CULTIVO

DE LOS
VIRUS
INTRODUCCION
Muchos virus pueden desarrollarse en cultivos celulares
o en huevos frtiles en condiciones estrictamente
controladas. Sigue recurrindose al crecimiento de los
virus en animales para el aislamiento primario de
algunos de ellos, y para los estudios de la patogenia de las
enfermedades virales y de la oncognesis viral. En los
laboratorios de diagnstico se intenta recuperar a los
virus de las muestras clnicas para establecer los aspectos
etiolgicos de las enfermedades. En los laboratorios de
investigacin se cultivan virus como base de los anlisis
detallados de la expresin y la replicacin virales. La
disponibilidad de clulas desarrolladas in vitro ha
facilitado la identificacin y el cultivo de virus recin
aislados y la caracterizacin de los que ya se conocan.
OBJETIVOS:
Objetivo General:
Establecer de manera en general
sobre el cultivo de virus.

Objetivos especficos:
Aprender como se preparan el cultivo
de virus.
Conocer el beneficio del cultivo de
virus a nivel del laboratorio.

Virus de la inmunodeficiencia humana

RNA
CUBIERTA
VIRAL
NUCLEO
Hay tres tipos bsicos de cultivos

1.Cultivo primario: se elaboran al
dispersar las clulas de los tejidos recin
retirados
2.Cultivos secundario: Las clulas han
sufrido un cambio que permite su cultivo
limitado y tienen el mismo patrn
gentico.
3.Cultivos terciarios: son cultivos
capaces de crecimiento mas prolongado,
en estos su gentica su gentica es
alterada

CULTIVO DE LOS VIRUS
1.ANIMALES
EXPERIMENTALES.
2.TCNICAS DE CULTIVO EN
EMBRIN DE POLLO.
3.TCNICAS DE CULTIVO
CELULAR


1. ANIMALES EXPERIMENTALES

a) Siempre ha sido importante en
virologa
b) Es un medio para aislar y
desarrollar a muchos de los virus
c) Pero la tica sobre el buen trato
hacia los animales ha sido un
problema (financiamiento,
aceptacin de artculos en las
publicaciones etc.)

d) Solo bajo las siguientes circunstancias:
Virus que no puedan replicarse en embriones de pollo
o en cultivos celulares. Para el estudio de la
patognesis de la enfermedad y es aqu donde es de
gran utilidad.
En casos de investigaciones epidemiolgicas.
Para atenuar virus de humanos: Virus de la fiebre
amarilla, virus Vaccinia.
Para pruebas de seguridad y antigenicidad de vacunas
para obtener las licencias.
Para probar agentes antivirales quimioteraputicos.
En la produccin de anticuerpos policlonales y
monoclonales.
Son fuente de rganos para los cultivos celulares.
Son fuente de sangre (eritrocitos y PMN) para muchas
pruebas.

EJEMPLOS:

PICORNAVIRUS: RABDOVIRUS
Virus de la Fiebre aftosa Virus de la Rabia
RATN LACTANTE. RATN LACTANTE

ADENOVIRUS CANINO
Virus de la Hepatitis Infecciosa Canina (IHC)
CUYES en altas dosis.
PERROS, ZORROS por las vas subcutnea (S/C);
intraperitoneal (I/P);oral; intravenosa (I/V)





CORONAVIRUS
Virus de la Bronquitis Infecciosa Aviaria (BIA)
EMBRIONES DE POLLO
Gastroenteritis Transmisible del Cerdo ((GET)
LECHONES de lactantes a varios das

HERPESVIRUS
Virus de la Rinotraqueitis Infecciosa Bovina (IBR)
CUYES recin nacidos
Rinoneumonitis Equina (ER)
LECHONES de lactantes a varios das
HAMSTERS recin nacidos
Virus de la Enfermedad de Aujeszky (VEA)
CONEJOS; CUYES; RATONES, CABRAS; CABALLOS; PERROS;
Y MUCHOS ANIMALES MAS LOS MAS SUSCEPTIBLES LOS
GATOS



