TUTORIAL

PARA HACER
PRUEBAS DE
SIMPLATE
 MATERIAL
NECESARIO
 Charolas
 Reactivos
 Agua estéril (10 ml aprox. por reactivo y 90 ml por
muestra)
 Pipetas Estériles de 1 ml (1 por muestra y 1 por cada
suplemento que se le vaya a agregar)
 Pipetas Estériles de 10 ml (1 por cada tipo de reactivo
que se vaya a usar)
 Mechero de Alcohol (En caso de que el cliente no tenga
uno en la planta)
 Sanitizante (Yodo 1% , Etanol 70%)
 Encendedor o cerillos
Lámpara de Luz UV (En caso de que sea Simplate Col y
E. coli o se haya adicionado Suplemento V al Simplate
Hongos y Levaduras)
 Suplemento A (Antiburbujas)
 Suplemento V (En caso de que la muestra sea Jugo de
Naranja sin diluir que contenga Vitamina C o para alimento
seco para mascotas, para Hongos y Levaduras)
Suplemento M (En caso de que la muestra sea carne
cruda o especies, para Hongos y Levaduras)
 PREPARACIÓN DE LA
MUESTRA

1. Pesar 10 g o medir 10 ml de la muestra.

2. Agregarlos a 90 ml de agua estéril.
3. Mezclar bien.
 PROCEDIMIENTO DE LA
PRUEBA
PRUEBA
SENCILLA
1. Limpiar muy bien la superficie de trabajo con un
sanitizante
2. Prender mechero para tener condiciones asépticas
3. Hidratar el reactivo con 9 ml de agua estéril.
4. Agregar 0.1 ml de Suplemento “A” (Antiburbujas) al
tubo con reactivo hidratado.
5. Mezclar bien.
6. En caso de que sea Simplate para Hongos y
Levaduras y la muestra sea Jugo de Naranja sin
diluir que contenga Vitamina C o alimento seco para
mascotas se adiciona 0.1 ml de Suplemento “V” al
tubo con reactivo hidratado. Si la muestra es carne
6. Agregar 1 ml de la muestra en el
centro de la charola.

7. Agregar la mezcla del reactivo

con el/los suplementos a la charola.

8. Cerrar la tapa, suavemente

mover la charola en forma circular
para distribuir toda la mezcla
muestra/reactivo por todos los
pocillos.
9. Inclinar la charola hacia usted
para permitir que la esponja
absorba el líquido.
 PROCEDIMIENTO DE LA
PRUEBA
PRUEBA
MÚLTIPLE
1. Limpiar muy bien la superficie con sanitizante
2. Prender mechero para tener condiciones asépticas
3. Hidratar el reactivo con 90 ml de agua estéril.
4. Agregar 0.9 ml de Suplemento “A” (Antiburbujas) al
frasco con reactivo hidratado.
5. Mezclar bien.
6. En caso de que sea Simplate para Hongos y
Levaduras y la muestra sea Jugo de Naranja sin
diluir que contenga Vitamina C o alimento seco para
mascotas se adiciona 0.9 ml de Suplemento “V” al
tubo con reactivo hidratado. Si la muestra es carne
cruda o especies agregar 0.9 ml del Suplemento
“M”.
6. Agregar 1 ml de la muestra en el
centro de la charola.

7. Pipetear 9 ml + 0.2 ml de
reactivo hidratado en la charola.

8. Cerrar la tapa, suavemente

mover la charola en forma circular
para distribuir toda la mezcla
muestra/reactivo por todos los
pocillos.
9. Inclinar la charola hacia usted
para permitir que la esponja
absorba el líquido.
 INOCULACIÓN
DIRECTA
Para efectos de muestra a los clientes, hemos
implementado un método de “Inoculación Directa”
en la charola.
Ésta consiste en inocular algunos posillos con un
hisopo estéril empapado con una solución de buffer
neutralizante y con bacterias específicas para cada
prueba.
Un tubo con Coliforme Totales y
E. Coli, otro con Bacterias para
Cuenta Total y otro con Hongos y
Levaduras. Cuent Col y Hongos y
a E. Levaduras
Total coli
Esto con el fin de que el cliente
pueda ver el cambio de color en
vivo y no en foto como se hace la
mayoría de las veces.
11. Incubar a:

a) Coliformes y E. coli: 35 + 1 °C por 24-28

hrs.

b) Cuenta Total: 35 + 2 °C por 24 hrs

c) Hongos y Levaduras: 22-25 °C por 48-72

hrs
 INTERPRETACION DE
RESULTADOS
• Después de incubar, observe el cambio de color
del líquido en los pocillos.

• No le ponga atención a las partículas presentes.

• Cuente el número de pocillos que tengan un

cambio de color con respecto al color base.

• El reactivo originalmente es morado y hay que

contar los pocillos que cambien a color rosa o
cremita.
NOTA: Para las pruebas de Coliformes y E. coli
se cuentan los pocillos que cambian de color
y eso indica la presencia de Coliformes
Totales y con una lámpara de luz UV (con
longitud de onda de 366 nm) de 15 a 20 cm
arriba de la charola, y los pocillos que
produzcan una fluoresencia azul indican la
presencia de E. coli.

NOTA: Para las muestras que contengan

suplemento V, cuente solo el número de
pocillos que presente fluoresencia azul con la
lámpara de luz UV.
 CAMBIA A
COLOR ROSA

COLOR
MORADO
ORIGINAL
POCILLOS
FLUORESCENT
ES
12. Cuente los
pocillos
positivos, es
decir, los que
cambiaron de
color.
13. Determine el
número total de
microorganismos
por charola con
ayuda de la
Tabla de
Conversión
Simplate.
14. La tabla te
da los resultados
Para cualquier duda o aclaración
favor de comunicarse con el
Soporte Técnico de Serco
Comercial con el
Q.B.P. Mauricio Castillo
Galván al
Tel (01 81) 83 43 12 14 Ext. 210
o escribir al e-mail:
Mauricio_castillo@serco.com.mx