Enzimas

Catalisam as reaes sucessivas pelas quais

as molculas nutrientes so degradadas, a
energia qumica conservada e transformada,
e as macromolculas so sintetizadas a partir
de molculas precursoras simples.

Pensem como deveria ser uma enzima

em (b) (grupos e estereoqumica)
Pensem como deveria ser uma enzima em
(b) (grupos e estereoqumica)

Filme

Enzimas
As Enzimas so protenas de funo especficas para
catalise, possuindo ou no cofatores
Cofatores so pequenas molculas orgnicas (no
proticas), denominadas coenzimas (geralmente derivadas
de vitaminas. Ex: NAD e FAD, Ca), ou inorgnicas (Zn,
Fe, Mg) necessrias para a funo de uma enzima.
Estes cofatores podem no estar ligados permanentemente
enzima, mas, na ausncia deles, a enzima inativa
A frao protica de uma enzima, na ausncia do seu
cofator, chamada de APOENZIMA
Enzima + Cofator, chamamos de HOLOENZIMA

Enzimas - Propriedades
Como catalisadores celulares extremamente poderosos, as enzimas
aceleram a velocidade de uma reao sem, no entanto, participar dela
como reagente ou produto.
Aceleram em mdia 103 a 1012x a velocidade da reao, transformando
de 100 a 1000 molculas de substrato em produto por segundo de
reao (turnover)
Atuam em concentraes muito baixas
Atuam em condies especficas de temperatura e pH
Possuem todas as caractersticas das protenas
Podem ter sua atividade regulada
Esto quase sempre dentro da clula, e compartimentalizadas
(lisossomos,
mitocndrias,
citoplasma,
ncleo,
retculo
endoplasmtico).
Altamente especficas

Nomeclatura
Existem 3 mtodos para nomenclatura enzimtica:

Nome Recomendado: Mais curto e utilizado no dia a

dia de quem trabalha com enzimas; Utiliza o sufixo
"ase" para caracterizar a enzima. Exs: Urease,
Hexoquinase, Peptidase, etc.
Nome Sistemtico: Mais complexo, nos d
informaes precisas sobre a funo metablica da
enzima. Ex: ATP-Glicose-Fosfo-Transferase
Nome Usual: Consagrados pelo uso; Exs: Tripsina,
Pepsina, Ptialina.

Classificao
Oxidorredutases: So enzimas que catalisam
reaes de transferncia de eltrons, ou seja:
reaes de oxi-reduo. So as Desidrogenases
(redutases) e as Oxidases
Transferases: Enzimas que catalisam reaes de
transferncia de grupamentos funcionais como
grupos amina, fosfato, acil, carboxil, etc. Como
exemplo temos as Quinases (grupos fosfato) e as
Transaminases
Hidrolases: Catalisam reaes de hidrlise de
ligao covalente. Ex: As peptidades

Classificao
Liases: Catalisam a quebra de ligaes covalentes e a
remoo de molculas de gua, amnia e gs carbnico.
Em geral h remoo de grupamentos qumicos. As
Dehidratases e as Descarboxilases so bons exemplos
Isomerases: Catalisam reaes de interconverso entre
ismeros pticos ou geomtricos. As Epimerases so
exemplos.
Ligases: Catalisam reaes de formao de novas
molculas a partir da ligao entre duas j existentes,
sempre s custas de energia (ATP). So as Sintetases.

Especificidade
As enzimas so muito especficas para os seus substratos
Esta especificidade se deve existncia do sitio de ligao do
substrato na superfcie da enzima
O stio de ligao do substrato de uma enzima dado por um
arranjo tridimensional especial dos aminocidos de uma
determinada regio da molcula, geralmente complementar
molcula do substrato, e ideal espacial e eletricamente para a
ligao do mesmo
O stio de ligao do substrato capaz de reconhecer inclusive
ismeros ticos "D" e "L" de um mesmo composto.
Este stio pode conter um segundo stio, chamado stio ativo ou
estar prximo dele; neste stio ativo que ocorre a reao
enzimtica.

