Curso de Fisicoqumica Aplicada

Carrera de Especializacin en Esterilizacin

Dictado desde 1997
Con un total de 29 horas:
6 horas de clases tericas
14 horas de seminarios y clases de problemas
9 horas de clases de laboratorio
Regularizacin con el 75 % de presentismo (integrado
son 6 presentes/8 clases). Recuperacin de 1 presente
es posible.
Aprobacin con examen final escrito en fechas
oficiales de finales

Dra. Susana Puntarulo
susanap@ffyb.uba.ar
TEMARIO CLASE TERICA I
1. Gases: Ecuacin de estado
2. Termodnmica: Primera y Segunda Ley
3. Esterilizacin por calor hmedo: aspectos
fisicoqumicos, caractersticas del vapor de agua
4. Esterilizacin fra: aspectos fisicoqumicos,
mecanismos de accin mediados por radicales
libres del oxgeno
Comprender los procesos
qumicos y fsicos con el fin de
poder predecirlos y controlarlos
Objetivo de la Fisicoqumica
ESTERILIZACIN POR CALOR
MTODOS DE ESTERILIZACIN
SECO
HMEDO
ESTERILIZACIN POR RADIACIN
ESTERILIZACIN GASEOSA (H
2
O
2
y otros)
IONIZANTE
NO IONIZANTE (UV)
ESTERILIZACIN POR FILTRACIN
GASES
1. Grupo de molculas en contnuo movimiento catico, cuya
velocidad de movimiento se incrementa con la temperatura.

2. Un gas se diferencia de un lquido, en que las molculas se
hallan a mayor distancia (interaccin mnima). Gases ideales =
interaccin nula.

3. Propiedades de un gas para el estudio de su comportamiento:
volumen, presin, temperatura, masa.

4. Estas variables se relacionan a partir de una ecuacin de
estado.

5. Ley de Dalton: La presin total en una mezcla de gases
(ideales) es la suma de las presiones de los gases individuales
ocupando el mismo volumen.

P V = n R T
ECUACION GENERAL DE LOS GASES
Comportamiento ideal
Las relaciones P, V, T
en los gases ideales
A volumen constante
(condicin del autoclave)
P = T (nR/V)
P = T (constante)
Dra. Susana Puntarulo
susanap@ffyb.uba.ar
TEMARIO CLASE TERICA I
1. Gases: Ecuacin de estado
2. Termodnmica: Primera y Segunda Ley
3. Esterilizacin por calor hmedo: aspectos
fisicoqumicos, caractersticas del vapor de agua
4. Esterilizacin fra: aspectos fisicoqumicos,
mecanismos de accin mediados por radicales
libres del oxgeno
Fisicoqumica
Termodinmica
Calor Trabajo Energa
Universo Sistema Entorno
Permeables
Impermeables
Intercambio de materia
No hay intercambio de materia
Diatrmicos
Adiabticos
Intercambio de calor
No hay intercambio de
calor
S
A
El sistema y los alrededores
pueden interaccionar el uno
con el otro, a travs de los
LIMITES
SISTEMAS
ABIERTOS
Intercambian
materia y energa
con los alrededores

AISLADOS
CERRADOS
Ley Cero de la Termodinmica (Joseph Black, Edimburgo, 1770)

El equilibrio trmico implica:
la misma temperatura (no el mismo calor)
si dos cuerpos estn en equilibrio
trmico y uno de ellos alcanza el
equilibrio con un tercero, el
primero tambin alcanza el
equilibrio trmico con el tercero


