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UNIDAD 1

LABORATORIO DE QUIMICA FORENSE


INTEGRANTES:
ILSE MONSERRAT GARCIA RODRIGUEZ
FATIMA DEL ROSARIO CARBALLO CASTRO
GPE. AIDEE ROJAS RODRIGUEZ

Cromatografa de papel
Tcnicas de separacin, es decir
que permiten separar solutos que
estn mezclados en un disolvente,
en funcin de su afinidad por dos
fases diferentes.
Laboratorios
anlisis
cualitativos

Esta tcnica la cre M. TSWEET


cuando
separo
distintos
pigmentos de las plantas.
La fase mvil, puede ser un
lquido o un gas en el cual estn
mezclados las sustancias a
separar.
La fase estacionaria es el lecho a
travs del cual va a moverse la
fase mvil

En

la cromatografa en papel se
utiliza una hoja de papel de
celulosa de elevada pureza
recubierta de un capa de agua
asociada a las fibras de celulosa,
que es la que constituye la fase
estacionaria.

La

fase mvil, en la que ir


disuelta la muestra, es lquida
tambiny est formada por
disolvente cuya naturaleza se
elige
en
funcin
de
los
componentes que se pretenden
separar.

Se

aplica la muestra sobre el


papel en un extremo de ste.
Introduccin del papel en la
cubeta
que
contiene
el
disolvente. Atraviesa el papel
por capilaridad arrastrando los
componentes de la mezcla.

Separacin

en funcin de la afinidad por las


dos fases, las ms solubles en agua se
quedarn cerca del punto donde se aplic la
muestra, y las menos solubles en agua y ms
solubles en el disolvente llegarn ms lejos.
Las sustancias separadas se identifican
mediante diversos procedimientos fsicos o
qumicos.

Cromatografa en capa fina


Es

una tcnica muy utilizada para


la identificacin y determinacin
de pureza de compuestos.
Tambin puede utilizarse como
tcnica de separacina muy
pequea escala.

La

fase estacionaria es una capa


fina de gel de slice u otro soporte
con propiedades adsorbentes
dispuesta sobre un soporte de
vidrio
o
aluminio
que
denominaremosplaca
El fluyente o fase mvil ser la
mezcla de disolventes adecuada

La

sustancia de inters se
adherir a la fase estacionaria o
se mover con la fase mvil,
viajando una distancia que es
inversamente proporcional a la
afinidad por la fase estacionaria.

La

fase estacionaria puede ser de


papel, de celulosa o de un gel de
silicato (vidrio molido bien fino) unido a
una superficie slida (una placa de
vidrio, aluminio, plstico o papel).
Se
colocan las muestras a un
centmetro del borde en uno de los
extremos de la placa, se deja secar, se
coloca la placa en un envase (tanque
de desarrollo) que ya contiene una
pequea cantidad del solvente.

Se

tapa y se deja correr por un rato. El


solvente subir por capilaridad e ir
arrastrando las molculas, las cuales se
movern segn la afinidad que muestren
por la fase estacionaria. Si la mezcla
demuestras que se est analizando
presenta color, se vern los distintos
colores migrando a distintas velocidades.
Si son incoloras hay que someter la placa
a algn tratamiento con una sustancia
desarrolladora (developer)

CROMATOGRAFA DE GASES
(GC)

La

cromatografa de gases es la
tcnica a elegir para la
separacin de compuestos
orgnicos e inorgnicos
trmicamente estables y voltiles

La

tecnica analitica de mas


amplia utilizacion

Tipos de cromatografia de
gases
La cromatografa gaslquido
La cromatografa gasslido

Tipos de cromatografia de
gases
La

cromatografa gas-lquido
(GLC, degas-liquid
chromatography)

lleva a cabo la separacin por


medio del reparto de los
componentes de una mezcla
qumica, entre una fase gaseosa
que fluye (mvil) y una fase
lquida estacionaria sujeta a un

Tipos de cromatografia de
gases
La

cromatografa gas-slido (GSC,


degas-solid choromatography)

utiliza un absorbente slido como fase


estacionaria. La disponibilidad de
detectores verstiles y especficos, y la
posibilidad de acoplar el cromatgrafo
de gases a un espectrmetro de masas
o a un espectrofotmetro de infrarrojo,
amplan an ms la utilidad de la
cromatografa de gases.