Modelos de especificidade
Modelo Chave/Fechadura = Prev um encaixe perfeito
do substrato no stio de ligao, que seria rgido como
uma fechadura. Promoveria uma estabilidade da enzima
ao substrato
Evidncias experimentais sugerem um modelo que
combina uma especificidade tipo chave/fechadura
menos estvel (stio de ligao) que permite ou induz a
formao de um outro estgio de maior especificidade
entre enzima e substrato, mas instvel, resultando na
transformao em produto.

Modelo de especificidade

Modo de atuao
O substrato liga-se (em geral no covalentemente)
ao stio ativo formando um complexo enzimasubstrato, que posteriormente convertido a
enzima-produto, que se dissocia em enzima e
produto.

Modelos de atuao

Energia de ativao
Formao de
intermedirios carregados
Alinhamento de grupos
qumicos para quer possam
ocorrer as reaes
Rearranjos de ligaes
Energia de Ativao X
equilbrio
Velocidade da reao

Mecanismo Geral da Catlise

As enzimas aceleram a velocidade de uma reao por
diminuir a necessidade de energia de ativao da
mesma, sem alterar a termodinmica da reao:
A energia dos reagentes e produtos da reao
enzimtica e da no enzimtica so idnticas.
Para se superar a energia de ativao de uma reao,
passa-se pela formao de um estado intermedirio
chamado "Estado de Transio", sempre um composto
instvel e de alta energia ligado com altssima
afinidade ao stio cataltico.
Quanto menor a energia livre de ativao, mais
molculas tm energia suficiente para superar o
estado de transio por unidade de tempo e, assim,
mais rpida a velocidade de reao.

Mecanismo Geral da Catlise

Mecanismo Geral da Catlise

Mecanismos de acelerao da reao

Catlise cido-Base = aa com cadeias laterais ionizveis,
capazes de doar ou liberar prtons durante a catlise.
Toro de Substrato = Altera a conformao do substrato
induzida pela ligao do mesmo com o stio de ligao da
enzima, alcanando o estado de transio e estimulando
sua converso em produto.
Catlise Covalente = Resulta do ataque nucleoflico ou
eletroflico de um radical do stio cataltico sobre o substrato,
ligando-o covalentemente enzima e induzindo a sua
transformao em produto. Envolve com freqncia a
participao de coenzimas.
Efeito de Diminuio da Entropia = As enzimas ajudam no
posicionamento e na definio da estequiometria correta da
reao, facilitando os mecanismos anteriores.

Catlise cidobase geral

Catlise Covalente

Cintica Enzimtica
A cintica de uma enzima estudada avaliando-se a
quantidade de produto formado ou a quantidade de
substrato consumido por unidade de tempo de reao.
Uma reao enzimtica pode ser expressa pela seguinte
equao:
E + S <==> [ES] ==> E + P
O complexo enzima/substrato (ES) tem uma energia de
ativao ligeiramente menor que a do substrato isolado, e a
sua formao leva ao aparecimento do estado de transio
"Ts".
A velocidade de uma reao enzimtica depende das
concentraes de ENZIMA e de SUBSTRATO, temperatura
e pH, dentre outros.

Efeito da Concentrao do
Substrato
O Km a concentrao de
substrato na qual a velocidade da
reao metade de Vmax).
O Km de um substrato para uma
enzima especfica
caracterstico, e nos fornece um
parmetro de especificidade
deste substrato em relao
enzima
Quanto menor o Km, maior a
especificidade, e vice-versa.