Los cuerpos que estn en contacto, directamente o
a travs del aire, alcanzan la misma temperatura
Expresin matemtica
AU = q + w
Funcin de estado
PRIMERA LEY DE LA TERMODINMICA
Sistema cerrado
No son funciones de estado
AU : energa interna
CALOR Y TRABAJO
q
Es la transferencia de energa desde una zona de
mayor a otra de menor temperatura
dq = C x dT
Como toda forma de energa se puede expresar como el
producto entre un factor intensivo y uno extensivo
C: Capacidad Calorfica
w
Aplicacin de una fuerza a lo largo de una distancia
dw = F x dx
TRABAJO INTENSIVO EXTENSIVO
DIFERENTES TIPOS DE TRABAJO
F dx Fuerza distancia
dA Tensin dA
-P dV Presin dV
E. dQ Potencial dQ
TRABAJO
realizado por el sistema
TRABAJO DE COMPRESION Y EXPANSION
realizado sobre el sistema
P
ex
P
ex
P
ex

dw (-) dw (+)
Expansin (V
f
> V
i
) compresin (V
f
< V
i
)
= - P
ex
A dx dw = - P
ex
dV
En termodinmica la forma ms corriente de realizar trabajo (w),
es a travs de un cambio de volumen del sistema
dV
dw = F dx
PRIMERA LEY DE LA TERMODINMICA
La energa total de un sistema aislado
y del universo permanecen constantes.
La energa no se crea ni se destruye,
se transforma y se conserva.
En los procesos naturales la
energa total se conserva
AU = q + w
Primera Ley de la Termodinmica

La energa no se crea ni se destruye, slo
se transforma y se conserva

Fenmeno molecular subyacente
Los choques elsticos de las molculas

FUNCION DE ESTADO
Depende nicamente de los estados inicial y final
No depende del camino seguido por el sistema durante
el cambio
Matemticamente corresponde a una diferencial exacta
Presin
Volumen
Temperatura
Funciones de estado
No son funciones de estado
Calor
Trabajo
AU
AH
AS
AG
S
S
1
2
U
1
U
2

AU = U
2
- U
1
PROCESO TERMODINAMICO
En un proceso cclico AU = 0
V = constante P = constante
dU = dq + dw
dU = dq P dV
dU = dq
V
dH = dU + d(PV)
dH = dq + VdP
dH = dq
P
dH = dq - PdV + VdP + PdV
TRANSFERENCIA DE CALOR

AU = q
V
AH = q
p
AH : entalpa
w
extra
= 0
CAPACIDAD CALORIFICA (1)
Relacin entre el calor (dq) transferido al sistema y la
variacin de temperatura resultante (dT)
P constante
V constante
C
P
= dq
p
/dT = dH/ dT AH = nC
p
AT
C
v
= dq
v
/dT = dU/ dT AU = nC
v
AT
Para un gas diatmico
Para un gas monoatmico
C
v
= 3/2R C
p
= 5/2R
C
v
= 5/2R C
p
= 7/2R
CAPACIDAD CALORIFICA (2)
r p
H H H = A
rvos
T
H
prod
T
H
T
H
P P P
|
.
|

\
|

|
.
|

\
|
=
|
.
|

\
|
A
c
c
c
c
c
c
Dependencia del AH con la temperatura (Ley de Kirchhoff)
P P P
P
C rvos C prod C
T
H
A = =
|
.
|

\
|
A
c
c
dT C H d
P
A = A
} }
AH
AH
A = A
2
1
2
1
T
T
P
dT C H d
) T T ( C H H
1 2 P 1 T 2 T
A = A A
) T T ( C H H
1 2 P T T 1 2
A + A = A
TERMOQUMICA
Estudia la transferencia de calor (AU y AH)
absorbido o liberado por las reacciones qumicas
Toda reaccin qumica tiene un calor de reaccin
asociado
Reaccin exotrmica (libera calor) AH < 0
Reaccin endotrmica (absorbe calor) AH > 0
Entalpa de procesos qumicos
Es el AH
o