HERPESVIRUS
Virus de la Enfermedad de Aujeszky (VEA)
CONEJOS; CUYES; RATONES, CABRAS; CABALLOS; PERROS; Y
MUCHOS ANIMALES MAS LOS MAS SUSCEPTIBLES LOS GATOS

ORBIVIRUS.
Virus de la Lengua Azul
CORDEROS; RATONES Y HAMSTERS lactantes a varios das
ORTHOMYXOVIRUS
Virus de la Influenza
PORCINA: RATONES Y HURONES: neumona
EQUINA: RATONES Y HURONES: neumona
AVIARIA: POLLUELOS, PATOS: signos respiratorios y
muerte

PAPOVAVIRUS
Virus del Papiloma oral del Conejo : CONEJOS
Virus del Papiloma de Shope: CONEJO COLA DE ALGODN
Virus del Papiloma Bovino: BECERROS
Virus del Papiloma Genital Porcino : CERDOS


2. TECNICAS DE CULTIVO EN EMBRION
DE POLLO:

CARACTERISTICAS DEL HUEVO FERTIL:

1. Raza o lnea de Gallina de postura
(huevo frtil)
a) Plymonth Rock
b) Rhode Island
c) New Hamshire
d) Wyandotte

CARACTERISTICAS DEL
HUEVO FERTIL
a)Cascarn
b)Tiempo de puestos
c)Seleccin
d)Manejo

a) Cascarn
delgado
malformado
NO defectos,
protuberancias,
spero

Al
golpear






Resonancia (+)BUENOS
Resonancia (-) MALOS

b) Tiempo de puestos

Mximo 5 das
Se almacenan


HACIA ARRIBA
A 13C
HUMEDAD 40%


CAMARA DE
AIRE

A LAS 3 HORAS DE
FERTILIZADO EN EL OVIDUCTO
LA YEMA PRESENTA ENTRE 2 Y
4 CELULAS, EL DISCO DELGADO
(GASTRULACION)SE FORMAN
DOS CAPAS:
EXTERNA=ECTODERMO
INTERNA=ENDODERMO
EL BLASTODERMO APARECE
COMO UNA
MEMBRANA FORMADA POR
SEGMENTACIONES SUCESIVAS
SE FORMA UNA AREA
CENTRAL= ZONA PELUCIDA
Y BORDES GRUESOS= AREA
OPACA DE AQU A LA
POSTURA= ES AQU DONDE SE
DETIENE EL PROCESO DE
DIVISION



HACIA ARRIBA
DE 16 A 20C
SE INICIA LA
INCUBACION
VOLTEO DIARIO

C) Seleccin

- Tamao:
UNIFORME
- Forma:
UNIFORME
- Peso: 56 a
65g




HACIA ARRIBA
A 13C
HUMEDAD 40%
CAMARA DE
AIRE

d) Manejo

- Adecuado
- Con mucho
cuidado
- Movimientos
bruscos
la cmara de
aire

HACIA ARRIBA
A 13C
HUMEDAD 40%
CAMARA DE
AIRE


CONDICIONES DE INCUBACION DEL HUEVO
FERTIL:

1. Colocacin con la cmara de aire
hacia arriba
2. Limpieza: solo mecnica, no Con
trapos hmedos ni lavarlos
3. Temperatura: 37.7C +/-1
4. Humedad relativa: 50 a 60C
5. Voltea varias veces al da: de 2 a 8
veces en un ngulo de 45
6. Ventilacin:. Relacin optima: O
2
del
21% y CO
2
del 0.5%


Inoculacin en huevo embrionado

1. EMBRIN
2. CAVIDAD AMNITICA
3. YEMA
4. ALBMINA
5. CAVIDAD ALANTOIDEA
6. CAVIDAD
CORIOALANTOIDEA
7. MEMBRANA
CORIOALANTOIDEA
8. CASCARN
9. CMARA DE AIRE

RUTAS DE INOCULACION EN
EMBRION DE POLLO