La fitoqumica en las

interacciones biticas
Biol. Yolanda M. Garca Rodrguez

Laboratorio de Ecologa
Qumica,
CIEco UNAM

Interacciones biticas y
abiticas
En los cultivos, la incidencia de plagas y
patgenos se ha explicado principalmente en
trminos de variacin ambiental, variacin
gentica y recientemente variacin qumica
natural de las plantas.

Fitoqumica
Los perfiles qumicos pueden mantenerse en
una poblacin a pesar de la variacin
ambiental, debido a que algunos compuestos
secundarios tienen control gentico.
HO

OH
OH

N
N

N
O

OH

Fitoqumica
La investigacin de perfiles qumicos en las
poblaciones naturales contribuye a explicar su
resistencia natural a la herbivora y en poblaciones
cultivadas genera informacin para el manejo
agronmico de plagas.
La fitoqumica se estudia con diferentes tipos de
cromatografa.

Cromatografa
Mtodo fsico para separar, cuantificar,
aislar e identificar los componentes de una
mezcla.

Cromatografa

Adsorcin:
El soluto se adsorbe en la
superficie de la fase estacionaria slida.
Absorcin, particin o reparto: El soluto se
reparte entre la fase estacionaria lquida y la
fase mvil por diferencia de solubilidad.

Cromatografa en columna
Las compuestos de la mezcla se separan
debido a su afinidad con
la fase
estacionaria y con la fase mvil.

Cromatografa en TLC

F1

F2

F3

F4

F5

F6

F7

F8

F9

F10

Revelado de luz UV (=254nm) de las fracciones obtenidas por

cromatografa en columna, del extracto hexnico de T. lucida.

Cromatografa en columna
Intercambio Inico
Los aniones o cationes se separan en
base a una columna rellena con un
intercambiador de iones (resina con
carga)

Exclusin Molecular, filtracin

o permeacin en gel
No existen interacciones entre la fase
estacionaria y el soluto, se separa por
tamao de partcula.

Cromatografa HPLC
Similar a la cromatografa en
columna, con columna 5-25 cm y
partcula entre 3- 10m.

Cromatografa HPLC
Gran presin en el flujo de la
fase mvil (6000 psi). HPLC
High Pressure Liquid,
High
Performance Liquid.
Fase reversa la mas usada
Separacin de compuestos
NO voltiles y termolbiles:
aminocidos, protenas,
cidos nucleicos,
hidrocarburos,
carbohidratoses la mas
usada.

Cromatografa de gases
GC

Los compuestos se distribuyen en una fase

mvil gaseosa, interaccionan con la fase
estacionaria por cambios de temperatura.

Cromatografa de gases
Los compuestos son separados en base a su
volatibilidad: los compuestos deben ser voltiles y
trmicamente estables (10-20 %)
Sin embargo
derivatizar

los

compuestos

se

pueden

colector
aire

jet

H2

columna

Cromatografa de gases
Anlisis rpido, requiere poca muestra (0.5ml)
Monitoreo ambiental, investigacin de nuevos
compuestos con actividad biolgica, cuantificacin de
sustancias prohibidas y metabolitos en sangre.

Volatilidad

Tipos de cromatografa

Cromatografa
de gases
(GC)

Cromatografa
Lquida (HPLC)

Polaridad

Grupos de compuestos

Anlisis de datos

Anlisis de datos

Anlisis de datos
rea, Estndar interno
PK
RT
Caryophyllene
1
3.68

Area
47085

3.85

84407

3.96

32655

4
5

4.19
4.23

34829
44564

4.45

31479

mg
Library/ID
0.021597
4
3-Penten-2-ol
Bicyclo[3.1.1]heptane, 6,60.038716 dimethyl-2-methylene-,
6
(1S)0.014978
5
Benzene, 1-ethyl-3-methyl0.015975 Benzene, 1-methyl-4-(17
methylethyl)0.020441 Limonene
0.014439 1-Pentanol, 51
cyclopropylidene0.207980 Benzene, 1-methoxy-4-(2-

Anlisis de datos
Estndar externo
40000000
35000000
30000000

f(x) = 8445541.51x + 372769.13

R = 1

25000000

rea

20000000
15000000

forbol-12-miristato
13-acetato por
HPLC

10000000
5000000
0
0

0.5

1.5

2.5

3
3.5
4 (mg/ml)
4.5
Concentracin

CULTIVOS

Persea americana var. Hass

Persea americana var. drymifolia
Solanum lycopersicon

Variacin fitoqumica en
aguacate (Persea
americana) y su relacin
con herbvoros.

Lippia graveolens
Jatropha curcas
Mikania micrantha

Variacin fitoqumica de la
defensa indirecta inducida
por herbvoros.

Tagetes lucida
Cosmos bipinnatus

Causas y efectos de la
variacin fitoqumica.

Eupatorium glabratum
Tithonia tubiformis
Oenothera rosea
MALEZAS

Prospeccin de
compuestos tiles para el
ser humano.

Voltiles foliares de P. americana

var Hass
36 compuestos con nueve
grupos funcionales
cidos grasos
5
triterpenos
2
fenilpropanoides
6
furanos
7
esteres
8
triterpenos
3
sesquiterpenos
9
alcanos
1
monoterpenos
4

25.2%
20.8%
14.4%
11.6%
5.6%
5.3%
3.5%
2.8%
2.0%

Persea americana var Hass

Se
puede
caracterizar
quimiotipos
foliares:
comunes,perfiles qumicos que abundan en la zona;
y raros a los que se desvan del promedio.
Correlacin de quimiotipos raros con incidencia de
barrenador de las ramas y quimiotipos comunes
con incidencia de mosquita blanca y araa roja

(Espinosa-Garca, 2001)

Voltiles foliares de P. americana

var Hass
Los componentes mayoritarios de
quimiotipos comunes y raros son:
estragol, -cariofileno y eugenol,
en los quimiotipos comunes
constituyen el 26% y en los raros
ms del 70 % de su composicin.
Los compuestos que separan los
grupos de quimiotipos son pcimeno,
camfeno,
xido
de
cariofileno, limoneno, -mirceno,
-terpineol,
-cis-ocimeno,
farneseno compuestos que han
sido reportados con actividad
contra herbvoros generalistas.

