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CONGRESO DE MEDICINA TRANSFUSIONAL
MAZATLAN
MEMBRAN DEL
ERITROCITO Y
LESIONES DE
ALMACENAMIENTO
M. en C. GUILLERMO ESCAMILLA GUERRERO
NOVIEMBRE 11, 2010

LA TRANSFUSION SANGUINEA MAS SEGURA
ES LA NO ADMINISTRADA.
Componentes de la sangre entera
Cuadro 17.1
Retirar la sangre y
lugar en tubo
1 2 Centrifugadora
Plasma
(el 55% de sangre entera)
Formado
elemento
s
Capa leucoplaquetria)
Eritrocitos
(el 45% de sangre entera)
Caractersticas fsicas y volumen
La sangre es un lquido pegajoso, opaco con un
gusto metlico
El color vara del escarlata (rico-oxgeno) a rojo
oscuro (pobre-oxgeno)
El pH de la sangre es 7.35-7.45
La sangre explica aproximadamente el 8% de
peso corporal
El volumen medio de sangre es 5-6 L para los
varones, y 4-5 L para mujeres
Funciones de la sangre
La sangre realiza un nmero de funciones:
Distribucin de la sustancia
Regulacin de los niveles de sustancias
particulares
Proteccin del cuerpo
Distribucin
Transportes de la sangre:
Oxgeno de los pulmones y de los nutrientes de la
zona digestiva
Desechos metablicos de las clulas a los
pulmones y riones para su eliminacin
Hormonas de las glndulas endocrinas a los
rganos de blanco
Regulacin
La sangre mantiene:
Temperatura del cuerpo apropiada por absorcin y
distribucin de calor.
Mantener un pH normal en tejidos del cuerpo
empleando sistemas de almacenamiento
intermediario
Volumen del fluido adecuado en el sistema
circulatorio
Proteccin
La sangre previene prdida de sangre:
Protenas y plaquetas del plasma
Iniciacin de la formacin del cogulo
La sangre previene infeccin:
Sintetizando y utilizando los anticuerpos
Protenas de complemento
Glbulos blancos que se activan para defender el
cuerpo contra invasores extranjeros
Plasma de sangre
El plasma de sangre contiene
aproximadamente 100 solutos, incluyendo:
Protenas - albmina, globulinas, protenas de
coagulacin, y otros
Sustancias nitrogenadas no protecas: cido
lctico, urea, creatinina
glucosa, carbohidratos, amino cidos
Electrlitos - sodio, potasio, calcio, cloruro,
bicarbonato
Gases: O
2
y CO
2
I.N.P. BANCO DE SANGRE
Reduccin de
niveles O
2
en
sangre
Eritropoyetina
incide en M. O.
Niveles normales del oxgeno de la sangre
Estmulo: Hipoxia debido a
cuenta disminuida de RBC,
disponibilidad disminuida
de O
2
en la sangre, o
aumentado demandas del
tejido para O
2
Comienzo
Aumento capacidad
de la sangre para O
2
HbO
2
HbH
+
H
+
H
2
CO
3
H
2
O

Anhidrasa Carbnica
HCO
-
3
Banda 3
Cl-

CO
2
O
2
CO
2
O
2
Efecto Bohr
Cambio de pH (HCl)
O
2
I.N.P. BANCO DE SANGRE
Introduccin
1674 Leeuwenhoeck
describe las primeras
imgenes de los
eritrocitos
16 aos antes
Swammerdam los
denomin glbulos
rojizos
I.N.P. BANCO DE SANGRE
Introduccin
1665 Malpighi los confunde
con corpsculos adiposos
semejantes a un rosario de
coral rojo...carentes de
importancia
1765 Hewson los define como
discos planos
Siglo XVII Lmery demostr la
presencia de Fe en la sangre.
I.N.P. BANCO DE SANGRE
Introduccin
1844 Donn imaginaba que las leucemias se
generaban como consecuencia de una conversin
imperfecta de clulas blancas a corpsculos rojos: los
glbulos blancos son los progenitores de los glbulos
rojos
1850s Virchow especula que la derivacin de
corpsculos rojos a partir de los menos coloridos se
detiene en el momento en que stos ltimos pasan a
circulacin.
1851 Funke aisl la Hemoglobina en forma cristalina.
I.N.P. BANCO DE SANGRE
Introduccin
1878 Ernest Neumann estudiando procesos
leucmicos, describe la apariencia de la mdula
como similar a pus de color amarillo verdoso
sucio, resume sus observaciones con nfasis
especial en la formacin de estos corpsculos
descoloridos en la Mdula sea y difiere de la
opinin de que se convierten en corpsculos
coloridos.
Hoppe - Seyler comprob que la Hb puede
captar y liberar Oxgeno.

