ENZYMES

ALLOSTERIQUES

Dfinition de lallostrie
Lallostrie
dsigne
une
variation
de
conformation de protines sous leffet de la
fixation dun substrat ou dune molcule effectrice
en dehors du site catalytique, do lacquisition de
proprits particulires (changement dactivit)
On dcrit cela comme des effets coopratifs.
Ceux-ci sont concevables si et seulement si la
macromolcule est sous forme oligomrique.

Dfinition des enzymes allostriques

Certaines enzymes dites allostriques (de allos, autre

et stereos, site ou espace) possdent, en plus de leur
site actif, un ou plusieurs sites allostriques.
Une

substance

appele effecteur (ou modulateur)

peut se fixer sur ce site.

L'effecteur peut activer une enzyme (activateur) ou
l'inhiber (inhibiteur).

Les effecteurs allostriques

Les effecteurs allostriques sont des ligands dont le

site de fixation est diffrent du site de fixation du

substrat (site actif).
Cet effecteur peut tre le substrat lui mme, : on parle

alors d'effet allostrique homotrope.

Si au contraire l'effecteur est une molcule diffrente

du substrat, on parle alors d'effet allostrique

htrotrope (activateur ou inhibiteur).

Les effecteurs allostriques

Lorsqu'une protine allostrique comporte

plusieurs sous-units, la fixation du substrat ou de
l'effecteur sur une sous-unit se traduit par un
effet sur les autres sous-units de la protine.
La modification de l'activit se traduit par son :
Augmentation, on parle alors
allostrique (effecteur positif);

d'activation

Ralentissement, ou
(effecteur ngatif).

allostrique

inhibition

Structure des enzymes allostriques

Structure quaternaire oligomrique : l'enzyme

allostrique est un ensemble de sous-units
fonctionnelles associes appeles protomres.
Celles ci cooprent en vue d'une mme
fonction.

Structure des enzymes allostriques

Les protomres sont caractrises par la

prsence au sein de leur structure d'un seul site
strospcifique - site actif et site allostrique pour chaque catgorie de ligand : substrat,
inhibiteur et activateur.
Donc le protomre peut tre lui-mme, constitu
dune seule ou de plusieurs sous-units.
Les protomres sont assembles de faon ce
que l'enzyme allostrique comporte au moins, un
centre de symtrie.

Ltat relch et ltat

tendu

Lorsque lnergie interne dun protomre

augmente, par suite de la modification de ces
liaisons, on dit quil passe un tat tendu.
Au contraire lorsque les dites liaisons lui
imposent une structure correspondant une
nergie interne diminue, on dit quil passe un
tat relch.
Ces changements dnergie interne se traduisent
par des modifications de laffinit de lenzyme
vis vis du substrat ou encore de la vitesse initiale
de la raction.

La transition allostrique R

Transition d'agrgation-dsagrgation
Les premires ides faites sur l'activit des
enzymes allostriques (1960) considraient que
l'tat fonctionnel d'une enzyme allostrique tait
un tat d'agrgation.
L'tat de dsagrgation correspondait l'tat
inactif (transition d'agrgation-dsagrgation).
Cette
hypothse
est
inexacte in
vivo.

La transition allostrique R

Changeux a prouv en 1965, que la transition

allostrique modifie les forces de liaisons qui associent
les sous-units entre elles sans aller l'tat de
dissociation.
La molcule entire se trouve soit dans un tat contraint
(T) inactif, soit dans un tat relch (R) actif.
Cette transformation de la molcule est rversible.
Lquilibre entre les deux formes, peut tre dplac dans
un sens ou dans lautre par la fixation du substrat ou des
effecteurs allostriques.

La transition allostrique R

Cintique des enzymes allostriques

Les enzymes allostriques sont des enzymes de

rgulation des chanes mtaboliques.

Elles sont caractrises par des comportements

cintiques

diffrents

de

ceux

des

enzymes

michaelliennes.
Contrairement

ces

dernires

(cintique

hyperbolique), les enzymes allostriques prsentent

une cintique SIGMOIDE.

Cintique des enzymes allostriques

Cintique des enzymes allostriques

Cintique des enzymes allostriques

Le graphe reprsentant la vitesse initiale dune
enzyme allostrique nest pas une hyperbole comme
celui des enzymes michaliennes.
Les constantes de vitesse et daffinit de telles
enzymes varient en fonction des ligands, de telle sorte
que la courbe prend une forme sigmode,
caractristique de la coopration qui se fait entre les
protomres.
Cette cintique allostrique est plus lente que la
cintique michaelienne pour les petites concentrations
du substrat et devient plus rapide au-del.

