UNIVERSIDAD JUAREZ AUTONOMA DE

TABASCO
DIVISION ACADEMICA DE INGENIERIA Y ARQUITECTURA
Cunduacn - Jalpa de Mndez, col. la esmeralda, Cunduacn, Tabasco


ASIGNATURA
Bioqumica General


PROFESOR
Dr. Rosendo Lpez Gonzlez


TEMA
Determinacin del acido ascrbico en tomates mediante electroforesis capilar

EQUIPO #2

Guadalupe Aguilar Reyes
Rosala Alatriste de la Cruz
Liliana del Carmen Nandero Hernndez
Brenda Guadalupe Domnguez Prez



HABILIDADES Y
DESTREZAS

Plantear preguntas
cientficamente
orientadas
Formar hiptesis
Diseo y realizacin de
investigaciones
Formulacin y revisin de
las explicaciones
qumicas
Comunicacin y defensa
de argumentos
cientficos.
EXPERIMENTOS BASADOS
EN (EC)

Separacin de drogas
Componentes de
bebidas gaseosas
Iones en el agua
Conservantes de
alimentos
cidos benzoicos
CRITERIOS

1. Alumnos capaces de traducir la
experiencia a su vida profesional
2. El anlisis debe incluir actividades para
promover un aprendizaje significativo
de las variables ms importantes y su
efecto en la separacin electrofortica
3. Motivacin del estudiante al analizar
muestras reales

El acido ascrbico o vitamina C es un
derivado de seis carbonos que participa en
reacciones de hidroxilacin.
Se presenta en forma de cristales incoloros
o dbilmente amarillentos de olor peculiar y
sabor cido.
La electroforesis capilar (EC)
Simple
Rpida altamente eficiente
Selectivo
es una tcnica en la se lleva a cabo en tubos capilares muy
finos ( 20 a 100 m de dimetro interno). Estos capilares
disipan con rapidez el calor y as permiten el uso de
campos elctricos muy altos, lo que reduce los tiempos de
separacin a unos pocos minutos.
muestras de tomate por solucin de 2% de cido fosfrico.
extractos se transfirieron a viales .
inyeccin hidrodinmica
Anlisis con el detector de UV-VIS.


Preparacin de L-ascorbato
Borato, solucin buffer.
medicin por espectrofotometra UV-VIS.
Galiana-Balaguer et al., figura 1.
El mximo coeficiente de extincin molar, , 265 nm .
ascorbato es 14500Lcm-1 mol-1
230 nm para el ftalato es 7200Lcm-1 mol-1.

UV-VIS espectros de soluciones estndar (10 para L-
ascorbato y 20 mg / L para el ftalato) en 400 mM de
tampn de borato.

Los valores de la literatura de las constantes de acidez y la masa molar de
ambas molculas (cido ascrbico, pka 1= 4,10 ; PKa2 = 11,80 ; M = 176g/mol y
cido ftlico, pKa1 = 2,76 ; PKa2 = 5,41; M = 166g/mol ) tambin fueron que
figura en el manual de laboratorio .

Mezcla se separa en funcin de su relacin carga masa.
Algunos factores:

Modo de inyeccin
Tamao de la muestra
La tensin
La longitud del capilar
Temperatura
pH o Concentracin de tampn
Una discusin se llev a cabo sobre la seleccin de la altura del pico y el rea
del pico como una variable analtica para la calibracin de la concentracin de
ascorbato (C, en unidades de g / ml).


En condiciones experimentales descritas, las curvas de calibracin de los
estudiantes eran h = (-239 + - 70) + (58 + - 7) c con R2> 0.996, respectivamente.


Las cifras tpicas de mritos obtenidos para los diferentes grupos de
estudiantes se muestran en la Tabla 1.

Curso
Figuras de merito 2007-2008 (n=18) 2008-2009 (n=20) 2009-2010 (n=20) 2010-2011 (n=20)
tftalato /mim
1.7 0.1 1.3 0.2 1.9 0.1 1.8 0.1
tascorbato /min

2.0 0.3 1.8 0.3 2.1 0.1 2.1 0.1
Pendiente de
calibracin
Utilizando la altura del
pico

60 9 62 12 59 7 58 7
Pendiente de
calibracin
Utilizando el pico rea
del pico
79 11 80 10 74 6 78 7
RDS repeticiones (%)
n=3
8.2 1.9 10 3 6.6 1.2 7.1 1.5
Tabla 1. Cifras analticas de los mritos en la actividad de calibracin
calculados a partir de datos de informes de los estudiantes
La siguiente actividad fue la determinacin de cido ascrbico
en los alimentos con tomate.
El pre tratamiento de la muestra se bas en :
Homogeneizacin
Exprimido
Centrifugacin
Filtracin

Se aadi cido fosfrico para evitar la degradacin de L-cido ascrbico
durante el experimento.
La identificacin de los picos se bas en el tiempo de migracin de patrn
interno y el analito, y se confirm mediante espectros de UV registrado en el
pico (detector de mltiples longitudes de onda).

Los estudiantes aprendieron sobre la importancia de la homogeneizacin y
eliminacin de interferencias para obtener resultados representativos y
exactos debido a diferentes muestras
Percepcin del estudiante
El experimento fue aceptado satisfactoriamente por
los estudiantes.

La encuesta se realizo para cada grupo en 5
minutos.

Indicaron que ir a los 4 cursos del experimento les
ayudo a aprender la tcnica de la CE.

De 78 a 88 estudiantes estuvieron en acuerdo y
muy de acuerdo en las opciones.


Indicaron que el experimento se
realizo:

con una distribucin de tiempo suficiente.

El nivel de dificultad.

Estrategia dinmica.
En la pregunta abierta los estudiantes
indicaron:


El experimento hizo hincapi en los aspectos prcticos
de las separaciones del CE.

La importancia de los mtodos instrumentales en una
empresa de biotecnologa.

Conclusiones
El docente tiene que demostrar con su experiencia:
la eficacia de la clase.
Las ventajas para alcanzar los resultados de
aprendizaje.
Los estudiantes han aprendido en las conferencias
durante la sesin de laboratorio.

Se les recuerda tambin a los estudiantes la importancia
de la naturaleza qumica de los analitos.