I.N.P. BANCO DE SANGRE
Introduccin
El eritrocito esta conformado slo por una membrana que
rodea a una solucin de protenas y electrlitos, el 95%
corresponde a la Hb y el 5% restante a enzimas
generadoras de energa y de los procesos oxido -
reductivos.
El eritrocito carece de ncleo, mitocondrias y ribosomas,
no puede sintetizar protenas, llevar a cabo las
reacciones oxidativas mitocondriales ni experimentar
mitosis................................................................................
.......................ENTONCES QUE ONDA?
I.N.P. BANCO DE SANGRE
I.N.P. BANCO DE SANGRE
Transportar Oxgeno a tejidos
Transporte de CO
2
de Tejidos a
zonas de desecho.
Proporcionar al menos el 40%
del volumen sanguneo
I.N.P. BANCO DE SANGRE
Adems de que ..............
El lecho capilar tiene dimetros
mayores de 7.5 m, en tal forma
que al entrar el eritrocito se
escurre y posteriomente recupera
su tamao normal.
La carga de Hb en su interior
genera un alto gradiente de presin
oncotico.
En medio isotnico el eritrocito se
humecta, en soluciones hipertnicas
se arruga
I.N.P. BANCO DE SANGRE
y.................que en ...
El eritrocito es sometido en
cuestin de segundos a
molaridades que oscilan desde lo
isotnico a 6 veces este valor.
La membrana del eritrocito debe
poseer un alto grado de
adaptabilidad a resistir estas
demandas.

Algo ms
La nica ruta metablica es la Glicoltica
(Embden Meyrhof)
Los eritrocitos son altamente flexibles.
Paso a travs del corazn es de
aproximadamente 2 x 10
5

Se inicia muerte programada.
Presencia de neonatgenos

I.N.P. BANCO DE SANGRE
Propiedad del eritrocito
DEFORMABILIDAD CELULAR
capacidad del eritrocito de distorsin y
deformacin, as como recuperacin de su
forma normal sin fragmentacin o prdida de su
integridad
I.N.P. BANCO DE SANGRE
Para ello requiere...


Optimizacin en ..........
MEMBRANA
ESTRUCTURA & FUNCION DE LA
HEMOGLOBINA
METABOLISMO CELULAR
Cuadro 17.3
Cuadro 17.4
I.N.P. BANCO DE SANGRE
POR
QUE
LA

MEMBRANA?
I.N.P. BANCO DE SANGRE
PORQUE.......
Permetro que demarca los lmites con el medio ambiente
La membrana del eritrocito es la ms estudiada..... por su fcil
obtencin.
Representa el 1% del peso total.
Respuesta a eritropoytina durante la eritropoysis e importa el
Fe requerido.
Retiene compuestos vitales (fosfatos) y elimina desechos
metablicos.
Secuestra reductores requeridos para prevenir la corrosin por
el oxgeno.


I.N.P. BANCO DE SANGRE
ADEMS DE ....
Ayuda a regular el metabolismo eritrocitario por unin
selectiva/reversible o por inactivacin de enzimas
glicolticas.
Favorece el intercambio de iones cloro y bicarbonato
para regular el pH.
Mantiene un potencial externo que impide que se
adhieran a clulas endoteliales o entre s...... y
obstruyan la microcirculacin.
I.N.P. BANCO DE SANGRE
Y POR ULTIMO.....PARA
COMENZAR
Se compone de lpidos y protenas asimtricamente
distribuidos y mviles que interactan entre s.
Provee la fuerza y flexibilidad para permitirle mantener
su integridad bajo el estrs circulatorio durante sus 4
meses de vida.
Ejemplo tpico de modelo del mosaico fluido de Singer
& Nicholson.

