Agenda A. Mecanismos de transmisin B. Entoameba Histolytica C. Entoameba Coli D. Blastocystis Hominis E. Acanthamoeba Protozoarios Son organismos unicelulares cuya unidad es una clula eucariota con capacidad para cumplir todas las funciones requeridas para asegurar la persistencia de la especie. Como toda clula eucariota tiene un ncleo verdadero cuyas caractersticas pueden ser de utilidad taxonmica, por ejemplo en el gnero Entamoeba. El ncleo est rodeado por el citoplasma, rico en organlas, donde se efectan una parte importante de los procesos fisiolgicos. Lo separa del medio externo la membrana plasmtica. Esta ltima tiene gran importancia en la vida del parsito, tano para el reconocimiento del husped como para la adaptacin a cada uno de sus hbitats. Los protozoos se dividen en distintas Clases o Phylum, teniendo en cuenta la movilidad del trofozoto y el tipo de organla que para ello posean: Zoomastigophora: se movilizan por la ayuda de uno o ms flagelos y en ocasiones membrana ondulante. Por ejemplo Tripanosoma cruzi, Giardia intestinalis, Trichomonas vaginalis Rhizopoda: se movilizan por la emisin de pseudpodos, son llamadas amebas. Por ejemplo Entamoeba histolytica, Entamoeba coli, etc. La emisin de pseudpodos es empleada por las amebas no slo para desplazarse sino tambin para incorporar alimento. Por este mecanismo son fagocitados por ejemplo glbulos rojo en el caso de Entamoeba histolytica y bacterias en el caso de Entamoeba coli Apicomplexa: carecen de organlas especializadas para su movimiento. Se caracterizan por presentar en su extremo apical una serie compleja de estructuras que estn involucradas en el mecanismo de interiorizacin celular. Por ejemplo Toxoplasma gondii, Plasmodium sp., Isospora belli
Ciliophora: son protozoarios complejos que portan cilios como medio de locomocin, por ejemplo Balantidium coli Microspora: Phylum agregado recientemente, incluye patgenos oportunistas. Los protozoarios se reproducen mayoritariamente por mecanismos asexuales:
Endodiogenia: se generan dos clulas hijas en el interior de la clula madre y slo cuando aquellas han completado su maduracin la clula madre se destruye, por ejemplo Toxoplasma gondii Divisin binaria simple: proceso en el que el ncleo sufre una mitosis y luego se divide el citoplasma, por ejemplo Entamoeba histolytica Esquizogonia: Se caracteriza por la divisin mltiple del ncleo y la ulterior migracin de los ncleos resultantes hacia la periferia del citoplasma, constituyendo la figura llamada esquizonte, el proceso culmina con la divisin citoplasmtica. Como resultado se formarn un nmero variable de individuos llamados merozoitos, los cuales quedan en libertad al destrurse la clula husped que los contiene, y capacitados para penetrar a otra clula, por ejemplo Plasmodium spp. En el caso de los parsitos comprendidos en la Rama Apicomplexa, su ciclo evolutivo se completa alternando sucesivamente ciclos de multiplicacin asexuada y multiplicacin sexuada, gametos masculinos y femeninos que originaran un cigote del que surgirn numerosos esporozotos, esto es reproduccin esporognica. Los ciclos asexuados y sexuados pueden tener lugar en un nico husped o en huspedes diferentes.
CICLO DE VIDA Durante su ciclo biolgicos, los protozoarios pueden presentar dos fases o estadios:
Trofozoito Quiste. AMEBAS Clase: Rhizopodos Familia: Entamoebidae Gnero: Entamoeba Se divide en cuatro grupos: Histolytica Coli Bovis Gingivalis. Grupo histolytica:
Entamoeba histolytica E. dispar E. hartmanni E. moshkovskii. Epidemiolga Segn la OMS, hay 50 millones de nuevas infecciones y 70.000 muertes por ao. La disentera amebiana se presenta frecuentemente en pases tropicales aunque tambin hay casos en las zonas templadas y fras. Reservorio el hombre y otros primates, perros y gatos en menor medida. Los quistes son resistentes, sobreviviendo varias semanas, pero mueren a alta temperatura o con agua caliente, y son sensibles a la desecacin. La infeccin ocurre por contaminacin del agua, vegetales, frutas u otros alimentos crudos mal lavados o mal cocinados con quistes infecciosos provenientes de heces contaminadas.