asociado a

la combustin
el cambio de fase
la disolucin
la ionizacin
la atomizacin

de 1 mol de
compuesto...
Leyes de la Termoqumica
Ley de Hess El cambio trmico, a P o V
constante, de una reaccin qumica es el mismo
tanto si se lleva a cabo en una o en varia etapas
Ley de Lavoisier-Laplace El cambio trmico, a P
o V constante, de una reaccin qumica dada en una
direccin es de igual magnitud y de signo contrario
al de la reaccin en sentido inverso.
H
2
O(l) H
2
O(g)
vaporizacin
AH = - 40.6 kJ/mol
H
2
O(g) H
2
O(l)
condensacin
AH = + 40.6 kJ/mol
FUNCIONES TERMODINAMICAS PARA LOS
DISTINTOS PROCESOS
PROCESO
q w
AH A U
Isotrmico - w -nRTlnV
f
/V
i
0 0
Isobrico nCp A T -P A V nCv A T nCp A T
Isocrico nCv A T 0 nCv A T nCp A T
Adiabtico 0 nCv A T nCv A T nCp A T
Energa de
alimentos
Calor
Trabajo
El individuo mantiene su peso constante
Energa qumica Calor, trabajo
INGESTA: Anlisis de los alimentos
Contenido calrico (kJ/g) Total (kJ)
69 g protenas
76 g grasas
300 g glcidos
17,1
39,3
17,1
1180
2987
5130
9297
ENERGA LIBERADA: Calorimetra directa
9207 kJ/da
Segunda Ley de la Termodinmica
Todo proceso espontneo resulta en un incremento
neto de entropa, o desorden, del sistema ms sus
alrededores
S= funcin entropa

dS = dq/T

ASu = ASs + ASalr
Gases ideales
Cambios de fases
procesos
Isotrmicos
Isocricos
Isobricos
Adiabticos
ASs = - ASe
ASs
Clculo de la entropa
Un sistema y su entorno
ASu = ASs + ASe
ASu = 0
ASu > 0
reversible
irreversible
ASs irrev = ASs rev
Procesos irreversibles
ASs
ASe
ASu >
0
irreversible
A B
C
D
AS
2

AS
3

AS
1

ASu = ASs + ASe
AS
1
+ AS
2
+

AS
3
- dq
s
/T dq
e
/T
Clculo de la entropa
=
=
=
reversible
reversible
reversible
Proceso isotrmico
Proceso isocrico
Proceso isobrico
Proceso adiabtico
Cambios de fases
AS = n R ln V
2
/V
1

AS = n Cv ln T
2
/T
1
AS = n Cp ln T
2
/T
1
AS = 0
AS = A H/T
Clculo de la entropa
Energa libre de Gibbs
ASu > 0 Criterio general de espontaneidad
Universo
Sistema
G = H - T S dG = - T dSu
a P y T constantes, w
extra
= 0
AG < 0
Proceso espontneo
a P y T constantes,
w
extra
= 0
AG = AH - T AS AG = -RT ln Keq
aA + bB cC + dD
Clculo de funciones termodinmicas
para las reacciones qumicas
AF rn = E n F prod - E n F rvos
AF rn =
c F
C
+ d F
D
- a F
A
- b F
B

Donde F puede ser U, H, S, G o cualquier
otra funcin termodinmica
Segunda Ley de la Termodinmica
La entropa aumenta continuamente


Fenmeno molecular subyacente
El movimiento molecular que dispersa y
desordena a la materia

Los organismos vivos presentan un alto grado de orden
Organismo vivo
Nutrientes
Luz solar
Calor
Aumento
de
Entropa
Segunda Ley de la Termodinmica
Crecimiento:
Clula Alrededores Universo
AS negativo AS positivo AS positivo

Estado Estacionario:
Clula Alrededores Universo
AS cero AS positivo AS positivo

Degradacin:
Clula Alrededores Universo
AS positivo AS cero AS positivo
Sistema cerrado
No mantiene la vida
Evoluciona hacia
el equilibrio
Sistema abierto
Mantiene la vida
Estado estacionario
Dra. Susana Puntarulo
susanap@ffyb.uba.ar
TEMARIO CLASE TERICA I
1. Gases: Ecuacin de estado
2. Termodnmica: Primera y Segunda Ley
3. Esterilizacin por calor hmedo: aspectos
fisicoqumicos, caractersticas del vapor de agua
4. Esterilizacin fra: aspectos fisicoqumicos,
mecanismos de accin mediados por radicales
libres del oxgeno
Requisitos para seleccionar mtodos de esterilizacin
1. Que permita el empleo de una temperatura de trabajo
semejante a la temperatura ambiente.

