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UNIVERSIDAD NACIONAL

INTERCULTURAL DE LA AMAZONIA

CARRERA PROFESIONAL DE INGENIERA
AGROINDUSTRIAL
DIFERENTES TIPOS DE AGARES
Docente:
Ing. DARWIN JOSUE ESTACIO ALBORNOZ
EXPOSITORES:
o ARBILDO HIDALGO ,Diego A.
o CORIAT RENGIFO ,Ramn I.
o HUAMAN GOMEZ ,Percy H.
o PRETELL PORTOCARRERO ,Luis A.

AGAR NUTRITIVO

El agar nutritivo es un medio de
cultivo usado normalmente como
rutina para todo tipo de bacteria.
Es muy til porque permanece slido
incluso a relativas altas
temperaturas. Adems, el
crecimiento bacteriano en este agar
lo hace en la superficie, por lo que
se distinguen mejor las colonias
pequeas.
El agar nutritivo es una de las
sustancias gelatinosas que se pueden
usar en el fondo de una placa de
Petri.
Siembra
En superficie o por la tcnica de
Pour Plate, segn el uso a que se
destine.
Incubacin
En aerobiosis, a 35-37 C durante
24 horas.

TIPOS DE AGAR NUTRITIVO
AGAR DE SANGRE
El agar de sangre es creado
aadiendo sangre animal a la
solucin de agar, y para
algunos tipos (como el agar de
chocolate), la mezcla es
tratada ms para fomentar
cierto tipo de crecimiento
bacteriano. Recuerda la
sangre fresca o seca se usa
para cultivar una variedad de
microbios. Es til porque la
mayora de organismos
crecern en sangre, pero
tambin porque puede ayudar
a determinar cmo
interaccionan estos
organismos con el cuerpo.
Siembra
Por inoculacin directa del
material en estudio, sobre
la superficie del medio de
cultivo.
Incubacin
El tiempo, temperatura y
atmsfera de incubacin,
dependern del
microorganismo que se
quiera aislar.

AGAR THAYER-MARTIN

Se usa para cultivo de bacterias
respiratorias ejm: haemophilus
influenzae
Siembra
Sembrar inicialmente el material
con hisopo o ansa sobre un tercio
de la superficie de la placa,
estriando el resto de la
superficie para obtener colonias
aisladas.
Incubacin
Incubar las placas a 35-36C en
recipientes con cierre hermtico,
en cmara hmeda y atmsfera
de CO2, durante 18 a 72 h. En la
mayora de los casos se obtiene
un crecimiento precoz y
abundante entre las 18 y las 24
h.

Identificacin
Las colonias de gonococos y
meningococos obtenidas en
este medio selectivo son
usualmente opacas, grisceas,
convexas, de 1-4 mm de
dimetro. Luego de 48 h de
incubacin pueden
transformarse en colonias
mucoides. Coloracin de Gram:
diplococos Gram negativos. Se
sugiere proseguir con este
esquema de identificacin.

AGAR TCBS
TCBS (Tiosulfato-Citrato-
Bilis-Sacarosa,)- agar
enriquecido, permite el
crecimiento de todos las
especies patgenas del
gnero Vibrio spp.


Siembra
Licuar 25 g de la muestra con
225 ml de agua peptonada
Alcalina (B02-159-05, B02-159-
06) e incubar de 6 a 8 horas a
35-37C, en aerobiosis.En todos
los casos sembrar una alcuota
del caldo de enriquecimiento en
la superficie de una placa de
TCBS, por estriado, para el
aislamiento de colonias.
Incubacin
En aerobiosis, durante 18-24
horas a 35-37C.











AGAR BILIS ESCULINA
CON AZIDA
Es usado para
aislar Enterococcus as
como Streptococcus.
Siembra
Sembrar el material en
estudio, en tubo o
placa, segn la
preferencia.
Incubacin
Hasta 3 das, a 35-37
C, en aerobiosis.



AGAR CLED (Agar cistina-
lactosa deficiente en
electrolitos)

Es un medio de cultivo diferencial
para aislar y contar las
bacterias presentes en la orina.
Favorece el crecimiento de los
patgenos y contaminantes
urinarios aunque, debido a la
ausencia de electrolitos, impide la
indebida proliferacin de especies
de Proteus)
Siembra
Comprobar que la placa no contenga
agua de condensacin y luego
sembrar en superficie una alcuota
de orina con una ansa calibrada.
Incubacin
Durante 24 a 48 horas a 35-37 C,
en aerobiosis.


AGAR ENTRICO DE
HEKTOEN
Este es un medio ideal para el
aislamiento selectivo
de Salmonella y Shigella, a
partir de heces y alimentos.

Siembra

Inocular la muestra en superficie,
tratando de extender el inculo
para obtener colonias aisladas.

Incubacin

De 18 a 24 horas a 35-37 C en
aerobiosis. Para diferenciar
mejor entre Salmonella y Shigella
spp., incubar 48 horas.