Efeito da Concentrao do
Substrato
V o n de molculas de um
substrato convertidas em um
produto por unidade de
tempo. Aumenta conforme a
concentrao do substrato
at
atingir
um
plat
(saturao)
Em geral, as concentraes
de substratos dentro de uma
clula ficam prximas ao Km
da enzima que os degrada
ou produz

Fatores externos que alteram a

velocidade da reao
Temperatura = Quanto maior a
temperatura, maior a velocidade
da reao, at se atingir a
Temperatura tima; a partir dela,
a atividade volta a diminuir, por
desnaturao da molcula.
pH = existe um pH timo, onde a
distribuio de cargas eltricas da
molcula da enzima e, em
especial do stio cataltico, ideal
para a catlise (estmago).
Concentrao do Substrato.

Inibio enzimtica
Inibidores so compostos que podem diminuir a
atividade de uma enzima.
A inibio enzimtica pode ser reversvel (ligao
no covalente) ou irreversvel (ligao covalente
inseticidas neurotxicos)
Na inibio enzimtica irreversvel, h modificao
covalente e definitiva no stio de ligao ou no stio
cataltico da enzima.
Existem 2 tipos de inibio enzimtica reversvel:
Inibio Enzimtica Reversvel Competitiva
Inibio Enzimtica Reversvel No-Competitiva

Inibio enzimtica reversvel

competitiva
Quando o inibidor se liga reversivelmente ao mesmo
stio de ligao do substrato;
O efeito revertido aumentando-se a concentrao
de substrato
Este tipo de inibio depende das concentraes de
substrato e de inibidor.
Efeito sobre:
Vmax: no altera
Km: Aumenta

Inibio enzimtica reversvel

no competitiva
Quando o inibidor liga-se reversivelmente enzima em um stio
prprio de ligao, podendo estar ligado mesma ao mesmo
tempo que o substrato;
Este tipo de inibio depende apenas da concentrao do
inibidor.
Efeito sobre:
Vmax: diminui
Km: depende da
variao da Vmax

Regulao enzimtica
Algumas enzimas podem ter suas atividades reguladas,
atuando assim como moduladoras do metabolismo
celular.
Esta modulao essencial na coordenao dos
inmeros processos metablicos pela clula.
Alm dos mecanismos j citados de modulao de
atividade enzimtica - por variao da concentrao do
substrato ([S] = Km nas clulas), ou por inibio
enzimtica, por exemplo - existem 2 modelos de
regulao enzimtica mais conhecidos:
Modulao alostrica
Modulao Covalente

Modulador alostrico
Ocorre nas enzimas que possuem um Stio de
Modulao ou Alostrico, onde se liga de forma nocovalente um modulador alostrico (Efetor) que pode
ter ao positiva (ativa a enzima) ou negativa (inibe a
enzima).
A ligao do modulador induz a modificaes
conformacionais na estrutura espacial da enzima,
modificando a afinidade desta para com os seus
substratos semelhante a um inibidor NC;
Um modelo muito comum de regulao alostrica a
inibio por "FEED-BACK", onde o prprio produto da
reao atua como modulador da enzima que a
catalisa.

Modulao Covalente
Ocorre
quando
h
modificao
covalente da molcula da enzima, com
converso entre formas ativa/inativa.
O processo ocorre principalmente por
adio/remoo
de
grupamentos
ativos.
Status nutricional

Concluindo - Reguladores da
Atividade Enzimtica

Concentrao de Substrato
Temperatura
pH
Inibio Irreversvel
Inibio Reversvel C e NC
Modulao Alostrica
Modulao Covalente

Considere o grfico abaixo:O stio ativo da enzima proposta possui

dois resduos de aa para a catlise, sejam Glu e Asp. Os valores de
pK das cadeias carboxlicas laterais desses dois resduos so 5,9 e
4,5 respectivamente. Qual o estado de ionizao no ph timo? Glu
e Asp esto na posio 35 e 190 da cadeia peptdica. Como podem
agir em um mesmo stio? possvel que esta enzima catalise a
reao abaixo? Como a enzima se regeneraria? Idealize um sistema
tampo timo para a enzima em questo. Proponha um modelo de
funcionamento dessa enzima para a reao abaixo. Idealize um
modulador alostrico para essa reao.