2. Que permita el empleo de acondicionamiento previo
del material a utilizar.

3. Que no produzca alteraciones inadmisibles en el
material.

4. Que se pueda esterilizar el material ya envasado.
La esterilizacin por calor hmedo es confiable
por tres caracteristicas del vapor de agua
T y P del cambio de estado muestran una correlacin
doble: Ec. de Clausius-Clapeyron

El elevado valor de AH de condensacin

La diferencia entre los volmenes molares del estado
gaseoso y lquido
AUTOCLAVE SIMPLE
OLLA A PRESIN
Vlvula Manmetro
Tapa
Cmara
Recipiente
interior
Agua
Tapa de vlvula
Atmospheric pressure
1 atm = 14 psi
Constant pressure
P =1atm
Constant volume

Vapour escape to
mantain the pressure
Constant volume

P
V
= P
ext
= 1 atm P
V
= P
ext
> 1 atm
P
ext
= P
atm
= 1 atm P
ext
=P
atm
+P
lid
>1 atm
P
ext
=P
atm
+P
lid
>1 atm
P
ext
=P
atm
+P
lid
>1 atm
P
V
= P
ext
> 1 atm P
V
= P
ext
> 1 atm
*
*
Constant pressure
P > 1 atm
AUTOCLAVE SIMPLE
OLLA A PRESIN
Calor de vaporizacin del agua: 40.6 kJ/mol
Sistema
- 40.6 kJ/mol
Entorno


Sudoracin
H
2
O(l) H
2
O(g)
Sistema
+ 40.6 kJ/mol
Entorno

Esterilizacin
por vapor
H
2
O(l) H
2
O(g)
Mecanismo de destruccin de
microorganismos
Bacteria
+ 40.6 kJ/mol
Cmara
T= cte
Esterilizacin
por vapor
H
2
O(l) H
2
O(g)
El calor cedido a los microorganismos produce
la coagulacin de las protenas celulares y otros
procesos deletreos
Diferencia de volmenes molares
Bacteria
+ 40.6 kJ/mol
Cmara
T= cte
Esterilizacin
por vapor
H
2
O(l) H
2
O(g)
Vm H
2
O
(g)
= 15 litros (a 121C y 202 kPa)
Vm H
2
O
(l)
= 0.018 litros (a 20C y 101 kPa)
El vapor debe entrar en contacto con el
material a esterilizar

1. No se pueden esterilizar por este medio ampollas
con contenido anhidro o soluciones oleosas.

2. Cuando se llenan las ampollas o los frascos hay que
tener en cuenta la dilatacin del lquido y la dilatacin
del aire del espacio muerto para que no estallen.

3. No resisten bien los frascos con tapas de goma con
sellos de aluminio, ni las jeringas prellenadas, o latas.
Dra. Susana Puntarulo
susanap@ffyb.uba.ar
TEMARIO CLASE TERICA I
1. Gases: Ecuacin de estado
2. Termodnmica: Primera y Segunda Ley
3. Esterilizacin por calor hmedo: aspectos
fisicoqumicos, caractersticas del vapor de agua
4. Esterilizacin fra: aspectos fisicoqumicos,
mecanismos de accin mediados por radicales
libres del oxgeno
Gases esterilizantes: condiciones ideales
(Russell)
1. Alta actividad microbicida.
2. Cintica de inactivacin microbial que permita predecir el
proceso de esterilizacin.
3. Capacidad de controlar todas las variables.
4. Capacidad de penetrar en los empaques.
5. Compatibilidad con un amplio rango de materiales.
6. Ausencia de residuos en productos esterilizados.
7. Temperatura de trabajo inferior a 65C.
8. Inocuidad para el operador, facilidad para transporte,
almacenamiento y aprovisionamiento.
9. Tiempo de procesamiento breve.
10. Bajo costo.
Esterilizacin fra, esterilizacin qumica fra,
esterilizacin por gases
1. Se desarrollaron para esterilizar materiales que no
resisten el calor hmedo o las radiaciones ionizantes