Composicin de un membrana eritrocitaria normal
Componentes Peso %
Gramos de
Membrana (10
13
)
Nmero de molculas
aproximado por
membrana(10
6
)
% en la cara
externa de
la Bicapa
% en la cara
interna de la
Bicapa
Protenas y Glicoprotenas 55 5.7[] 6
Lipidos 45 4.7 475
Fosfolipidos 28 3 250[]
Esfingomielina (SM) 6.8 0.73 60 85 15
Fosfatidilcolina (PC) 7 0.75 65 70 30
Fosfatidiletanolamina (PE) 7.4 0.79 65 20 80
Fosfatidilserina (PS) 4.3 0.46 40 0 100
Fosfatidil inositol (PI) 1 0.1 8 0 100
PI 0.34 0.036 3
PIP 0.22 0.024 2
PIP2 0.39 0.042 3
cido fosfatidico (PA) 1 0.1 8 10 90
Lisofosfatidilcolina (Lyso-PC) 0.3 0.03 3 ? ?
Lisofosfatidiletanolamina (Lyso-PE) 0.3 0.03 3 ? ?
Colesterol 13 1.3 195 50 50
Glicolipidos 3 0.3 10 100 0
cidos grasos libres 1 0.1 20 ? ?
TOTAL 100 10.4 481
I.N.P. BANCO DE SANGRE
Estructura y funcin de la membrana celular
MEMBRANA: bicapa lipdica
proteca genera una
barrera hidrofobica y fluda.

CITOESQUELETO: define
el tamao, forma y
compartamentalizacin del
espacio encapsulado.

I.N.P. BANCO DE SANGRE
ESTRUCTURA Y FUNCION DE LA
MEMBRANA CELULAR
Lpidos: funcin de barrera
Protenas: receptores, canales y
bombas

I.N.P. BANCO DE SANGRE
Asimetria y organizacin topologica
Lpidos y Protenas tienen una difusin libre en direcciones laterales
a lo largo del plano de la bicapa.
Esto permite la polaridad celular, formacin de seudpodos,
pinocitosis, fenmenos de caping, etc.
La asimetra es crtica para la comunicacin y funciones reguladoras
El movimiento transverso es limitado por efectos estricos de carga
y volumen. (flip-flop).
El flip flop de fosfolpidos:
Difusin pasiva
Sistema transportador ATP dependiente (flipasa: aminofosfolpido
translocasa) .......Rh
o
?
I.N.P. BANCO DE SANGRE
I.N.P. BANCO DE SANGRE
Lpidos
Representa del 50 60 % de la masa de la
membrana.
Enfermedades asociadas a desarreglo de
lpidos en membrana, es poco conocido.
I.N.P. BANCO DE SANGRE
Lpidos
Fosfogliceridos
Fosfatidilcolina
Fosfatidil
etanolamina
Fosfatidil serina
Fosfatidil inositol
(fuente de
mensajeros
secundarios )
I.N.P. BANCO DE SANGRE
Lpidos

Glicolpidos
Se localizan en la cara
exterior de la membrana,
esta asimetra permite la
discriminacin entre el
interior y exterior de la
membrana (residuos de
azcar se localizan en el
exterior de la membrana
formando grupos: A, B, H
Le
a
, Le
b
, P)
I.N.P. BANCO DE SANGRE
Lpidos

Colesterol
Control de fluidez
de membrana

I.N.P. BANCO DE SANGRE
Lpidos

Recambio de
lpidos
LCAT:
lecitin,coleste
rol
acetiltransfer
asa
PC & SM: 5
das
PS & PE no
intercambiabl
e

I.N.P. BANCO DE SANGRE
Protenas
Contiene 12 protenas mayores y cientos de
menores.

I.N.P. BANCO DE SANGRE
Protenas
Se clasifican acorde a su
corrimiento electrofortico
Se clasifican acorde a la
facilidad de ser retiradas de
la membrana mediante el
empleo de agentes
cautrpicos o detergentes:
INTEGRALES
PERIFERICAS
I.N.P. BANCO DE SANGRE
Protenas
Protenas amfitropicas cambio de afinidad
acorde a su medio ambiente.
Protenas integrales:
Embebidas: Grandes dominios de residuos hidrofobicos,
aproximadamente 20 aa; prototipo glicoforna A, sistema
Rho. CD4
Ancladas: secuencia consenso en su regin CO - ter o
NH
2
ter, sitios de reconocimiento para miristilacin o
farnesilacin o por anclaje de fosfoinositidos.

