BIOLOGIA MOLECULAR

Editado por:
Luz I. RAMIREZ LENGUA
Definicin:
Disciplina cientfica con marcada ten-
dencia programtica e interpretativa.
Se propone explicar los fenmenos
fundamentales de la vida : herencia,
crecimiento, desarrollo, diferencia-
cin, excitabilidad, movimiento, etc.,
mediante la concepcin moderna de
tomo y molcula.
La Biologa Molecular, trata las fun-
ciones de los sistemas biolgicos.
(Freifelder, David).
Francis JACOB (1969), la considera como el
resultado de la fusin de disciplinas :
- Bioqumica
- Gentica
- Microbiologa
- Virologa
- Fisiologa celular,
para interpretar fenmenos que se desarro
llan en el seno de organismos vivos, entre sus
estructuras e interrelaciones funcionales que
se manifiestan dentro de los constituyentes
celulares.
Origen:
Se desarrolla gracias a la convergencia
de acontecimientos:
- Invencin del microcopio electrnico.
- Desarrollo de ramas de la ciencia,
i) Gentica,
ii) Bioqumica,
iii) fisiologa celular.

Objetivo :
Es la elucidacin de la naturaleza de
las transformaciones qumicas y
energticas caractersticas de
los organismos vivos.
MTODOS Y TCNICAS
I. M. de Observacin Directa.
II. M. Generales de Laboratorio.
III M. de Separacin e Identificacin
de Materiales.
IV. M. Inmunolgicos.
V . M. Hidrodinmicos.
VI. M. Espectroscpicos.

1. Microscopia Optica
- De campo claro: diferencia de intensi
dad de la luz entre medio y objeto.
- De campo oscuro: un diafragma oscuro
con un anillo trasparente,permite visua-
lizar y contar partculas pequeas.
- De contraste de fases: permite visuali-
zar gotas de grasa, vacuolas mitocon-
drias, cromosomas, nucleolo.
Mtodos de Observacin
directa
- De interferencia: Se elimina el halo y es
til para mediciones cuantitativas
- De polarizacin: cuenta con un polari-
zador, una platina rotatoria y un ana
lizador. Se observa el fragmoplasto y
estructuras moleculares orientadas.
- De fluorescencia: Compuestos fluores
centes permiten visualizar cidos nu
cleicos, orgnulos pequeos, anti-
cuerpos, e identificar cromosomas.

2. Microscopia Electrnica
Un can de electrones dirigidos por
bobinas magnticas (0.1 nm.)
2.1 Microscopio electrnico de trans
misin TEM. (partc.oro u osmio)
2.2 Microscopio electrnico de
barrido SEM, ms pequeo y
econmico que el TEM.

Mt. Generales de Laboratorio:
1. Medicin de PH (potencial hidrgeno)
2. Marcado y Contaje Radioactivo.
3. Autoradiografa: H
3
, C
14
P
32
, S
35
4. Filtracin por membrana
- de nitrocelulosa
- de fibra de vidrio
- de colodin.
M. De Separacin e
Identificacin de Materiales:
1. Cromatografa : Fase Fija y Fase
Mvil.
- de reparto - cromatografa
- de adsorcin lquida de alto
- de capa fina perfomance.
- de gases (HPCL )
- de afinidad
- de intercambio inico.
- de fase reversa
2. Electroforesis,
Desplazamiento de partculas en un
disolvente mediante un campo elc. trico.
a) Zonal,
b) En bloque :
- En tiras de acetato de celulosa
- En papel
- En gel, en almidn, en poliacrila
mida, en agarosa.

Mtodos inmunolgicos
1. Prueba de fijacin de complemento.
2. Pruebas de inhibicin utilizando la fijacin
de complemento y la aglutinacin pasiva.
3. Pruebas de radioinmunoensayo.
4. Pruebas inmunolgicas con anticuerpos
fluorescentes conjugados con ferritina
para localizar sustancias en molculas,
clulas y tejidos.

Mtodos hidrodinmicos
1. Utracentrifugacin
- Zonal
- En gradiente de densidad.
2. Determinacin del coeficiente de
difusin.
3. Determinacin del volumen especfico
parcial.

Mtodos Espectroscpicos
1. Espectroscopa de absorcin
2. fluorescencia
3. Difraccin de rayos X: revela estructu
ra tridimensional con detalle atmico.
4. Resonancia Magntica Nuclear:
informa la estructura de polmeros bio
lgicos, las interacciones y movimien tos
moleculares y de tomos.