Persea americana
La susceptibilidad de P. americana var. drymifolia a la
incidencia del agallero Trioza ancepsesta relacionada
con grupos de compuestos secundarios foliares,
segn
trabajos
realizados
en
bancos
de
germoplasma.

(Torres-Gurrola et al.,

Solanum lycopersicum
Comparar la respuesta inducida por
herbivora en plantas
Cmo ha alterado la domesticacin a la
emisin constitutiva e inducida de voltiles?

Bautista-Lozada A. 2014.
Tesis de Doctorado. UMSNH.

Solanum lycopersicum
n= 40 plantas por variedad

Cmara
de vidrio

Headspa
ce
esttico
Fibra
SPME

Cromatgrafo de
Gases-Masas

Perfil constitutivo Solanum

lycopersicum
Concentracin Media Estandarizada

1.2

Compuestos
voltiles:

(y-)/

1) hexanal

1.0

2) 3-hexanol

0.8

3) -pineno

0.6
0.4

478.2618.76
pg/hr

1,241.7671.25
pg/hr

4) -mirceno
5) o-cimeno
6) (+)-4-careno

840.2545.84
pg/hr

7) -felandreno

0.2

8) -terpineno

0.0

9) p-cimeno
-0.2
-0.4

1,203.1463.07
pg/hr

825.7730.27
pg/hr

2,560.29118.54
pg/hr

10) -felandreno
11) limoneno
12) nonanal

-0.6
FAUAS 2 FAUAS 4 FAUAS 6 Ro Grande Ro Fuego Castlemart

CULTIVADAS

SILVESTRES

13) decanal

Zea mays

Jatropha curcas
Incorporar la variacin fitoqumica y gentica de
Jatropha curcas a programas de manejo integrado
de plagas y enfermedades.
Se prob la toxicidad de los steres de forbol
contra Phytium ultimun y Phytophthora capsici,
hongos patgenas en plantaciones de Jatropha
curcas
y
Phoma
herbarum,
Fusarium
moniliformedos hongos generalistas, que atacan
diferentes cultivos.
Mayo-Hermenegildo
2014.
Tesis
Licenciatura. UMSNH.

H.
de

Absorbancia (mAU)

Jatropha curcas
Arranque
10 min
40 min
55 min
70 min
Detector
Columna

60%
50%
25%
0%

40%
50%
75%
100%

100%
Longitud de onda variable
Eclipse XDDC18 (4.6mm x
156mm x 5mm Agilent
Technologies)

forbol-12-miristato 13acetato
Tiempo de Retencin (min)

Cuantificacin de EF con estndar externo por

HPLC

Absorbancia (mAU)

Jatropha curcas
Arranque
10 min
40 min
55 min
70 min
Detector
Columna

Tiempo de Retencin (min)

Cuantificacin de EF en la
muestra de J. curcas por
HPLC

60%
50%
25%
0%

40%
50%
75%
100%

100%
Longitud de onda variable
Eclipse XDDC18 (4.6mm x
156mm x 5mm Agilent
Technologies)

Jatropha curcas

Los steres de forbol tienen actividad fungiestatica in

vitro en hongos generalistas y dos especies de hongos
fitopatgenas de J. curcas.
La inhibicin del crecimiento micelial
aumentar la concentracin.

es mayor al

El efecto fungisttico de los steres de forbol se observa a

partir de 0.250 mg/mL, mayor a la reportada en otros

Tagetes lucida
Propiedad antifngica de compuestos voltiles de
tres plantas medicinales (Nurite, Santa Mara y
Toronjil) sobre hongos patgenos de fresa.
Fulgencio-Negrete, R. Tesis de Maestra. UMSNH.

Efecto antifngico de Tagetes

lucida

Botrytis
cinerea

F1

F2

F6

F1

F2

F6

F7

F3

F7

F3

F4

Tecto 60

Tecto 60

F5

Etanol

F4

F5

Etanol

Colletotrichum
acutatum

Cuantificacin de compuestos
activos de Tagetes lucida
Concentracin (% de rea)

Compuesto

Tiempo de
retencin
(min)

Ext.
Hex.

F1

F2

Mirceno

8.22

2.1

5.9

2.2

o-cimeno

9.76

1.3

2.9

-Linalol

11.19

2.3

Estragol

14.13

Acetato de
geraniol
Metil eugenol

F4

F5

F6

F7

IK

0.8

0.8

NP

0.6

NP

992

1.4

0.5

0.5

NP

NP

NP

1048

NP

2.0

2.8

2.8

1.6

2.0

NP

1101

29.4

69.6

32.0

27.5

27.5

4.1

10.4

NP

1206

18.95

0.9

1.0

0.9

1.0

1.0

NP

NP

NP

1383

19.67

64.0

10.2

60.3

67.5

67.5

94.4

86.9

NP

1414

NP=no presente; IK= ndice Kovats.

F3

Composicin de la
Fraccin 5 de
Tagetes lucida

Tagetes lucida
Los copuestos mayoritarios del extracto hexnico
de T. lucida son metil-eugenol y el estragol.
La fraccin F5 contiene 94.4% de metil-eugenol, por
lo que se le atribuye ser el responsable de la
actividad fungicida.

Ecologa
Qumica
CIEco, UNAM

Gracias !!