I.N.P. BANCO DE SANGRE
I.N.P. BANCO DE SANGRE
Protenas integrales
Glicoforinas
funcin ?
Aporta carga negativa
Se une a p4.1 & p55
Banda 3
Bomba de aniones
20 30%
Posible flipasa
12 14 hlices
transmembranales, se une
a Ankirina, p4.1 & p4.2
Di
a
& Wr
b
I.N.P. BANCO DE SANGRE
Protenas integrales
IMP partculas
intramembranosas
Protoplasmicas : dmeros y
tetramros de Banda 3
Externos: glicofornas y
protenas transportadoras de
glucosa
100 diferentes protenas:
Rh
Kell
Duffy
Transportadores para urea,
glucosa y amino cidos
ATPasa (Na
+
, K
+
, Ca
2+
, Mg
2+
Cinasa, fosfatasa,
acetilcolinesterasa, DAF,
Receptores de: transferrina,
insulina... etc.
I.N.P. BANCO DE SANGRE
Antgeno
Rh
Knops
Precursor de Kell (Kx)
Lu
Kell
Duffy
Kidd
Diego
Cartwrigth
Colton
LW
Ch/Rg
Crommer
Knoops
Indian
ABO/Ii


Funcin
Transportador, estructural
Receptor CR1
Estructural
Homlogo Adhesin
Enzimas
Receptor de quimiocinas
Transportador de Urea?
Intercambiador aninico
Acetilcolinesterasa
Acuaforina
Factor de Adhesin?
Componente de complemento (C4a-C4b)
Factor de Decaimiento Acelerado (DAF)
Receptor de complemento C3b/C4b (CD35)
Adhesin (DC44)
Transportadora de aniones
N
ABO
Hh
MNS Kell
Rh
Diego
Kidd
Duffy
Protenas de paso nico mltiple
N
C
N
C
C
N
= N glyan
= GPI
ANTIGENOS ERITROCITARIOS
ADHESION
RECEPTOR ENZIMA
ESTRUCTURAL
TRANSPORTE
I.N.P. BANCO DE SANGRE
Citoesqueleto
deformabilidad y estabilidad
La estructura es la de una malla
hexagonal.
55-60% de protenas de membrana
Se compone de :
Espectrina: dmeros
Codificada por genes diferentes
200,000 copias por clula
Mantiene la forma. Regular la
mobilidad lateral de protenas y
soporte a lpidos.
Formacin de tetrmeros
2

2
Ankirina: Bandas 2.1, 2.2, 2.3, 2.6

I.N.P. BANCO DE SANGRE
Citoesqueleto
deformabilidad y estabilidad
Se compone de :
Actina
Tropomiosina
Tropomodulina
Aducina
Proteina 4.1
Dematina (p4.9)
Porcin de Banda 3
Protena 4.2
Banda 7

I.N.P. BANCO DE SANGRE
TIBS.1997;;22:460-461
I.N.P. BANCO DE SANGRE
Propiedades del eritrocito
DEFORMABILIDAD CELULAR depende de:
Geometra (forma biconcava)
Volumen: 90 m
3
Superficie mnimo de una esfera : 98 m
3
re de la superficie de disco biconcavo : 140 m
3
Viscosidad citoplasmtica
Contenido de Hb (27-35 g%)
Deshidratacin: incremento exponencial de viscosidad
Hidratacin regulada por bombas y canales en
membrana, polimerizacin de Hb.

I.N.P. BANCO DE SANGRE
Propiedades del eritrocito
DEFORMABILIDAD CELULAR depende de:
Deformabilidad de la membrana
Asociada al complejo membrana-citoesqueleto.
Deformabilidad es la capacidad de distorsin por la
aplicacin de una fuerza definida. La disminucin de esta
capacidad genera rigidez.
Estabilidad es la fuerza mxima de extensin de la
deformacin que es reversible. La disminucin de esta
capacidad genera fragmentacin.