AGAR MCCONKEY
Este medio se utiliza para el aislamiento de
bacilos Gramnegativos de fcil desarrollo,
aerobios y anaerobios facultativos. Permite
diferenciar bacterias que fermentan
lactosa (L+) de las no fermentadoras (L-) en
muestras clnicas, de agua y alimentos.
Todas las especies de la
familia Enterobacteriaceae se desarrollan
en el mismo. Contiene sales biliares y cristal
violeta, lo que inhibe el crecimiento de
bacterias Gram positivas, lo que convierte
en un medio diferencial poco selectivo.
Siembra
- Sembrar en superficie.
- Utilizando la tcnica de Pour Plate:
sembrar 1 ml de muestra y agregar
aproximadamente 15 ml de medio de cultivo
fundido y enfriado a 45-50 C.
Incubacin
Durante 18-48 horas, a 35-37 C, en
atmsfera aerbica.

AGAR MANITOL SAGADO
Medio de cultivo selectivo y
diferencial, utilizado para el
aislamiento y diferenciacin de
estafilococos. Es recomendado para el
aislamiento de estafilococos
patognicos a partir de muestras
clnicas, alimentos y otros materiales
de importancia sanitaria. Tambin,
este medio puede utilizarse para el
cultivo de especies halfilas de Vibrio,
si no se dispone de medios apropiados
(TCBS Medio, Medio Marino, etc.),
aunque algunas especies pueden no
desarrollar.
Siembra
Sembrar en superficie un inculo
denso de la muestra.
Incubacin
De rutina: durante 18-24 horas a 35-
37 C, en aerobiosis.
La American Public Health Association
(A.P.H.A) recomienda la incubacin
durante 3 das a 32 C, en aerobiosis.

AGAR MUELLER-HINTON
Este medio de cultivo ha sido
recomendado universalmente
para la prueba de sensibilidad a
los antimicrobianos. Adems es
til con el agregado de sangre
para el cultivo y aislamiento de
microorganismos
nutricionalmente exigentes.
Siembra
Hisopado en superficie. El
inculo microbiano depender
del grupo microbiano o
microorganismo en estudio.
Incubacin
La atmsfera, el tiempo y
temperatura de incubacin
dependern del grupo
microbiano o microorganismo
en estudio.


AGAR NZ

El agar nz permite un
diagnostico bacteriolgico rpido
de Salmonella y Shigella Las
colonias son fcilmente
diferenciables de otras entero
bacterias.
Siembra
Disolver 80,31 gramos en 1000 ml
de agua destilada. Calentar hasta
ebullicin para disolver
completamente el medio. No
esterilizar en autoclave. Revuelva
bien antes de verter en placas de
Petri estriles.
Incubacin
16-24 horas a 35C.

AGAR FENILETIL ALCOHOL
Este agar selecciona especies de Staphylococcus mientras inhibe
bacilos gram negativos como Escherichia coli, Shigella, Proteus,
etc.
Siembra
Rehidratar 35.5 g del medio en un litro de agua destilada. Reposar 10
a 15 minutos. Calentar agitando frecuentemente hasta el punto de
ebullicin durante 1 minuto para disolverlo por completo. Esterilizar
en autoclave a 121C (15 lbs de presin) durante 15 minutos. Enfriar
aproximadamente a 45C. Agregar 5% de sangre de carnero estril
desfibrinada en condiciones de esterilidad. Mezclar girando
suavemente el matraz para evitar la formacin de burbujas,
homogeneizar y vaciar en cajas de Petri estriles. Conservar en
refrigeracin de 2 a 8C.
Incubacin
o La mayora de los casos se incuban a una temperatura de 35 a 37
C.
o El tiempo de incubacin debe ser de 72 a 96 horas ya que es tos
microorganismos a diferencia de los aerobios son de crecimiento
lento.
o Se debe evitar la exposicin al aire.

Agar R2A
Un agar inespecfico que imita el agua. Usado para
anlisis del agua.
Siembra
Se puede sembrar mediante las siguientes tcnicas:
Pour Plate:
Inocular 0,1 a 2 ml de la muestra directa o de su
dilucin. Verter un volumen del medio de cultivo
fundido y enfriado a 40-45C. Homogeneizar
mediante movimientos de vaivn y rotacin. Dejar
solidificar.
Diseminacin en superficie:
Inocular un volumen mximo de
0,5 ml de la muestra directa o de su dilucin y
esparcirla en toda la superficie del agar. Verter un
volumen del medio de cultivo fundido y enfriado a
40-45C. Homogeneizar mediante movimientos de
vaivn y rotacin. Dejar solidificar.
Filtracin por membrana:
El volumen a filtrar depender de la probable
contaminacin de la muestra.
Incubacin
La incubacin a 35C por un perodo de 3 - 5
das es recomendado. En la mayora de los
casos, una temperatura de incubacin de 20 28C
por 5 7 das.