2. Implican el uso de gases

3. Se clasifican de acuerdo a su mecanismo de accin en:

Alquilantes: xido de etileno, formaldehdo.

Oxidantes: Acido peractico, perxido de hidrgeno, ozono
Radicales libres
Especies activas
Reacciones de generacin
Efectos fisiolgicos
Aplicaciones en procesos de esterilizacin
radiacin UV
esterilizacin qumica fra por perxido de hidrgeno
esterilizacin qumica fra por perxido de hidrgeno
ms vapor
esterilizacin qumica fra por perxido de hidrgeno
en plasma

Radicales libres


Se entiende por Radical Libre a toda especie
de existencia independiente con al menos
un electrn desapareado.
Tipos de radicales libres
Radicales libres del oxgeno
anin superxido
radical hidroxilo
Radicales del carbono
radicales alquilo
Radicales del nitrgeno
xido ntrico
Otras especies activas
Perxido de hidrgeno
alta constante de permeabilidad en membranas
biolgicas
Oxgeno singulete, carbonilos excitados
emiten energa al volver al estado fundamental
complejos ferrilos y perferrilos
pueden intervenir en la iniciacin de cadenas de
oxidacin lipdica
Tiempo de vida media de algunas especies reactivas


Radical libre Vida media

HO
.
10
-9
s
RO
.
10
-6
s
1
O
2
10
-5
s
ONOO
-
0.05-1 s
NO
.
1-10 s
ROO
.
7 s
Q
.-
(tar) das
Formas en que existe el oxgeno

1. Ozono (O
3
): principalmente en altitud

2. Oxgeno monoatmico (O): forma transiente reconocida
en qumica atmosfrica

3. Dioxgeno (O
2
)

Perdiendo e
-
O
2
e - +
O
2
+


dioxigenilo radical
Ganando e
-
O
2
-
;

H
2
O
2
;
.
OH ; H
2
O

Reacciones que generan radicales libres del oxgeno
I. O
2
-
Autooxidacin de molculas de bajo peso molecular
Reacciones enzimticas
Transporte mitocondrial de electrones

II. H
2
O
2
Dismutacin de O
2
-

Doble reduccin directa de oxgeno molecular

III.

OH Reaccin de Haber Weiss

Reaccin de Fenton
Reaccin de Fenton
Fe
2+
+ H
2
O
2
Fe
3+
+ HO
-
+ HO

Reaccin de Haber-Weiss
O
2
-
+ Fe
3+
Fe
2+
+ O
2

Fe
2+
+ H
2
O
2
Fe
3+
+ HO
-
+ HO

O
2
-
+ H
2
O
2

O
2
+ HO
-
+ HO

Se producen radicales libres del oxgeno en condiciones
fisiolgicas?
2 a 4 % del oxgeno es metabolizado a especies reactivas del
oxgeno en condiciones fisiolgicas
Se generan en mitocondria, retculo endoplsmico, peroxisomas
y como resultado de la actividad de enzimas citoslicas
Dnde son producidas las especies activas del oxgeno a
nivel celular?
Radiaciones ultravioletas (UV)
Radiaciones UV producidas artificialmente
en la regin de 253,7 nm se han usado para el
mantenimiento de las reas aspticas. Valor
limitado como agente esterilizante.

Inactivacin de microorganismos depende de
la dosis de energa. Vara con el sistema
biolgico.

