UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A

DISTANCIA UNAD
Escuela de Ciencias Agrcolas, Pecuarias y del
Medio Ambiente
QUIMICA ORGANICA
PRACTICA No. 6 AMINOCIDOS Y
PROTENAS
Mayo/ 2014
Duitama- Boyac
Los aminocidos (aa) son molculas orgnicas pequeas con un grupo
amino (NH2) y un grupo carboxilo (COOH) en su estructura.
La gran cantidad de protenas que se conocen estn formadas
nicamente por 20 aa diferentes. Se conocen otros 150 que no forman
parte de las protenas.
La formula general de un aminocido es
H
NH
2
C COOH
R
tomo carbono
grupo carboxilo
grupo cadena lateral
grupo amino
R es uno de los 20 diferentes cadenas laterales.
A pH 7 tanto el grupo amino como el carboxilo estn ionizados
H
NH
3
C COO
R
+
Segn su obtencin
Esenciales:
No pueden ser sintetizados de
novo a partir de glucosa u otros
AA
Deben ser ingeridos para
obtenerlos
No Esenciales:
Si pueden ser sintetizados de
novo a partir de glucosa u otros
AA

Diez:
1.- Arginina 6.- Metionina
2.- Histidina 7.- Fenilalanina
3.- Isoleucina 8.- Treonina
4.- Leucina 9.- Triptofano
5.- Lisina 10.- Valina

Estos aminocidos no
pueden ser sintetizados
por las clulas animales
y deben
ser suministrados por
la dieta.
Alanina
Aspargina
Acido Aspartico
Acido Glutamico
Glutamina
Glicina
Prolina
Serina

Solo sintetizados a
partir de AAE
Cistenia
Metionina + Serina
Tirosina
Fenilanina
Pruebas cualitativas para aminocidos y
protenas

Objetivos.
Aplicar pruebas cualitativas y especficas que permitan
reconocer grupos qumicos de los aminocidos y
protenas.
Someter soluciones de protenas a desnaturalizacin con
agentes fsicos y qumicos.

Las protenas son las biomoleculas ms abundantes despus
del agua y desempean un gran de funciones, que las
caracterizan como componentes esenciales e indispensables
para la vida.

Sus propiedades qumicas y fisiolgicas dependen no solo de su
tamao, formas y propiedades de los aminocidos que las
componen. Por la estructura peptdica y la presencia de
determinados grupos las protenas pueden reaccionar con una
variedad de agentes originndose productos coloreados. Estas
reacciones reacciones son las bases para la determinacin
cuantitativa y cualitativa de las protenas.

Todos los aminocidos que presentan al menos un grupo amino y
uno carboxilo libre, reaccionan con las diferentes pruebas de
caracterizacin.

Tipos de reacciones que nos permiten identificar una protena:

1. Gotero 2. Probeta de 10 ML
3. Vasos de precipitados
4. Tubos de Ensayo
5. Clara de huevo
6. Gradilla
7. Mechero
8. Pipetas
Los grupos amino libres de los aminocidos, de los pptidos y las protenas
reaccionan con la ninhidrina a un pH entre 4 y 8, para dar un compuesto de
intenso color azul prpura. La prueba tambin es positiva con aminas
primarias y amonaco pero sin desprendimiento de CO
2
. Los aminocidos
prolina e hidroxiprolina dan un color amarillo en lugar del color prpura con
la ninhidrina.
La reaccin es muy sensible y es ideal para la deteccin de aminocidos en
cromatogramas y para su cuantificacin mediante tcnicas
espectrofotomtricas de las fracciones que se obtienen de columnas
cromatogrficas.
Coloraciones
obtenidas para
la reaccin de
ninhidrina.
Los aa, que contienen un ncleo aromtico forman
nitroderivados de color amarillo cuando se calientan con
cido ntrico concentrado. Las sales de estos derivados
son de color naranja intenso en medio alcalino. La
fenilalanina, la tirosina y en cierto grado el Triptfano, as
como todas las protenas que los contienen, dan positiva la
prueba.
Coloraciones obtenidas en
elensayo Xantoproteico.
El grupo indlico del triptfano reacciona con cido
glioxlico en presencia de cido sulfrico concentrado
dando un complejo de color prpura. El cido actico glacial
que ha sido expuesto a la luz contiene cido glioxlico.

Este aminocido se condensa fcilmente con varios
aldehdos en presencia de cidos fuertes para dar
compuestos coloreados. En la reaccin se utiliza el reactivo
de Ehrlich (p-dimetilaminobenzaldehdo al 10% en HCL
conc.) que reacciona con un buen nmero de compuestos
orgnicos tales como indoles, aminas aromticas y
compuestos ureicos para dar complejos coloreados.
Cuando los aa y las protenas que contienen grupos tilicos
se calientan en medio fuertemente alcalino, el azufre
presente reacciona para formar sulfuros. Este sulfuro
puede detectarse por la formacin de un precipitado negro
de sulfuro de plomo por adicin de acetato de plomo.

Los grupos tioles tambin reaccionan con el nitroprusiato
de sodio en presencia de un exceso de amonaco para dar un
complejo de color rojo.

El aa. Arginina contiene un grupo guanidino en la cadena
lateral, este grupo reacciona con el reactivo de Sakaguchi
(a-naftol/agua de Bromo) en medio alcalino para dar un
compuesto de color rojo.
Los compuestos que tienen dos grupos carbamidos (-CONH-),
ya sea unidos directamente o a travs de un tomo de carbono
o nitrgeno, dan un color violeta con el sulfato de cobre
alcalino (Reactivo de Biureth). Los tripptidos son las
molculas ms pequeas capaces de dar una prueba de Biureth
positiva, mientras que esto no ocurre con los aminocidos.


La prueba de Biureth es una buena prueba general para las
protenas y la intensidad del color violeta es una medida del
nmero de enlaces peptdicos. Algunas sustancias como la
oxamida pueden dar falsos resultados positivos en ensayos
cualitativos de protenas.
La desnaturalizacin es cualquier proceso por el cual
el arreglo espacial de una protena cambia de la
estructura ordenada de la molcula nativa a una forma
tridimensional desordenada. Durante la
desnaturalizacin se pierden las estructuras de orden
superior de las protenas, con prdida de la actividad
biolgica. Las enzimas por ejemplo, que realizan
trabajos catalticos en las clulas, tienen una
temperatura y un pH ptimo en el cual presentan un
mximo de actividad, pero la actividad disminuye
significativamente hacia valores extremos de pH y a
bajas o elevadas temperaturas.
Los cationes de metales pesados y los aniones de elevado peso
molecular son muy usados en la separacin de protenas y en la
preparacin de filtrados libres de protenas. A pH neutro por lo
general las protenas tienen carga neta negativa y se combinan
fcilmente con iones de metales pesados que, al neutralizar la
carga producen la precipitacin. A pH por debajo del punto
isoelctrico en cambio, se combinan con aniones porque presentan
carga neta positiva. Soluciones concentradas de sales, de sulfato
de amonio, por ejemplo, reducen en gran medida la solubilidad de
las protenas, porque compiten por las molculas de agua de
disponibles para la solvatacin y las interacciones protena-
protena se hacen ms importantes.
MUCHAS GRACIAS..