I.N.P. BANCO DE SANGRE
Ig G
Ig A
Ig M
Ig E
Ig D
C4
C4a
C4b
C2a C2b
C3a C3b
C5b C5a
C6 C7
C9
C2
C3
C5
C8
H20
H20
Hb
Substancias
tromboplsticas
Hb
C4
C4a
C4b C2a
C3a
C3b
C5b
C5a
C6 C7
C9
C8
aminas bigenas :
histamina
- mediadores lipdicos:
LTC4,
PGD2, PAF
- citoquinas: FNT
- enzimas: triptasa
I.N.P. BANCO DE SANGRE
La sangre
Desde sus inicios, la Humanidad ha
relacionado la sangre como una de las
cosas que hacan la vida posible.

Entonces degollar el becerro en la
presencia de Jehov; y los sacerdotes
hijos de Aarn, ofrecern la sangre y la
rociarn alrededor sobre el altar...
(Levtico 1:5)

La sangre es un lquido muy especial
..............Mefistfeles
Introduccin
Una vez que es
realizada la flebotoma
al donador, en la sangre
recolectada se inicia una
serie de cambios que
alteran sus propiedades
fisiolgicas.

La sangre depende de un delicado
balance para su integridad
durante su almacenamiento:
GLUCOSA
pH
ATP
Introduccin
La formulacin de anticoagulantes/preservadores.
Relacin eritrocitos / mezcla preservadora-
anticoagulante.
Las caractersticas de la bolsa de almacenamiento.
Sistemas de fraccionamiento.
Mantener la temperatura de almacenamiento
adecuado.
Las condiciones de embalaje y transporte.
Un estricto control de calidad.
PRINCIPIOS
FUNCION DE SOLUCION ADITIVA/ANTICOAGULANTE:
ESTABILIZADOR METABOLICO
PREVENIR COAGULACION
SOLUCION
PRESERVATIVA - ANTICOAGULANTE
DEXTROSA: ...GLUCOLISIS
ADENINA..SUSTRATO PARA SINTESIS DE ATP
CITRATOS:..ANTICOAGULANTE
FOSFATOS:.AMORTIGUADOR
SISTEMAS ADITIVOS
Obtencin de > vol de plasma
> sobreviviencia del eritrocito
Hematocrito final 60%
Almacenamiento de 42 das

PRINCIPIOS
C. E. 1 6 C
C. P.. 20 24 C
PMN. 20 24 C
PFC...< -18 C
GAH....< -18 C


VIDA DE
ALMACENAMIENTO
75% DE LOS ERITROCITOS
ORIGINALMENTE TRANSFUNDIDOS
ESTEN EN EL RECEPTOR 24 HORAS
DESPUS
Introduccin
Conforme aumenta el tiempo de
almacenamiento el efecto ms
importante es la perdida progresiva
de la viabilidad, esto se asocia a

Lesiones de Almacenamiento
MACROAFECTACION
Disminucin del pH.
Consumo de glucosa.
Incremento de cido lctico.
Disminucin de ATP.
Disminucin del 2,3-DPG.
Cambios en la concentracin de
Na
+
/K
+
.
As como incremento de la
hemoglobina libre en plasma por
falta de clarificacin.
Variacin en la temperatura de
conservacin.
I.N.P. BANCO DE SANGRE
METABOLISMO DEL ERITROCITO
Los requerimentos de energa se satisfacen por
catabolismo de la glucosa con almacenamiento de la
energa generada .
ATP
Glutatin
Cofactor piridinnicotinamida adenindinucleotido
(NADH)
Adenindinucletido fosfato de nicotinamida(NADPH).
I.N.P. BANCO DE SANGRE
METABOLISMO DEL ERITROCITO
La glucosa constituye la principal fuente de
energa del glbulo rojo.
Aproximadamente el 90% de la glucosa que
entra al glbulo rojo, sigue la va de
Embden-Meyerhof
I.N.P. BANCO DE SANGRE
METABOLISMO DEL ERITROCITO
VIA DE EMBDEN MEYERHOF.
El metabolismo es iniciado por el catabolismo de la
glucosa por fosforilacin a G6P
La reaccin es catalizada por una Hexoquinasa.
su actividad es altamente sensible a cambios de
pH, a las concentraciones de G6P y a la presencia
de fosfatos inorgnicos.
Eritrocitos normales
Edad de almacenamiento: > denso,
probablemente por prdida de
membrana, por lo tanto mayor rigidez.
Modificacin de la banda 3 generando un
neoantgeno: SCANT (senescent cell
antigen)
LESION DE
ALMACENAMIENTO
CAMBIO BIOQUIMICOS, ALGUNOS SON REVERSIBLES
REFRIGERACION
CAMBIOS
METABOLICOS
LACTATO
pH
ATP
2,3 DPG