Objetivo
Proporcionar

un gasto o flujo constante del gas transportador

(fase mvil)
Permitir

la introduccin de vapores de la muestra en la


corriente de gas que fluye

Contener

la longitud apropiada de fase estacionaria

Mantener

la columna a temperatura apropiada (o la secuencia


del programa de temperatura)

Detectar

los componentes de la muestra conforme eluyen de la

columna
Proveer

una seal legible proporcional en magnitud a la


cantidad de cada componente

Requerimientos de un equipo de
cromatografa de gases
Los

requerimientos bsicos
en un equipo de
cromatografa de gases son:
1. Gas de arrastre o
acarreador
2. Puerto de inyeccin
3. Una columna
4. Un detector
5. Un registrador o cualquier
otro dispositivo de salida
para medir la seal del
detector
6. Cromatogramas

Aplicaciones de la cromatografa de gases

Evala

la pureza de los
reactantes y productos de
reaccin o bien a monitorear la
secuencia de la reaccin, para los
fabricantes de reactivos qumicos
su aplicacin para la
determinacin de la pureza es lo
ms importante.

En

la investigacin es un auxiliar
indispensable para diversas
tcnicas de evaluacin, entre las
principales estn los estudios
cinticos, anlisis de adsorcin a
temperatura programada,
determinacin de reas
especficas por adsorcin de gas
y determinacin de isotermas de
adsorcin

En

el campo tambin pueden ser


aplicados, principalmente en
estudios de contaminantes del
agua: insecticidas en agua,
pesticidas en aguas de lagos,
lagunas, ros; desechos
industriales descargados en ros
o lagunas.

CROMATOGRAFA DE LQUIDOS DE
ALTA RESOLUCIN

La

cromatografa de lquidos es
un mtodo de separacin fsica
basado en la distribucin de los
componentes de una mezcla
entre una fase estacionaria y una
fase mvil que en este caso es un
liquido.

La

cromatografa liquida clasica se lleva a


cabo en una columna generalmente de vidrio, la
cual esta rellena con la fase estacionaria.

Luego

de sembrar la muestra en la parte


superior, se hace fluir la fase movil a travs de
la columna por efecto de la gravedad. Con el
objeto de aumentar la eficiencia en las
separaciones el tamao de las partculas de
fase fija se fue disminuyendo hasta el tamao
de los micrones lo cual genero la necesidad de
utilizar altas presiones para lograr que la fase
movil fluya a velocidades razonables.

Dependiendo

del tipo de fase estacionaria y del


tipo de fenmeno fsico que provoca la
separacin, la cromatografa liquida de alta
resolucin puede clasificarse en:

Cromatografa

de adsorcin

Cromatografa

de reparto o particin

Cromatografa

de iones

Cromatografa

de exclusin por tamao

Cromatografia de
adsorcion:
La

fase estacionaria es un solido


y se utiliza casi exclusivamente
silice (silica) y en casos discretos
alumina.

Cromatografia de reparto o
particion.
Actualmente

se utiliza como fase


estacionaria compuestos ligados
qumicamente a un soporte solido de
Cromatografa fase
silice.

normal
Cromatografa en fase
inversa.

En la cromatografa en fase normal la fase


estacionaria es polar (como por ejemplo
silice) y la fase mvil es poco polar
(hexano, diclorometano, cloroformo).

En

la cromatografa en fase
inversa, el compuesto unido
qumicamente es no polar,
frecuentemente hidrocarburo
aliftico, y se emplean las fases
mviles son solventes polares
(agua, metanol, acetonitrilo).

Cromatografia de iones
Se

utilizan columnas rellenas con


fases estacionarias con una
determinada carga que retienen
iones de carga opuesta. Las fases
estacionarias para la modalidad
clasica de esta cromatografa son
las resinas de intercambio inico.

Cromatografa de exclusin por


tamao:
La

fase estacionaria esta formada


por partculas de porosidad definida
y uniforme. Las molculas de mayor
tamao tienen menor capacidad
para acceder a los poros y por
mantenerse excluidas eluyen mas
rpido, mientras que las de menor
tamao que pueden penetrar en los
poros y permanecer all mas tiempo
eluyen en ultimo lugar.

instrumentacin para cromatografa


de lquidos de alta resolucin

SISTEMAS

DE BOMBEO
Debido a las elevadas presiones de
trabajoy al pequeo tamao
delas partculas de la fase
estacionaria, se utiliza una
bomba que es la encargada de
introducir la fase mvil o
disolvente a travs de
lacolumna.

