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TINCIONES

UNIDAD I-II
BREVE HISTORIA…
 Viene del Griego histos que significa tejido, telar y de
logos que quiere decir palabra aprendizaje.
 Histología significa entonces el estudio sobre el tejido
tanto vegetal como animal y fue introducido como
denominación por Mayer en 1819.
 La primeras investigaciones histológicas se dieron en
1600.
 Marcello Malpighi (1628-1694) es el fundador de la
histología. Se nombran aquí también: Swamerdam y
Leewenhoek quien descubrió en cortes de corcho que
el tejido vegetal esta compuesto por pequeñas cámaras
a las que denomino células.
 Bichat, a fines de 1700, introduce le concepto de tejido.
Así, en 1833 Brown descubre el núcleo celular. Luego,
en 1839 Schawnn lanza la teoría celular.
TRABAJO EN CUADERNO:
 Investiga la biografía de Marcello Malpighi y
contesta las siguientes preguntas:
 1.- Cuáles fueron sus principales contribuciones en
la histología animal y vegetal?
 2.-¿Qué cualidades crees que le permitieron a un
médico convertirse en un científico y padre de la
histología?


 Kolliker en 1852, edita el primer texto sistematizado
sobre la estructura del tejido humano, en el se reducen
los 21 tejidos de Bichat a los 4 tejidos fundamentales
actuales, es decir, tejido epitelial, conectivo, muscular y
nervioso
LECTURA
 Del libro «Histología» de Geneser, realiza la lectura
del capítulo 5, «De células a tejido» y contesta las
siguientes preguntas:
 ¿Qué es la histogénesis?
 ¿De que parte del blastocisto se desarrollan las 3
capas germinativas?
 ¿Qué se entiende por parénquima?
 ¿Qué se entiende por morfogénesis?
MÉTODOS EMPLEADOS EN HISTOLOGÍA
PREPARACIÓN GENERAL DE TEJIDOS
 Varían según el tipo de muestra y según el microscopio en el que se desee
observar la muestra.
 Técnica histológica tradicional: los tejidos son endurecidos substituyendo el agua
por parafina utilizando la técnica de infiltración y teñidos para aumentar la
visibilidad de las estructuras celulares. Los cortes en esta técnica suelen tener un
grosor entre 2 y 10 micrómetros. Esta técnica es lenta y laboriosa, requiriendo al
menos de 15 o 16 horas para obtenerse una muestra válida para el corte.
 Criosección: en esta técnica los tejidos son endurecidos por congelación. Esta
técnica se utiliza para los tejidos que no soportan el proceso impuesto por la
técnica histológica tradicional, o cuando se requiere de resultados inmediatos
(esta técnica es mucho más veloz que la primera, 5-10 minutos). Se usa una
variante del micrótomo denominada criostato, alojado en una cámara de
congelación, que puede alcanzar temperaturas de hasta -35 °C según el modelo.
Se suele trabajar a temperaturas de entre -20 y -25 °C.
 Microscopía electrónica: los tejidos son embebidos en resina epóxica y luego se
utiliza un microtomo equipado con una hoja de vidrio o diamante para cortar
secciones muy finas (típicamente de 60 a 100 nanómetros). Las secciones se
tiñen y se examinan con un microscopio electrónico de transmisión. A menudo a
este instrumento se lo denomina ultramicrotomo.

Micrografía electrónica de la tinción
(orgánica) de tejido vegetal sin (arriba) y
con (abajo) OsO
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XILENO Y ETANOL

TOMA DE LA MUESTRA
 En primer lugar se toman
fragmentos de la pieza a
estudiar y se depositan
en un contenedor
perforado. El contenedor
es sometido a la acción
de agentes que
deshidratarán el
contenido y finalmente lo
incluirán en parafina
líquida. El fragmento
parafinado se deja
enfriar en un molde con
el propósito de obtener
un bloque sólido.
OBTENCIÓN DE LOS CORTES
 El bloque es reducido a finas secciones que son depositadas en un
recipiente con agua caliente. Las secciones de la muestra se
recogen en una lámina de vidrio (portaobjetos).
DESPARAFINADO

Sometemos a los "portas" a la acción de agentes que eliman la
parafina y rehidratan los cortes. Este paso hace posible la acción de los
colorantes
TINCIÓN
 Tinción con hematoxilina-eosina y fijación con formalina:
 La tinción hematoxilina-eosina corresponde a la mezcla
de hematoxilina y eosina.
 El método supone la aplicación de la tinción de hematoxilina, que
por ser catiónica o básica, tiñe estructuras ácidas (basófilas) en
tonos azul y púrpura , como por ejemplo los núcleos celulares; y
el uso de eosina que tiñe componentes básicos (acidófilas) en
tonos de color rosa, gracias a su naturaleza aniónica o ácida,
como el citoplasma.



DESHIDRATADO DE LAS MUESTRAS

A continuación volvemos a deshidratar los cortes para preservarlos y
hacer duraderas las muestras.
MONTAJE DE LAS MUESTRAS
 Finalmente, cubrimos los "portas" con una delgada
lámina de vidrio (cubreobjetos) en la cual
colocamos una gota de medio adhesivo.
LABORATORIO
 Biopsia
 Parafina-microtomo-hematolixina
 Criostato
PACIENTE: «Manchas»

REFERENCIAS
 http://labbio.bligoo.com/content/view/441950/Etapa
s-en-la-preparacion-de-una-muestra-
microscopica.html

TINCIONES: EXPOSICION POR
PAREJAS
 HEMATOXILINA Y EOSINA
 ARGENTICA
 PAS
 WRIGHT/ROMANOWSKY
 GRAM

 Exposición de 15 min
 Historia, fundamento, procedimiento y ejemplos.
 Bibliografia