ANTICOAGULANTES

UNIVERSIDAD CENTRAL DEL

ECUADOR
ESCUELA DE TECNOLOGA MEDICA
AREA : LABORATORIO CLINICO

Lic.Mercedes Tapia .
MSc. en Ciencias de Laboratorio
Clnico.


ANTICOAGULANTES


En medicina y farmacia, un anticoagulante es
una sustancia endgena o exgena que interfiere
o inhibe la coagulacin de la sangre, creando un
estado prohemorrgico.
Anticoagulantes

Sangre total (hemograma)

Plasma (hemostasia)
Los anticoagulantes deben:
Respetar la morfologa eritrocitaria
No alterar el tamao
No producir hemlisis
Evitar la agregacin plaquetaria
Asegura la conservacin de los elementos
formes por 24 horas si se mantiene a 4C
Inhibir el crecimiento microbiano
Anticoagulantes
Eleccin/de acuerdo a la determinacin
Proporcin adecuada (sangre-
anticoagulante)
Actan fijando Ca
2+
(excepto heparina-
inhibe la accin de la trombina)

Sangre anticoagulada/procesamiento
rpido (se deteriora con facilidad incluso a
4C)

Anticoagulantes

De acuerdo a las determinaciones a realizar:

Recuentos celulares: EDTA preferentemente
ERS y pruebas de coagulacin: citrato trisdico
Bancos de Sangre: fundamentalmente ACD

Anticoagulantes
EDTA - Autoanalizadores
Sal (C10H16N2O8) o sal disdica, dipotsica o tripotsica (Na o K)
Acta como quelante sobre el Ca
2+
, al fijarse impide la coagulacin.
Recuento (GR, GB, plaquetas) y determinacin de hemoglobina
El ICSH (International Council for Standardization in Hematology)
recomienda- sal dipotsica (1,5+0,25 mg/ml de sangre)/ ms soluble
(1650 g/l) que la sal disdica (108g/l)
Exceso EDTA-cambios degenerativos en GR (crenados), GB y
plaquetas




Anticoagulante
EDTA
Frotis sanguneo hasta 2 hs. despus de la
extraccin de la muestra.
Impide la aglutinacin de las plaquetas.
Una mayor cantidad de anticoagulante,
disminuye Hto.
Un exceso de sangre con relacin al
anticoagulante, forma de microagregados.
HEPARINA SDICA
o ( HEPARINA DE LITIO)
Anticoagulante fisiolgico.
Neutraliza trombina.
Proporcin utilizada: 10-20 IU /ml de sangre
No altera el tamao de GR y GB
Utilidad.
Hto, Hb, CGR, CGB
No se utiliza:
Extendidos de sangre-MGG (fondo de azul)
Recuento GB (agregacin)
Pseudovacuolizacin celular.

CITRATO DE SODIO
Citrato trisdico (32 g/l)
Acta impidiendo que el calcio se ionice, evitando as la
coagulacin.
Pruebas de Coagulacin: 9 vol. Sangre/ 1 vol. Citrato.
(0,5 mL de anticoagulante para 4,5 mL de sangre total).
ERS: 4 vol. sangre/1 vol. Citrato (MTODO DE
WESTERGREN).

No se utiliza:
Modifica la morfologa celular.


TRANSFUSION
ACD (Acido-citrato-dextrosa)
CPD (Citrato-fosfato-dextrosa)
Anticoagulante: Acido Ctrico 0.9 g, Citrato disdico
2 g, Dextrosa 2 g, H2O destilada 120 ml
Proporcin utilizada: 4 vol. de sangre/ 1 vol. de
ACD
En Bancos de Sangre
(conservar unidades de sangre) 21 das .
Estudios metablicos eritrocitarios por permitir una
buena conservacin de los hemates. ACD



Efecto de la conservacin de
las muestras con
anticoagulante (EDTA)
Alteraciones morfolgicas


Alteraciones cuantitativas
Alteraciones morfolgicas
Glbulos blancos
Hasta 1 h a t.a. (18-25C)
A las 3 hs a t.a. / cambios / tipos celulares distinguibles
A las 12-18 hs a t.a./ cambios muy importantes:
Polimorfonucleares: ncleo- color homogneo, lbulos
separados, vacuolas citoplasmticas, borde celular indefinido
Clulas mononucleares: vacuolas en el citoplasma, ncleo-
lobulacin irregular
Linfocitos: ncleo lobulado, con coloracin homognea,
vacuolas en citoplasma
Alteraciones morfolgicas
Glbulos rojos
A las 6 hs a t.a. /cambios no apreciables
> 6 hs a t.a./ aumenta la presencia de glbulos crenados y
esfricos