AGAR TRIPTICASA SOYA
(TSA)
TSA es una medio multiuso, producido
por la digestin enzimtica de soya y
casena. Es la base de otros tipos de
agar, por ejemplo el agar sangre est
hecha de TSA enriquecido con sangre.
TSA permite crecer muchas bacterias
semifastidosas incluyendo algunas
especies de Brucella,
Corynebacterium, Listeria, Neisseria,
y Vibrio.
Siembra
Por inoculacin directa del material en
estudio, sobre la superficie del medio
de cultivo.
Incubacin
Incubar las placas boca abajo en
condiciones aerobias a 35 + / -2 C
durante 24 - 48h (Bacterias) y para
hongos y levaduras20-25C durante 5
das.

AGAR XILOSA, LISINA,
DESOXICOLATO
Es utilizado para el aislamiento y
diferenciacin de bacilos entricos
Gramnegativos, especialmente del
gnero Shigella y Providencia.
Siembra
Con asa bacteriolgica estril
trabajando siempre a la llama del
mechero, tomar una mnima muestra.
Sembrar suavemente sobre la
superficie tersa del medio por
el procedimiento de agotamiento.
Incubacin
Incubar las placas en posicin invertida
a 37C en aerobiosis atmsfera de
6% de CO. Al trmino de 18 - 24
horas de incubacin examinar el
cultivo y determinar los estudios a
seguir segn las caractersticas
de las colonias.

AGAR CETRIMIDA
Medio utilizado para el aislamiento
selectivo de Pseudomonas
aeruginosa y de otras especies del
gnero Pseudomonas.Agar
Tinsdale contiene telurito de
potasio y puede
aislar Corynebacterium diphteriae.
Siembra
En superficie, por inoculacin
directa de la muestra estriando o a
partir de un caldo de
enriquecimiento.
Incubacin
En aerobiosis, a 35-37 C durante
24-48 horas.

AGAR GLUCOSADO
DE SABOURAUD
El Agar glucosado de Sabouraud es usado
para cultivar hongos y tiene un pH bajo que
inhibe el crecimiento de la mayora de
bacterias, adems tiene un antibitico
(gentamicina) que inhibe especficamente el
crecimiento de bacterias gram negativas.
Siembra
Estriar directamente la superficie del
medio de cultivo.
Incubacin
En aerobiosis a 20-25 C. El tiempo
depender del hongo y levadura que se
quiera recuperar. Como regla general,
incubar en las condiciones descriptas
durante 2 a 7 das. En el caso de investigar
dermatofitos, incubar durante 5 a 20 das
y examinar el cultivo cada 4 a 6 das.










AGAR INFUSIN CEREBRO
CORAZN
Es un medio muy rico en nutrientes, que proporciona un
adecuado desarrollo microbiano. La infusin de cerebro
de ternera, la infusin de corazn vacuno y la peptona,
son la fuente de carbono, nitrgeno, y vitaminas. La
glucosa es el hidrato de carbono fermentable, el cloruro
de sodio mantiene el balance osmtico y el fosfato
disdico otorga capacidad buffer.
Siembra
Directa, sobre la superficie del medio de cultivo por
estra.
Incubacin
El tiempo, la temperatura, y la atmsfera de incubacin,
dependern del microorganismo que se quiera recuperar.
En general se recomienda:
Bacterias de fcil crecimiento:
En aerobiosis, a 35-37 C durante 18 a 24 horas.
Bacterias exigentes en sus requerimientos
nutricionales:
En atmsfera con 5 % de CO, a 35-37 C durante 24-48
horas.
Hongos:
En aerobiosis, a 20-25 C hasta 7 das. Dependiendo del
hongo puede requerirse mayor tiempo de incubacin.

AGAR PAPA DEXTROSA
Es un medio utilizado para el cultivo de
hongos y levaduras a partir de muestras de
alimentos, derivados de leche y productos
cosmticos. Agar extracto de malta. Tiene un
alto contenido de peptona.
Siembra
Rehidratar 39 g del medio en un litro de agua
destilada. Reposar 10 a 15 minutos. Calentar
agitando frecuentemente hasta el punto de
ebullicin durante 1 minuto para disolverlo por
completo. Esterilizar en autoclave a 121C (15
lbs de presin) durante15 minutos. Enfriar
aproximadamente a 45C. Vaciar de acuerdo a
la tcnica a seguir en cajas de Petri estriles.
Cuando se requiera el medio inclinado en tubo,
distribuirlo antes de esterilizar.
Si se acidifica el medio, no sobrecalentar y
fundir solo una vez, para evitar la hidrlisis
del agar.
Sembrar el medio de cultivo por estra en la
superficie o adicionar la muestra para la
tcnica de vaciado en placa.
Incubacin
Incubar hasta 7 das a temperatura
ambiente.