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Recorrido

de la luz
Aumento

Imagen
visualizada
ojo

Lente ocular
Imagen intermedia
(invertida respecto
a la muestra)

Lente objetivo
Muestra
Ninguno

Condensador
Fuente de luz

Microscopio ptico

Tincin de clulas para


la observacin microscpica

Extensin de una fina capa


de clulas sobre el porta

Adicin del colorante


lavado y secado
Secado al aire

Fijacin por flameado del porta

Se coloca una gota de aceite


de inmersin sobre el porta y
se observa con el objetivo de
100X

Tincin de Gram
Tincin del frotis
Paso 1

Paso 2

Previamente fijado al calor,


con cristal violeta
Durante 1 minuto.
Todas las clulas se tien
de color azul-violeta.

Aadir Lugol,
dejar actuar 2 minutos
Todas las clulas siguen
de color azul-violeta.

Gram +

Decolorar con alcohol


Paso 3

Las clulas Gram +


siguen de color azul-violeta.
Las Gram negativas
se decoloran.

Tincin de contraste
Con safranina 2 minutos.
Las clulas G+
se ven azul-violeta.

Paso 4

Las G- rosas o rojas.

Gram -

BACTERIAS: Caractersticas

Procariotas.
Unicelulares.
Carecen de organelos rodeados por
membranas.
Pared celular de peptidoglucano.
DNA en forma de anillos plsmidos.
No tienen cromosomas.

BACTERIAS: Caractersticas

Reproducen por fisin binaria


(duplicacin: dar origen a dos clulas o ms).

Presentan estructuras especializadas


Pili (Intercambio de material gentico)
Flagelos (Movimiento)
Cpsulas (Proteccin del medio ambiente)

BACTERIAS: Caractersticas

Auttrofas (prod. su propio


alimento)

Heterotrofas

Fotosintticas o quimiosintticas
Absorben nutrientes del ambiente

Hbitat

Suelo, aire, cuerpos de agua


Condiciones normales o extremas

MORFOLOGA
A. Forma de caa
(Bacilos).
B. Redondos, en
lneas
(Estreptococos*).
C. Redondos, en
cmulos
(Estafilococos*).
D. Redondos, en
pares
(Diplococos*).
E. En forma de
espirales
(Espirilos).

*Todos son la forma de


cocos

ALGUNAS ESPECIES

IDENTIFICACIN DE BACTERIAS
Tincin Gram: Las bacterias reaccionan por las
pruebas de:
Gram +
Gram
Gram Variable
La respuesta de las clulas a la tincin se
debe a diferencias en la complejidad y qumica
de su pared celular, la cual contiene un
polmetro llamado Peptidoglicano.
La pared celular de las bacterias Gram ,

EJERCICIO 2: Laminillas

Observe en un microscopio compuesto laminilla


preparadas, utilize aceite de inmersin al 100

Describa las formas que observa: las tres bsic


COCOS
BACILOS
ESPIRILOS
Observa alguna otra forma? Cual?

EJERCICIO 3: Identificando
bacterias por Tincin Gram

Obtener y observar clulas


bacterianas presentes en la boca
Procedimiento:

Preparar laminilla con UNA gota de


agua.
Frotar el interior de la boca con un
palillo de madera.
Esparcir por la laminilla.
Sujetar la laminilla y secar en mechero.

EJERCICIO 3: Identificando
bacterias por Tincin Gram

Teir con 3-4 gotas de cristal violeta.


Esperar 1 minuto.
Lavar con agua.
Secar suavemente.
Observar bajo el microscopio
(utilizar aceite de inmersin al 100%).
Dibujar.

FORMA DE LAS BACTERIAS

cocos

bacilos

espirilos

Streptococcus

Cocos gram positivos

Bacilos Gram negativos

La membrana celular
Funciones:
Transporte selectivo de sustratos.
Participa en la generacin de energa y
en la divisin celular.

Estructura:
Bicapa fosfolipdica con protenas
embebidas; puede contener tambin
hopanoides de estructura similar al
colesterol.
.

Esquema de la estructura de la
pared bacteriana

ESQUEMA DE LA PARED
GRAM POSITIVA

Gra
m

Eubacterias
Gra

Peptidoglicano o
murena

Pptidoglicano
de Gram +

Pptidoglicano de Gram
-

Muropptido de Gram

Peptidoglicano o murena
Funciones: formando un saco rgido y
cerrado, confiere forma a la bacteria y
previene la lisis osmtica.
Estructura: Polmero de muropptidos.
Muropptido: Es el monmero, compuesto por N-acetil
glucosamina (NAG) y cido N-acetil murmico (NAM) en unin
(1,4), ms un tetrapptido unido a NAG.
Cadenas de glicanos: los monmeros se unen formando cadenas
lineales NAG-NAM-NAG-NAM-NAG-NAM------ Entrecruzamientos: los tetrapptidos quedan perpendiculares a las
cadenas lineales y se unen a los tetrapptidos de las cadenas
vecinas por enlaces peptdicos, creando la malla de pptidoglicano.

Paredes celulares Gram positivas y


Gram negativas
Las bacterias se agrupan en base a su tincin
por la tcnica de Gram.
Gram positivos - Pared celular con grueso
peptidoglicano que retiene un colorante
especfico. No tienen membrana externa.
Gram negativos - pared celular compleja, con
membrana externa y un espacio entre
membrana interna y externa -el periplasma- que
contiene el saco de murena y abundantes
enzimas. El peptidoglicano es fino, por lo que
no retienen el colorante.