Todos los cambios se retrasan si se
conserva la sangre a 4C

Alteraciones Cuantitativas
(t.a.)
GR: tamao/VCM / fragilidad osmtica
ERS
GB: paulatinamente el recuento
Plaquetas : paulatinamente el recuento
Reticulocitos: sangre EDTA/ su valor a las 6 hs
aprox.
Hemoglobina: inalterada-varios das /evitar
contaminacin
ERS: dentro de las 2 hs
Estabilidad de las muestras
Efectos de almacenamiento sobre la
morfologa de las clulas sanguneas
Realizar las extensiones tan pronto como sea posible.
Norma Aceptable un retraso de hasta 3hs.
BIOMETRIA HEMATICA O
HEMOGRAMA

Extendido


Sangre sin anticoagulante
preferentemente ( con
anticoagulante se pueden
observar alteraciones
morfolgicas)



Un extendido as obtenido poseer tres reas de
diferente espesor y con distribucin distinta de
leucocitos:
Zona excesivamente gruesa (cabeza). : se encuentra en
la regin inmediata al punto de partida de la extensin .
aumento de linfocitos.
Zona excesivamente fina (cola), : final de la
extensin.Aumento Granulocitos y Monocitos.
Zona ideal: (cuerpo), Reparto Equilibrado de clulas.
Extensiones sanguneas realizadas en
portaobjetos.
FROTIS DE SANGRE POR GOTA GRUESA

Deteccin de Malaria.

Los frotis de gota gruesa es una capa gruesa de
eritrocitos deshemoglobinizados (lisados)

Colocar una gota de sangre de 3mm de dimetro en el
centro un portaobjetos.

Dejar secar unos 25 a 30 min.

Colorear con WRIGHT , MAY - GRNWALD-
GIEMSA

COLORACIN DEL FROTIS DE SANGRE
SEGN WRIGHT ,MAY - GRNWALD-
GIEMSA
Fijacin : alcohol metlico - Facilitar la conservacin y la
fijacin de las clulas

FUNDAMENTO
los mtodos empleados para teir las clulas emplean la eosina y
azul de metileno.
son sensibles a las variaciones de pH de las diferentes estructuras
celulares.
Las que tienen carcter bsico fijan en mayor medida la eosina
(colorante cido),
Las que poseen propiedades cidas fijan principalmente el azul
de metileno (colorante bsico).
Ciertas estructuras basfilas presentes en el ncleo (nuclolo)
o en el citoplasma (ribosomas) se coloreen de azul,
componentes acidfilos como la hemoglobina adquieren color
rosado.

Polimorfonucleares
Neutrfilos Eosinfilos Basfilo

La diferente afinidad de ciertas granulaciones
citoplasmticas por dichos colorantes:

polimorfonucleares : neutrfilos, en los que la
granulacin especfica posee compuestos neutros son
fijados por ambos colorantes , dando un color pardo;
eosinfilos, granulacin especfica de carcter bsico
que fijan fundamentalmente los colorantes cidos rojo
naranja;
basfilos, granulacin especfica de carcter cido, que
fijan colorantes bsicos dando un color azul oscuro.
Reactivos
Solucin May Grnwald: eosinato de azul de
metileno en metanol.
Solucin Giemsa: azul de metileno (clorhidrato
de tetrametiltionina), su derivado oxidado en
medio alcalino (el azur II), y eosina
(tetrabromofluorescena).
Solucin Wrigth: policromado de azul de
metileno en solucin alcalina.
PROCEDIMIENTO
Cubrir el frotis de sangre seco con solucin May
Grnwald.
Dejar 3 minutos. A continuacin, inclinar y
cubrir el preparado con una solucin de Giemsa,
obtenida a razn de dos gotas del colorante por
ml de agua. Dejar 10 minutos. Lavar con agua ,
limpiar la cara inferior del portaobjeto con un
algodn y secar al aire.


Causas potenciales de frotis de sangre teidos de
manera inapropiada.
Aspecto Causa
Excesivamente azul u oscuro Tincin prolongada
Lavado inadecuado
Alcalinidad demasiada alta del colorantes
O del amortiguador o ambos
Excesivamente claro o rosado Frotis de sangre grueso
Tincin insuficiente
Lavado prolongado
Acidez demasiado alta del colorante o del
amortiguador o ambos
Presencia de precipitado Portaobjetos no limpios
Desecacin durante el proceso de tincin
Filtrado inadecuado del colorante

Bibliografa
http://pathy.med.nagoya-
u.ac.jp/atlas/doc/atlas.html (Nagoya University)
http://www.wadsworth.org/chemheme/heme/mi
croscope/celllist.htm (Wadwordth
Laboratory)
McKenzie, Shirlyn B, et al 2000 Hematologa
Clnica, 2 da Edicin. Mxico
Dacie y Lewis , 2008 Hematologa Prctica, 10
edicin, Elsiever Espaa