Mecanismo de accin: generacin de
dmeros de timina en el DNA y oxidaciones.

Radiaciones ultravioletas (UV)
Resistencia:
Formas vegetativas: formas ms susceptibles
Esporas bacterianas : 3 a 10 veces ms resistentes.
Esporas fngicas: 100 a 1000 veces ms resistentes

Requerimientos para la esterilizacin:
Esporas bacterianas en superficies de acero inoxidable:
800 W. min.cm
-2
Esporas negras de Aspergillus niger:
5000 W. min.cm
-2


- Util como mtodo germicida auxiliar.
- Desventajas:
penetracin limitada.
necesidad de empleo en material limpio y
libre de restos que puedan proteger a los
microorganismos.
Microorganismos que poseen capacidad de
reparacin de los daos al DNA mediante
fotoreparacin y reparacin oscura.
Radiaciones ultravioleta (UV)
Dao a protenas
Determinacin de contenido de grupos carbonilos
Determinacin de disulfuros

Determinacin de bases modificadas (oxodG)
Dao a DNA
Dao a lpidos
Determinacin de sustancias reactivas al cido tiobarbitrico
ESTERILIZACIN QUMICA FRA
Usos:
Se emplea para productos o componentes de
plstico que no toleran las condiciones de
esterilizacin por calor hmedo o seco

Sustancias:
Se emplean gases y vapores con propiedades
germicidas: xido de etileno, xidos de
propileno, formaldehido, betapropiolactona,
perxido de hidrgeno, cido peractico, etc.

Perxido de hidrgeno H
2
O
2

(Russell)


Lquido incoloro
Sus productos finales son inocuos (H
2
O y O
2
)
Se ha usado como lquido, vapor y plasma
Perxido de hidrgeno
H
2
O
2
Producto lquido a temperatura ambiente
Puede vaporizarse y el gas resultante es un
agente esterilizante efectivo para materiales
envasados y equipos utilizados en el
procesamiento de materiales estriles
Uso frecuente: esterilizacin de aislantes (barreras,
Ambientes controlados, etc.)

Los aislantes se utilizan para:
pruebas de esterilidad,

transporte de productos esterilizados desde unidades
de calor hmedo y calor seco hacia reas estriles.
procesamiento de aislantes y suministros

El H
2
O
2
se utiliza para:

la esterilizacin de equipos de procesamiento
como secadores por congelacin y lneas de llenado
esterilizacin de salas limpias pequeas
Perxido de hidrgeno ms vapor
Combinacin de calor hmedo ms H
2
O
2
para aumentar la eficiencia
Ventajas:
a) los ciclos de tiempos ms breves
b) mejor remocin del perxido residual
c) permite la exposicin a presin atmosfrica
d) el equipo para el suministro de aire puede hallarse
fuera del rea de procesamiento
Proceso
Temperatura del rea de procesamiento: 80C mediante
la introduccin de aire seco calentado por filtros HEPA

Introduccin del vapor lleva la temperatura a 100C.
Durante el ciclo de vapor se introduce el perxido de
hidrgeno que es transportado por el vapor

Al completar el ciclo se reemplaza la introduccin de vapor
y perxido de hidrgeno reanudando la de aire seco calentado
para secar y limpiar los residuos
Introduccin de aire fro para que alcance la temperatura
deseada.
PLASMA
Es el cuarto estado de la materia
A medida que se adquiere energa (calor) se transforma
secuencialmente de slido a lquido a gas y a plasma
Cuando a un gas se le aplica una gran energa se vuelve un
plasma, con elementos ionizados (con cargas compensadas)
2H
2
O
2

2H
2
O + O
2

Energa de
alto voltaje
Plasma
(e- + iones)
Radicales libres
y
especies excitadas
Aceleracin
y colisin
H
2
O
2
resulta
muy eficiente:
1. Necesita baja energa
para generar radicales
libres.
2. Las especies
formadas son las ms
reactivas.