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VOLUMEN CELULAR Y PRESION

OSMOTICA

Membranas biolgicas
Transporte de agua a travs de membrana
Soluciones hipotnicas, hipertnicas, isotnicas
Ecuacin de Vant Hoff

Membranas celulares
CARACTERISTICAS
Las membranas celulares son barreras selectivas que separan
las clulas y forman compartimentos intracelulares.
Entre sus funciones estn:
Permitir la entrada o salida de molculas de la clula
Generar seales para modificar el metabolismo.
Adherir clulas para formar tejidos.

Composicin
Doble capa de fosofolpidos, protenas y carbohidratos:
Fosfolpidos: Barrera hidrofbica entre los compartimentos
acuosos de la clula.
Protenas: Permiten paso de molculas hidroflicas a travs
de la membrana y determinan funciones especficas de la
membrana, incluyen bombas, canales, receptores, molculas
de adhesin, transductores de energa y enzimas.
Carbohidratos: Comunicacin intercelular y adhesin.
Colesterol: Determina la fluidez de la membrana

Y el transporte de qu depende?
El acceso de las sustancias depende de:
La permeabilidad selectiva: para mantener la homeostasis de la
clula.
El tamao de las molculas.
La carga elctrica: no polares o hidrofbicas (pasan por la capa
de lpidos), las polares o hidroflicas (pasan por los canales).
Gradiente de concentracin
La solubilidad.

Difusin
Es el movimiento de molculas de una regin de alta
concentracin a otra de menor concentracin producido
por la energa cintica de las molculas.
No requiere gasto de energa (movimiento pasivo).
Movimiento activo requiere gasto de ATP.

Osmosis
El componente principal de la clula es el agua, que acta
como solvente de solutos orgnicos e inorgnicos.
El movimiento de agua a travs de una membrana
selectivamente permeable se llama osmosis (difusin de
agua) y sucede siempre del rea de mayor concentracin de
agua (con menor concentracin de soluto) al rea de menor
concentracin de agua (con mayor concentracin de soluto).

Osmolaridad vs. tonicidad

Como las membranas biolgicas no son membranas semipermeables sino que poseen
una permeabilidad selectiva para los distintos solutos, el comportamiento osmtico de
una clula es complejo y se define el trmino tonicidad para describir el
comportamiento de una solucin en contacto con clulas (generalmente se considera la
membrana plasmtica del glbulo rojo)

La osmolaridad mide el gradiente efectivo para el agua asumiendo que el soluto


osmtico no atraviesa la membrana. Es simplemente una cuenta del numero de
partculas disueltas.

La tonicidad es un trmino funcional que describe la tendencia de una solucin para


provocar la expansin o contraccin del volumen intracelular.

Dos soluciones son isoosmticas cuando tienen el mismo nmero de partculas


disueltas, independientemente del agua que pueda pasar a travs de una membrana
que las separe.

Dos soluciones son isotnicas cuando no producen movimiento de agua a travs de la


membrana, independientemente del nmero de partculas que tengan disueltas.

Y las soluciones...
Cuando la clula contiene una concentracin de solutos mayor
que su ambiente externo, se dice que la clula est en una
solucin hipotnica, y como consecuencia, el agua entra a la
clula causando que se expanda.
Si la concentracin de solutos es mayor fuera de la clula, se
dice que la clula est en una solucin hipertnica; la clula
pierde agua y se encoge.

Si las concentraciones de soluto son iguales en ambos lados


de la membrana, se dice que la clula est en una solucin
isotnica, donde el movimiento neto es cero

Presin osmtica
Se entiende por presin osmtica la presin que sera
necesaria para detener el flujo de agua a travs de la
membrana semipermeable.
Cuando una clula se sumerge en un lquido con
diferente concentracin a la de su interior, la presin
osmtica puede ocasionar plasmlisis o turgencia.

y Vant Hoff dijo...


= RTC
C = concentracin molar de solutos
R = constante de los gases
T = temperatura
Es aplicable a soluciones ideales diluidas
Hay que expresar la concentracin en unidades que guarden
relacin directa con el numero total de partculas disueltas ....
Solutos que no se disocian = molaridad
Solutos que se disocian = osmolaridad (molaridad multiplicada
por el numero de iones que cada molcula de soluto
proporciona a la disolucion; osmoles por litro)

Presin osmtica y volumen celular


Si una celula se suspende en un medio de presion osmotica variable, se originar
transferencia de agua que parara cuando la presiones enternas e internas se
igualen
si Vant Hoff se cumple ==> OSMe = OSM i
OSMe = n1

Vt-Vs
n1 = osmoles intracelulares
Vt = volumen celular total
Vs = volumen de slidos contenidos en el medio intracelular

Vt = Vs + n1
OSMe

La relacin entre el volumen celular y la inversa de la osmolaridad del medio


puede representarse por un recta de pendiente positiva e igual a n1, y ordenada
igual a Vs.

Experimentalmente...
Cambio de volumen celular: se mide el volumen relativo (se divide el volumen total por el volumen
a 300 mOsm):
Vrel = Vtotal / Vtotal 300 mOsm = (ns interior / OSMext . Vtotal 300 mOsm ) + ( Vs/ Vtotal 300 mOsm)
Haciendo despejes y cuestiones matemticos y definiendo la tonicidad como T = OSM int / OSMext
y el volumen de agua relativo de agua difusible como W, la ecuacin se puede simplificar como:
Vrel = (1-W) + 1/T . W

Entonces en el TP...
1) Conseguimos sangre de algn voluntario
2) Tomar 5ml de sangre y separamos el plasma por centrifugacin
3) Se lavan los glbulos rojos con una solucin NaCl 200 mOsm
tres veces (porque? )
4) Suspender los glbulos rojos en el mismo volumen de pellet
5) Medir 0.5 ml de esa suspensin en 5 tubos

6) Agregar 0.25 ml de soluciones de NaCl de osmolaridad creciente


7) Medicin de hematocrito: se mide con una regla luego de
centrifugar por 3 minutos
8) Calculo de volumen relativo (Htc/Htc a 300mOsm)
9) Representar volumen relativo vs. 1/T (tonicidad = mOsm/300)
10) Calcular el volumen relativo para miliosmolaridad infinita
11) Calcular la pendiente de la representacion realizada.
12) Validar los resultados obtenidos comparando con el volumen
celular terico de la hemoglobina.

Adicional
Tubo 1: agua alta concentracin de sal + sangre (solucin hipertnica).
Tubo 2: agua baja concentracin de sal + sangre (solucin hipotnica).
Tubo 3: solucin isotnica.
Procedimiento:
Rotular y preparar 4 portaobjetos:
Portaobjeto 1: gota de sangre, coloque el cubreobjeto y observe los
eritrocitos bajo el microscopio.
Portaobjeto 2: gota de la mezcla del tubo 1, coloque el cubreobjeto.
Observe bajo el microscopio y compare con laminilla 1.
Portaobjeto 3 y 4 : Repetir el procedimiento anterior con la mezcla del
tubo 2 y el tubo 3 respectivamente.
Eritrocitos en ambiente hipertnico: hemlisis
Eritrocitos en ambiente hipotnico: crenacin

La tonicidad de un fludo describe los solutos


osmticamente activos en una solucin. osmolaridad eficaz
(tonicidad) tonicidad (es decir su concentracin de
electrlitos)
volumen relativo ajusta el volumen de
una fuente en comparacin con otras
fuentes
Volumen relativo de hemates con
respecto al total de la sangre