CLONACIN Y

TRANSGNESIS
ANIMAL
Clonacin
Referencias
Aplicaciones
Animales transgnicos
Agrobiotecnologa
Animales
transgnicos
Sumario
Clonacin en distintas especies
Clonacin
Agrobiotecnologa
Animales
transgnicos
En los animales, la clonacin se basa en el
uso de la tcnica de transplante nuclear.
Mediante esta tcnica, una clula donante
. del individuo a clonar se transfiere a un
. ovocito previamente enucleado.
TRANSPLANTE NUCLEAR
La clonacin
consiste en
la produccin
de individuos
genticamente
idnticos
Agrobiotecnologa
Animales
transgnicos
ovocito embrin sinttico
clula donante
Enucleacin Electrofusin
Para la clonacin de bovinos suele partirse de clulas fetales como donantes del
material gentico. Los ovocitos pueden provenir de animales sacrificados para
consumo ya que slo aportan el ADN mitocondrial. El embrin obtenido en cultivo
debe ser luego transferido a una hembra receptora para completar su desarrollo.
Clonacin reproductiva de bovinos
Clulas donantes
Clulas fetales

- La vida media es de 35 divisiones celulares.
Ello permite su manipulacin gentica.
- La tasa de divisiones de 1,3 divisiones por da.
- Son muy sensibles a la inhibicin por contacto.
- Se desarrollan en mayor proporcin.
Clulas adultas

- La vida media es de 20 divisiones celulares.
- La tasa de divisiones de 0,8 divisiones por da.
- Son muy sensibles a la inhibicin por contacto.
- Se desarrollan en menor proporcin.
cortar el tejido
explanto
OVOCITOS MADUROS OVOCITOS INMADUROS
Los ovocitos obtenidos de
ovarios de animales
sacrificados para consumo
deben ser madurados in vitro.

La maduracin consiste en el
avance de la divisin meitica
hasta la metafase II.

En este estado se observa la
extrusin del primer cuerpo
polar.
Ovocito
recipiente
Agrobiotecnologa
Animales
transgnicos
Expansin de las
clulas del cmulus
24 hs
Primer cuerpo polar
Para implementar la tcnica de transplante nuclear se
requiere disponer de micromanipuladores y de un
microscopio con accesorios para visualizar fluorescencia.
Gentileza de Biosidus S.A.
Transplante
nuclear
Agrobiotecnologa
Animales
transgnicos
Gentileza de Biosidus S.A.
Transplante nuclear
Ovocito en MII Enucleacin
Clula donante Transplante nuclear
Gentileza de Biosidus S.A.
Fusin celular
Activacin
Post - fusin
Post - activacin
Desarrollo
e mbrionario
y p reez
Aplicaciones
de la
clonacin
Agrobiotecnologa
Animales
transgnicos
La clonacin reproductiva tiene distintas
aplicaciones en biotecnologa animal.

- Clonado con fines agropecuarios

- Clonado de animales de zoolgicos
y mascotas

- Clonado para introducir modificaciones
genticas

La clonacin teraputica se aplica en medicina
humana.
Clonacin en distintas especies
Agrobiotecnologa
Animales
transgnicos
Clonacin en ovinos
El primer mamfero clonado a partir de una clula somtica
fue una oveja, la ahora mundialmente conocida Dolly.
Tomado de: http://www.roslin.ac.uk/imagelibrary/
Tomado de: Hill et al., Biol. Reprod., 2000.
Uno de los
primeros bovinos
clonados fue
Second chance
Clonacin
de bovinos
Agrobiotecnologa
Animales
transgnicos
Pampa fue la primera ternera nacida por clonacin
a partir de fibroblastos fetales en Argentina
Clonacin
de bovinos
Agrobiotecnologa
Animales
transgnicos
Gentileza de Biosidus S.A.
A pesar de que su dueo invirti ms de
3 millones de dlares en ello, Missy
muri en 2002 sin haber sido clonada.
Clonacin
de
mascotas
http://www.missyplicity.com
Agrobiotecnologa
Animales
transgnicos
Clonacin
de
mascotas
Agrobiotecnologa
Animales
transgnicos
http://www.savingsandclone.com/clients/our_latest_clones.html
Clon de
Little Gizmo
Clon de
Rainbow


Clon de
Peaches
Tomado de: Poleiaeva et al., Nature, 2000.
Cerdos clonados obtenidos por transferencia
nuclear de clulas somticas de un animal adulto
El clonado de cerdos requiri
modificar la tcnica habitual
de transplante nuclear.
Tomado de: Meng et al., Biol. Reprod.,1997.
Clonacin
de primates
Agrobiotecnologa
Animales
transgnicos
Neti y
Ditto
La clonacin reproductiva carece de
justificacin mdica.

Su aplicacin masiva es totalmente
improbable en las condiciones actuales
Clonacin
de humanos?
Agrobiotecnologa
Animales
transgnicos
Clonacin teraputica
La denominada clonacin teraputica permite generar
tejidos de reemplazo a partir de clulas del paciente.
Ovocito (donado)
Tejido normal
(ej. fibroblastos)
Transplante nuclear
Embrin (?) sinttico
Clulas embrionarias
(pluri o totipotenciales)
Factores de crecimiento
Matriz extracelular
Clulas precursoras del
tejido daado
Autotransplante
Animales transgnicos
Agrobiotecnologa
Animales
transgnicos
Un animal transgnico es aquel que tiene una
porcin de ADN forneo en su genoma.
Animales
transgnicos
Agrobiotecnologa
Animales
transgnicos
Hembra superovulada Macho frtil
X
Inyeccin con ADN
forneo
Promotor
Colecta de
embriones
Implantacin de los embriones
en hembras seudopreadas
Extraccin del ADN y deteccin de la
presencia del transgen
Cras
Hembra superovulada Macho frtil
X
Inyeccin con ADN
forneo
Promotor
Colecta de
embriones
Implantacin de los embriones
en hembras seudopreadas
Extraccin del ADN y deteccin de la
presencia del transgen
Cras
- Los primeros animales transgnicos producidos fueron
ratones, obtenidos mediante microinyeccin de cigotas
Elementos
requeridos
en una
construccin
gentica
Agrobiotecnologa
Animales
transgnicos
exones
ADN copia
Promotor original del
gen a expresar
ADN
genmico
intrones
ARN
mensajero
intrn
Promotor regulable
o tejido especfico
Gen
recombinante
Agrobiotecnologa
Animales
transgnicos
La tcnica de
microinyeccin
de cigotas
resulta muy
poco eficiente
en bovinos
Microinyeccin de cigotas bovinos
Eficiencia en la produccin de animales
Transgnicos por microinyeccin
Cigotas microinyectadas 2.800
Sobreviven la microinyeccin 2.500
Embriones transferidos a receptoras 250
Preeces 50
Terneros transgnicos 1
La introduccin de genes por transfeccin y posterior
seleccin de clulas totipotenciales permite producir
animales transgnicos con muy alta eficiencia.
Agrobiotecnologa
Animales
transgnicos
Clonacin y
transgnesis
Gentileza de Biosidus S.A.