SISTEMAS

DE INYECCIN DE MUESTRA
los volmenes que se emplean han de ser muy pequeos,
de unas pocas dcimas de microlitro a tal vez 500
El

mtodo ms simple es la utilizacin de unajeringa de


alta presin con un diafragma a la entrada de la columna.
Est limitado a una presin mxima de operacin de 1500
psi.

Columnas
En

las columnas cromatogrficas


es donde se produce la velocidad
diferencial delos solutos que
permite su separacin

DETECTORES

El papel del detector es indicar los momentos de


aparicin de los componentes, y proporcionar
indicacin cuantitativa y cualitativa de los mismos.
El detector utilizado depende de la naturaleza de
la muestra y deber reunir una serie de
caractersticas como son, tener una sensibilidad
elevada, buena estabilidad y reproducibilidad.

ESPECTROMETRIA
DE
FLOURESENCIA O
FLUORIMETRIA

Llamada espectrofotometra o
fluometra;
es
un
tipo
de
espectroscopia electromagntica,
la cual analiza la fluorescencia de
una muestra.

Involucra el uso de un haz de luz


comnmente de luz ultravioleta, que
excita a los electrones en las molculas
de ciertos componentes y causa entonces
la emisin de luz; tpicamente, pero no
necesariamente, luz visible. Su tcnica
complementaria es el espectro de
absorcin .

El

equipamiento
que
mide
la
fluorescencia es llamado fluormetro o
fluormetro.

INSTRUMENTOS
En

la espectrometra de fluorescencia se
utilizan
dos
tipos
generales
de
instrumentos:

Fluormetros de filtro. Utilizan filtros para


aislar la luz incidente y la luz fluorescente.

Espectrofluormetros.

Usan
monocromadores de retculo de difraccin
para aislar la luz incidente y la luz
fluorescente.

APLICACIONES

Es

usada en los campos de


investigacin como el bioqumico,
mdico y qumico, entre otros,
para el anlisis de compuestos
orgnicos.

Su

uso tambin ha sido reportado


en la diferenciacin de tumores
malignos y benignos en la piel.

ESPECTROSCOPIA DE
ABSORCIN ATMICA

Es

una tcnica para determinar la


concentracin de un elemento metlico
determinado en una muestra.
Puede utilizarse para analizar la
concentracin de ms de 62 metales
diferentes
en
una
solucin.

Usa

la adsorcin de la luz para medir


la concentracin de la fase gaseosa
de tomos. Ya que la mayora de las
muestras son slidas o lquidas, los
tomos o iones de los analitos deben
ser vaporizados a la flama o en un
horno de grafito.
Los tomos adsorben luz visible o
ultravioleta y hacen transiciones a
niveles de energa ms altos.

La

sensibilidad depende del nmero de


tomos que se encuentran en el estado
fundamental.
La absorcin atmica da lugar, en
general, a una mayor sensibilidad que
la fotometra de llama para un gran
nmero de elementos.
Adems, la absorcin atmica es una
tcnica
que
presenta
menos
interferencias y es ms simple que la
fotometra de llama

En

absorcin atmica la baja


energa no es una desventaja tan
importante ya que la misin de la
llama,
en
ese
caso,
es
nicamente atomizar la muestra
y formar un vapor de tomos sin
excitar; por esta razn es
aplicable a un mayor nmero de
elementos que la fotometra de
llama.

FOTOMETRIA DE LLAMA
Es

una tcnica de emisin que


utiliza una llama como fuente de
excitacin y un foto detector
electrnico como dispositivo de
medida. Se trata principalmente
de un mtodo de anlisis
cuantitativo y es uno de los
mtodos ms sencillos y precisos
para el anlisis de metales
alcalinos.

Funcin de las llamas


Tiene tres funciones bsicas
Permite pasar la muestra a analizar del
estado lquido a estado gaseoso.

Descompone los compuestos moleculares


del elemento de inters en tomos
individuales o en molculas sencillas.

Excita

estos

tomos

molculas.

CONDICIONES DE LA LLAMAS

Temperatura

ella se
gaseoso.
El

adecuada y que en
forme un ambiente

ruido de fondo de la llama no


debe interferir las observaciones
a
efectuar.

Llama tpica
consta de:
cono interno,
cono externo
zona entre
conos.