Las aplicaciones son mltiples, como con las plantas,
desde el uso de animales como biorreactores para la
produccin de protenas de inters (humanas o de otro tipo), hasta el estudio de genes especficos y la posibilidad de la terapia gnica en humanos.
Cuando el ADN extrao que se introduce no afecta a clulas germinales, sino a las clulas somticas, se denomina al proceso tranfeccin y para conseguirla se usan distintas tcnicas. Las clulas transfectadas tienen gran inters en la obtencin de lneas celulares alteradas capaces de producir compuestos comerciales. Fases en la transfeccin de ADN segn diversas tcnicas Aparato de microinyeccin En los animales el ADN extrao o transgn se introduce en zigotos de modo que el embrin que resulte haya integrado el transgn en todas las clulas y origine un organismo transgnico. Una forma de conseguir la transgnesis es mediante la tcnica de la microinyeccin de zigotos, en la que se inyecta con una micropipeta el material gentico que se desee. Otra posibilidad es utilizar clulas embrionarias en las que se inocula el transgn mediante diversas tcnicas (electroporacin, transfeccin con virus o por microinyeccin).
Aplicaciones de los vectores adenovirales
1. Terapia del cncer : introduciendo genes en las clulas tumorales que conduzcan a la supresin del tumor y a su eliminacin 2. Terapia gnica: introduciendo genes en las clulas o tejidos para suplementar genes defectivos. 3. Terapia suplementaria para introducir genes, la expresin de los cuales combata el progreso de la enfermedad. (de Russell, W.C. (2000). Update on adenovirus and its vectors J. Gen. Microbiol. 81 : 2573-2604
Ubicacin de algunas enfermedades genticas conocidas en el mapa gentico humano Este proyecto de investigacin tiene como objetivo averiguar la secuenciacin completa de nucletidos de los 23 pares de cromosomas humanos, para conocer la composicin qumica exacta de todos los genes (genoma) y su ubicacin en cada uno de los cromosomas, as como toda la informacin adicional extra no codificante (el llamado ADN basura) y estudiar su funcin.
En 1997, el Genoma humano fue declarado patrimonio de la Humanidad por la UNESCO, para evitar que se comercialice con l. En junio del ao 2001 se presenta una primera aproximacin de la secuencia completa, descubrindose que tenemos muchos menos genes (unos 30.000) de los inicialmente previstos (100.000). Las enfermedades genticas debidas a un solo gen defectuoso ascienden a ms de 4000, de las cuales 345 afectan al cromosoma X, por lo que sern transmitidas a los nios varones, si su madre posee uno de esos defectos genticos.
La terapia gnica est siendo considerada la cuarta revolucin de la medicina (despus de las medidas de salud pblica, la anestesia, y las vacunas y antibiticos). Para su aplicacin se siguen dos estrategias:
a) Insertar una copia sana de un gen en las clulas del paciente con una enfermedad gentica, para compensar el efecto del gen defectuoso ( esto se consigui con una nia que tena una inmunodeficiencia grave).
b) Introducir un gen especialmente diseado para que proporcione una nueva caracterstica a las clulas (por ejemplo, introducir en linfocitos un gen que produzca un inhibidor del virus del sida en pacientes afectados por el VIH). Las vacunas contienen un agente patgeno causante de una enfermedad infecciosa, pero o est muerto o est atenuado (son cepas muy poco virulentas). Tambin se puede vacunar con subunidades del patgeno, stas pueden hoy da fabricarse mediante ingeniera gentica en gran cantidad. Las subunidades son protenas con poder antignico. As, se ha conseguido obtener la vacuna de la hepatitis B mediante la tecnologa del ADN recombinante. El gen de la subunidad proteica del virus de la hepatitis fue introducido en la bacteria Escherichia coli y en la levadura Saccharomyces cerevisiae, las cuales produjeron en cultivo la protena del virus.
Los anticuerpos sirven como defensa frente a enfermedades infecciosas y sustancias extraas, pero adems son un medio de curacin para aquellos enfermos que no son capaces de producirlos. La tcnica de los anticuerpos monoclonales permite obtener gran cantidad de ellos y sin impurezas; consiste en inmortalizar las clulas responsables de su fabricacin, las clulas plasmticas que se forman por activacin de los linfocitos B. La forma de conseguirlo es hibridando clulas plasmticas y clulas tumorales con capacidad para multiplicarse indefinidamente (clulas de mielomas), el resultado son clulas hbridas llamadas hibridomas que se pueden clonar. Cada clon (procedente de un solo hibridoma) producir un anticuerpo monoclonal. Tcnica utilizada en la prueba del ADN La biotecnologa se puede aplicar a otras facetas de la vida social adems de las mencionadas. De entre todas ellas es de destacar su utilizacin en relacin con el derecho y la ciencia forense. En el esclarecimiento de un crimen puede ser crucial la prueba que aporte el bilogo forense al determinar la huella gentica del criminal a partir de un resto de saliva en un cigarrillo (contiene clulas de la mucosa bucal), una mancha de sangre (leucocitos), restos de semen (espermatozoides) o un simple pelo (clulas del folculo piloso). La tcnica que se aplica es la del perfilado del ADN o prueba del ADN . Se basa en la presencia de regiones en el material gentico no codificante que se denominan minisatlites , y que contienen muchas repeticiones en tndem de una pequea secuencia de nucletidos. Para su deteccin se utilizan sondas gnicas (oligonucletidos marcados con tomos radiactivos), de modo que cada sonda detecta un minisatlite. Estos minisatlites son de diferente longitud en cada persona puesto que el nmero de repeticiones en tndem es variable.
La huella gentica tambin puede utilizarse para realizar pruebas de paternidad y para identificar a personas desaparecidas de las que se tengan sus huesos; esto ocurri con los restos seos de los miembros de la familia del ltimo zar de Rusia asesinados por los bolcheviques. Tcnica de clonacin La posibilidad de clonar animales mamferos, tanto a partir de clulas embrionarias como de clulas diferenciadas (caso de la oveja Dolly), abre la puerta para la clonacin de humanos. Para mayor polmica se publica en 1993 un experimento de clonacin humana hecho con embriones humanos que no podran haber sobrevivido, pero que mediante la disgregacin de sus clulas se obtuvieron 48 embriones clnicos (idnticos genticamente) que fueron posteriormente destruidos.
Clonar personas enteras est prohibido en muchos pases y condenado por muchas instituciones, pero clonar tejidos humanos con fines teraputicos es pedido por multitud de cientficos, sobre todo desde que se puede dirigir la diferenciacin de clulas madre hacia la obtencin de tejidos concretos.