SUSTRATOS
GSH
SON-Hb

>(2,3 DPG) < Hb------O
2

< (2,3 DPG) > Hb ----- O
2


pH
2,3 DPG
12 Hrs los eritrocitos post transfundido alcanzan el 50% de niveles normales
de ATP y 2,3 DPG.
24 Hrs el 100 %, POR ENDE LA FUNCION NORMAL DE LA HEMOGLOBINA
REFRIGERACION
BIOMECANICOS
HEMOLISIS
MORFOLOGIA
VESICULACIN
AREA MEMBRANA
DEFORMABILIDAD
AREA / VOLUMEN
FOSFATIDIL SERINA
VOLUMEN
GRADIENTE NA /K


REFRIGERACION
OXIDATIVOS
OXIDACION DE Hb
DESNATURALIZACION DE Hb
PEROXIDACIN DE LIPIDOS
ANTIGEN Bd 3
LIBERACIN DE SUBSTANCIAS BIOACTIVAS
ENTRECRUZAMIENTOS DEL
CITOESQUELETOS
REFRIGERACION
CAMBIOS
METABOLICOS
LACTATO
pH
ATP
2,3 DPG

SUSTRATOS
GSH
SON-Hb

BIOMECANICOS
HEMOLISIS
MORFOLOGIA
VESICULACIN
AREA MEMBRANA
DEFORMABILIDAD
AREA / VOLUMEN
FOSFATIDIL SERINA
VOLUMEN
GRADIENTE NA /K


Presencia de leucocitos
Hemolisis
Cambios morfologicos
Microvesiculacin
Disminucin de K+
C. E. sin
desleucocitar
C.E. leucodepletado
por boffy coat
Asociado a.
Peroxidos
Enzimas
leucocitarias
(elastasa, colagensa
y catepsina G)
Apoptosis celular
Monocitos y granulocitos liberan
a Fas-L que se une a protenas del
plasma.
Se adsorben en la superficie del
eritrocito generando seal de
fagocitosis que en su defecto
induce a lisis.
Eritrocitos almacenados
Durante el almacenamiento se pierde la
forma discoide y se generan espculas
(equinocitos).
La asimetra de lpidos es alterada: la
fosfatidil serina (PS) colocada en la cara
interna es traslocada a la externa. La PS
tiene una actividad procoagulante que
confiere a la membrana del eritrocito la
capacidad tromobognica, puede fungir
como seal de remocin de la
circulacin. (fenmeno reversible en
circulacin / mecanismo de translocasas)
Las espculas del equinocito forman la
microvesculas.
Presencia de leucocitos
Hemolisis
Cambios morfologicos
Microvesiculacin
Disminucin de K+
C. E. sin
desleucocitar
C.E. leucodepletado
por boffy coat
Asociado a.
Peroxidos
Enzimas
leucocitarias
(elastasa, colagensa
y catepsina G)
Apoptosis celular
Monocitos y granulocitos liberan
a Fas-L que se une a protenas
del plasma.
Se adsorben en la superficie del
eritrocito generando seal de
fagocitosis que en su defecto
induce a lisis.
Efectos acumulados
Oxi-Red
Oxidacin de Hb
Desnaturalizacin de Hb
Peroxidacin de lpidos
Ant-Bd3
Liberacin de substancias
bioactivas
Entrelaces del citoesqueleto
Hemolisis

Area / volumen
Deformabilidad
Fosfatidil serina
Desnaturalizacin de
Hb
Entrelaces del
citoesqueleto
Peroxidacin de
lpidos

GSH
Banda 3
PEP
PK
PIRUVATO LACTATO
PGK
3-FOSFOGLICERO-P GA3P
(1,3-DPG)
NADH
3PG
2,3-DPG
NAD
2-PG
ADP
ATP
LDH
ATP
ADP
SI NO SABES A DONDE VAS,
DA IGUAL EL CAMINO QUE TOMES

Alicia en el pas de las maravillas
fetca@prodigy.net.mx

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