Cintique des enzymes allostriques

Aux environs du point dinflexion de cette sigmode
la pente de la courbe est plus accuse, ce qui signifie
que pour une mme diffrence entre deux
concentrations du substrat, lacclration de la
raction sera plus grande dans le cas de lenzyme
allostrique.
Cette proprit de cooprativit des protomres
donne un avantage aux systmes allostriques par
rapport aux enzymes cintique michaelienne pour
la rgulation de la vitesse des ractions
enzymatiques.

Effet de cooprativit

La cooprativit traduit le fait que la fixation sur

l'enzyme d'un effecteur allostrique (activateur
ou inhibiteur), influence la fixation des
molcules suivantes.
Dans une cooprativit positive, leffecteur
entrane l'augmentation de l'affinit pour les
mmes molcules et vice versa pour
une cooprativit ngative.

Effet de dsensibilisation

Le traitement d'une enzyme allostrique par des agents

physiques (exp.chauffage) ou chimiques (ure, drivs
mercuriques), s'accompagne d'une perte de la sensibilit
de l'enzyme aux effecteurs allostriques (dsensibilisation).
Cette perte de la sensibilit peut tre due labolition des
interactions existant entre le site allostrique et le site
actif, empchant ainsi la transition allostrique.
Cependant, l'activit enzymatique persiste.
Il en rsulte une perte du phnomne de cooprativit et la
cintique passe de la forme sigmode la forme
hyperbolique.

Modulations allostriques de types K et V

Trois types d'enzymes allostriques peuvent tre distingus selon

les effets exercs sur elles par les effecteurs homotropes et
htrotropes qui les concernent.
- Les enzymes du systme K o l'effecteur ne modifie que
l'affinit apparente (Km) de l'enzyme pour le substrat.
- Les enzymes du systme V o l'effecteur ne modifie que la
vitesse maximale (Vmax) de la raction.
- Les enzymes du systme mixte o l'effecteur modifie les deux
paramtres Km et Vmax.

Enzymes allostriques du systme K

Sur le plan cintique, ce sont des enzymes o

l'effecteur ne peut modifier que l'affinit apparente
(relative Km) de l'enzyme pour le substrat mais la
Vmax reste la mme.
L'affinit pour le substrat (S) diminue en prsence
d'un inhibiteur allostrique (I) : Km/ > Km.
Elle augmente en prsence d'un
allostrique (A) : Km/ < Km.

activateur

Hexokinase
Lhexokinase est une enzyme de la membrane plasmique de toutes nos
cellules.
Elle catalyse une raction de transfert de phosphate et dnergie du
coenzyme ATP vers le glucose quelle active en glucose-6-phosphate.
Un proton est libr.
La raction couple est exergonique et irrversible.
Le glucose-6-phosphate, produit de la raction catalyse, est en outre un
rgulateur allostrique de lhexokinase. Il se fixe sur un site de liaison
diffrent du site actif et cette fixation diminue laffinit du site actif
pour le glucose. Il en rsulte un ralentissement de la vitesse de raction.

Enzymes allostriques du systme V

Ce sont des enzymes o l'effecteur ne peut
modifier que la vitesse maximale (Vmax) de la
raction sans modifier laffinit.
La Vmax diminue en prsence
inhibiteur allostrique (I) : Vmax/ < Vmax.

d'un

La Vmax augmente en prsence d'un

activateur allostrique (A) : Vmax// > Vmax.

Enzymes allostriques du systme mixte

Ce sont des enzymes o l'effecteur

peut modifier les deux paramtres.

Rtroinhibition

Dans les chanes mtaboliques, le produit final obtenu

en bout de chane peut tre un effecteur inhibiteur
d'une enzyme allostrique du dbut de la chane.
Plus la quantit du produit final augmente, plus la
raction qui le produit ralentit = rtroinhibition.
En plus de remplir sa fonction propre dans la cellule,
le produit F est un inhibiteur allostrique de l'enzyme
1.
Si la concentration de F devient trop leve dans la
cellule, la voie mtabolique qui le produit est alors
bloque.