOS
CINETICOS

La espectrofotometra es una herramienta valiosa para


descubrir la composicin de iones complejos en solucin y
para determinar sus constantes de formacin (valores Kf).
Las mediciones cuantitativas de absorcin son muy tiles
para estudiar la formacin de complejos porque se
pueden efectuar sin trastocar los equilibrios que estn en
estudio. Aunque muchos estudios espectrofotomtricos de
complejos requieren sistemas en los cuales un reactivo o
producto absorba radiacin, tambin se pueden estudiar
con resultados satisfactorios los sistemas no absorbentes.

Los mtodos de equilibrio funcionan en la


regin mas all del tiempo te, cuando
las concentraciones volumtricas de los
reactivos y el producto se han vuelto
constantes y el sistema qumico esta en
equilibrio.
En cambio, los mtodos cinticos se
ejecutan durante el periodo que va
desde 0 hasta te, cuando las
concentraciones de analito y el
producto estn cambiando de forma
continua.

Tipos de reacciones
En los mtodos cinticos se pueden emplear diversos tipos
de reacciones. Las reacciones catalizadas estan entre las
mas populares; en ellas se determina un catalizador de
acuerdo con la manera en que influye en la velocidad de
reaccin, o bien, se elige uno de los reactivos. Por
ejemplo, el yoduro es un catalizador en la reaccin de
Ce(IV) con As(III). Las cantidades traza de I se pueden
determinar al medir la velocidad de esta reaccin en
funcin de la concentracin de I. Por lo regular, se usa el
mtodo de patrones externos para preparar una curva de
calibracion de velocidad contra concentracin de yoduro.
Mas de 40 cationes inorgnicos y mas de 15 aniones se
han determinado con base en su efecto cataltico.

Tambin mediante mtodos cinticos se han determinado


catalizadores orgnicos. Las aplicaciones mas importantes de las
reacciones catalizadas en los anlisis orgnicos requieren el uso
de enzimas como catalizadores. El comportamiento de una gran
cantidad de enzimas es compatible con el mecanismo general.

En este denominado mecanismo de Michaelis-Menten, la


enzima E reacciona en forma reversible con el sustrato
S para formar el complejo enzima-sustrato ES. Entonces,
este complejo se descompone en forma irreversible
para formar los productos y la enzima regenerada.
Con frecuencia, la velocidad de esta reaccion cumple
con la ley de la velocidad

Instrumentos
Los mtodos cinticos basados en reacciones con vidas
medias mayores a 10 s pueden efectuarse en un
espectrofotmetro ordinario equipado con compartimiento
de celda y dispositivos para introducir y mezclar muestras
y reactivos. Las velocidades de reaccin dependen
en gran medida de la temperatura, por lo que es necesario
controlarla en alrededor de 0.1C para tener una
buena reproductibilidad. En muchos espectrofotmetros
comerciales hay aditamentos que permiten alcanzar
ciertas velocidades. En el caso de reacciones muy
lentas, la introduccin y la mezcla de la muestra se
pueden llevar a cabo antes de poner la mezcla de reaccin
en el compartimiento de la celda. Se cuenta con
una celda estacionaria en la que se colocan todos los
reactivos, excepto uno. El reactivo que se requiere para
iniciar la reaccin se introduce entonces mediante una jeringa
o pipeta y la reaccin resultante se supervisa mientras la
mezcla se agita. En el caso de los espectrmetros de un solo
canal, la reaccin se vigila a una sola longitud de onda
midiendo la absorbencia en funcin del tiempo. Los
instrumentos equipados con detectores en serie facilitan la
toma de espectros enteros a diferentes tiempos para
analizarlos despus.

Tipos de mtodos cinticos


Los mtodos cinticos se pueden clasificar de acuerdo
con la manera en que se efecten las mediciones.24
Con los mtodos diferenciales se calcula la velocidad de
reaccin y se le relaciona con la concentracin del
analito. Las velocidades se determinan a partir de la
pendiente de la curva de absorbancia contra tiempo. En
el caso de los mtodos integrales, se utiliza una forma
integrada de la ecuacin de la velocidad y se determina
la concentracin del analito a partir de los cambios de
absorbencia que se producen en varios tiempos. Los
mtodos de ajuste de curvas adecuan un modelo
matemtico
a la curva de absorbancia contra tiempo y calculan los
parmetros del modelo, sin olvidar la concentracin del
analito. Los mtodos mas complejos utilizan parmetros
del modelo para determinar el valor del equilibrio o la
respuesta de estado estable.

Estos mtodos son capaces de proporcionar


compensacin de los errores porque la posicin de
equilibrio es menos sensible a variables
experimentales como temperatura, pH y
concentraciones de los reactivos. En la figura 14.17 se
ilustra el uso de este procedimiento para predecir la
absorbencia de equilibrio a partir de datos obtenidos
durante el rgimen cintico de la curva absorbencia
contra tiempo. La absorbencia de equilibrio se
relaciona luego con la concentracin del analito en la
manera acostumbrada.

ESTUDIOS
ESPECTROFOTOMETRICOS
DE IONES COMPLEJOS

La espectrofotometra es una herramienta valiosa para


descubrir la composicin de iones complejos en solucin y
para determinar sus constantes de formacin (valores Kf).
Las mediciones cuantitativas de absorcin son muy tiles
para estudiar la formacin de complejos porque se
pueden efectuar sin trastocar los equilibrios que estn en
estudio. Aunque muchos estudios espectrofotomtricos de
complejos requieren sistemas en los cuales un reactivo o
producto absorba radiacin, tambin se pueden estudiar
con resultados satisfactorios los sistemas no absorbentes.

Mtodo de las variaciones


continuas
En este mtodo, las soluciones del catin y del ligando
con concentraciones analticas idnticas se mezclan de
tal manera que el volumen total y la cantidad total
de moles de los reactivos en cada mezcla son constantes,
pero la relacin molar de los reactivos varia en
forma sistemtica, por ejemplo, 1:9, 8:2, 7:3, etctera.
Entonces se mide la absorbencia de cada solucin en
una longitud de onda apropiada y se corrige por cualquier
absorbencia que la mezcla pudiera manifestar si
no ocurriera reaccin alguna. Por ejemplo, si el ligando
absorbe solo radiacin UV o visible, la absorbencia
corregida seria la absorbencia de la mezcla de reaccin
menos la absorbencia del ligando si no hubiera
reaccionado.

Mtodo de la relacin
molar
En este mtodo se prepara una serie de soluciones
en las cuales la concentracin analtica de un
reactivo, casi siempre el catin, se mantiene
constante mientras la del otro varia. Luego se
elabora una grafica de la absorbencia contra la
relacin molar de los reactantes. Si la constante de
formacin es razonablemente favorable, se
obtienen dos rectas de diferentes pendientes que
se cortan en una relacin molar que corresponde a
la relacin de combinacin en el complejo.

Mtodo de la relacin de
pendientes
Este mtodo es til en particular para complejos dbiles, pero
es aplicable solo a sistemas en los cuales se forma un complejo
sencillo. En el mtodo se supone que 1) la reaccin de
formacin de complejos puede ser forzada a terminar mediante
un exceso de cualquier reactivo y 2) en estas condiciones se
cumple la ley de Beer.

Bibliografa
Hernndez L. Gonzlez C.. (2002).
Introduccin al anlisis instrumental.
Barcelona: Ariel.
Rubinson K & Rubinson J. (2001). Anlisis
instrumental. Madrid: Pearson educacin.
Skoog D., Holler F. & Nieman T.. (2001).
Principios de anlisis instrumental. Espaa:
McGraw Hill.

También podría gustarte