Está en la página 1de 16

Instrumentos

espectrofotomtricos
Cul es la funcin de un espectrofotmetro?
Mide la luz transmitida por una disolucin para determinar
la concentracin de la sustancia que absorbe luz y que esta
dentro de la disolucin.
Elementos de un espectrofotmetro
A) fuente de luz

Lmpara de tungsteno
Fuente de luz mas utilizada
15% de la energa emitida cae en la regin visible
La mayor parte de la emisin es cercana al infrarrojo
Lmpara de descarga de deuterio
Utilizada para trabajar con luz UV
Emisin continua debajo de 165 nm
Lmpara de arco de mercurio
Utilizada para trabajar con luz UV
Emiten un espectro continuo desde la regin UV hasta
la regin media visible.
B) Monocromador
Filtros de vidrio de color
Dejan pasar una banda amplia de energa radiante
Baja transmitancia
No son precisos
Sencillos, baratos y tiles
Filtros de interferencia
Consta de dos cristales de vidrio con espejo que estn
separados a la mitad de la longitud de onda ()
deseada, cuando el rayo de luz incide sobre un espejo
las que sean del doble del espacio entre los cristales
se reflejaran de un lado a otro.
Transmite mltiplos de la deseada
Requieren filtros accesorios para eliminar otras
Transmite de un margen estrecho de valores
Prisma
Un haz de luz se refracta a medida que entra en el vidrio mas
denso
Las cortas se refractan mas que las largas
El prisma se puede girar haciendo que solo pase la deseada

Rejilla de difraccin
Difraccin: descomposicin de la luz en sus constituyentes
Consta de una gran cantidad de surcos paralelos (15,000 a 30,000
pulgada)
Rejillas con rayado fino: espectro de dispersin amplia
Son las mas usadas

C) Celda de la muestra
Conservar constante la trayectoria de la luz para que la
absorbancia sea proporcional a la concentracin
Se marca con cido la posicin de uso
Las cubetas rayadas difractan la luz
Las cubetas cuadradas tienen superficies pticas en
planos paralelos y una trayectoria de luz constante
Y tienen menos error por el efecto de las lentes
(orientacin y refraccin)
Usar cubetas de cuarzo para utilizar luz UV
D) fotodetectores
Transforman la energa radiante transmitida en energa
elctrica
Pelcula sensible a la luz (Se) y sobre esta una pelcula de Ag
sobre una placa de hierro con lo que se genera fuerza
electromotriz
La corriente producida es proporcional a la radiacin incidente
No requiere energa externa
Es barata y durable
Sensible a la temperatura
No lineal a niveles de iluminacin muy bajos o altos
Fotocelda o celda
de capa-barrera
fototubo
Tiene material fotosensible que emite electrones
cuando incide energa luminosa
Requiere energa externa
Fotocorriente lineal


Fotomultiplicador
Detecta y amplifica la energa radiante
La luz incidente choca con el ctodo que y genera una emisin de
electrones que son atrados por los dnodos (nodo) que tiene
voltajes sucesivamente mas altos con lo que se amplifica la corriente
El FM es 200 veces mas sensible que el fototubo
En extremo sensible a muy bajos niveles de luz y destellos de muy
corta duracin
Fotodiodo
Excelente linealidad, velocidad y pequeas
dimensiones
tiles en bajos niveles de luz
Producen un espectro completo UV/ visible
Espectrofotmetro de haz nico
La lectura de la absorbancia se
debe efectuar por medio de un
blanco, que ser la disolucin de
referencia
Los espectrofotmetros de haz
nico por computadora han y
de puesta en ceros en forma
continua han reemplazado a la
mayora de haz doble
Espectrofotmetro de doble haz
Utilizados para obtener el
espectro de absorcin de la
muestra
Aseguramiento de la calidad del espectrofotmetro
Exactitud de la
Luz parasita
Linealidad
Comprobaciones para validar
la funcin del instrumento:
Principios de la
Automatizacin en
qumica Clnica
Desde 1995 ha habido grandes cambios en los analizadores
automatizados, en efecto estos se han vuelto ms compactos, rpidos y
fciles de usar como resultado del refinamiento en los avances electrnicos
y de software de las compaas.

las fuerzas impulsadoras de los procedimientos automatizados :
El aumento de mayor volumen de anlisis en los establecimientos
la necesidad de la rapidez de la respuesta
la necesidad de anlisis ms completos en los perfiles de los pacientes
aparentemente sanos (chequeos de rutina )
para el descubrimiento de trastornos asintomtico
chequeos ms profundos en los pacientes con diferentes patologas crnicas
como la diabetes, sndromes metablicos, trastornos endocrinolgicos,
perfiles de riesgo cardiacos, etc
Ventajas

incrementar el nmero de pruebas que realiza un laboratorio clnico en
un determinado periodo de tiempo
reducir los costos por pago de mano de obra calificada como es un
profesional en laboratorio clnico para as poder reducir los costos por
prueba.
reducir el ndice del error humano para bajar as la variabilidad de
resultados de laboratorio en laboratorio.
se corrigen los errores inherentes a la metodologa, potenciales de los
procesos manuales por mal pipeteo, calculo y trascripcin de resultados.
Requiere mnimas cantidades de muestras
automatiza las tareas lentas, repetitivas y potencialmente arriesgadas para
crear un rea de trabajo flexible, adaptable in situ y altamente eficiente.

Principios de uso:

Fotometra de absorcin
Espectrometra
Reacciones colorimtricas y potenciomtricas