Entoameba Histolytica Gnero: Entoameba Especie: Histoytica Es una ameba patgena del intestino del humano, que produce un cuadro llamado amebosis o amebiasis. MORFOLOGA TROFOZOITO El trofozoto observable en materia fecal es ms pequeo (7-30 ) que las formas tisulares (20-60 ). Presenta movimientos direccionales, con un extremo anterior romo que forma pseudpodos y un extremo posterior donde se observa un uroide con un penacho de filopodios. En el citoplasma existe un citoesqueleto formado por microfilamentos de actina y miosina. Aparato de Golgi ausente, reemplazado por un sistema vacuolar, formado por una red de canales y vacuolas digestivas en cuyo interior se encuentra la fosfatasa cida y las nucleotidasas. Tambin ribosomas y varias inclusiones de distinta naturaleza. Ncleo con endosoma en posicin central y cromatina perifrica regularmente distribuida. MORFOLOGIA DEL QUISTE Redondeado, de 10-20 , tetranucleado en su forma madura. Los quistes jvenes suelen contener masas de glucgeno y cuerpos cromatoides, estos ltimos representan agregados ribosomales cristalinos y son de extremos romos o redondeados. CICLO VITAL E INFECCIN
Fisiologa Entamoeba histolytica se alimento del bolo alimentario, bacterias intestinales, lquidos intracelulares de las clulas que destruye y adems, a veces fagocita eritrocitos. Tiene protenas membranales capaces de formar poros en las membranas de las clulas humanas, destruyndolas por choque osmtico, y adhesinas que le permite fijarse a las clulas de la mucosa, de modo que no sean arrastradas por la diarrea. Adems, producen enzimas proteasas de cistena, que degradan el medio extracelular humano, permitindole invadir otros Patogenicidad Algunas cepas son altamente patgenas, y la infeccin generalmente no genera inmunidad posterior. La patogenicidad est dada por factores del parsito y del hospedador. Entre los factores del parsito se cuentan: Presencia de adhesinas Capacidad citoltica, por accin de cisten-proteasas, Entre los factores del hospedador : La flora intestinal, El rgimen alimentario, El grado de resistencia inmunitaria, La presencia de afecciones intercurrentes, Existencia o no de tratamientos inmunosupresores. Gran parte del armamento enzimtico que se estima que emplea Entamoeba histolytica. Actividad colagenasa. Los trofozotos tienen propiedades secretoras bioqumicas con actividad de proteasas, que degradan el colgeno, como en el tejido heptico, 4 pudiendo ser ese uno de los mtodos para la formacin de los abscesos hepticos. Enzimas proteolticas. Adems de colagenasas, se ha demostrado la accin de una enzima citotxica muy parecida a la catepsina B llamada EhCP112, 5 implicada en la disolucin de la matriz intercelular que mantiene unidas las clulas de la mucosa epitelial. Tiene tambin un efecto destructivo en contra de ciertas clulas en el cuerpo leucocitarias. Protenas formadoras de poros. La produccin de estas molculas ocasionan lisis en la clula diana por medio de cambios osmticos. Sustancias neurohormonales. Se les ha culpado de conferir a ciertas cepas la facultad de crear disturbios en el transporte intestinal de electrolitos, cualidad de las diarreas perdedoras de volumen.
Absceso heptico Amebiano Relacin Hombre/mujer 10:1 Edad promedio 18 50 aos Principal localizacin en lbulo derecho Viajes a reas endmicas (2 5 meses) Clnica Aguda: <10 das de sintomatologa Clnica Crnica: > 2 semanas hasta 6 meses Sntomas: Dolor Abdominal, Fiebre, peso, anorexia, hepatomegallia, ictericia. Diagnstico Directo: Visualizacin de trofozotos o quistes en heces.
Indirecto: deteccin de antgenos en heces, serologa (HAI, IEF, CIE, IFI, EIA).
Tambin se pueden detectar cepas patgenas por PCR a partir de heces Tratamiento - Metronidazol Mecanismo de accin: Al entrar en el interior de la clula, es reducido por el metabolismo intracelular (protenas de transporte electrnico). Debido a esta alteracin de la molcula de metronidazol, se mantiene un gradiente de concentraciones que promueve el transporte intracelular del frmaco. Los radicales libres formados interaccionan con el ADN celular produciendo una prdida de la estructura helicoidal, rotura de la cadena con la inhibicin resultante de la sntesis de cidos nuclicos y muerte celular. DOSIS: 30 mg/kg/da por 10 das EFECTOS ADVERSOS Frecuentes: nuseas, boca seca, sabor metlico Menos frecuentes: vmitos, diarrea, insomnio, debilidad, mareos, estomatitis, disuria, orina oscura, vrtigo, ataxia, leucopenia. (e.v. puede dar convulsiones o neuropata perifrica) Intolerancia al alcohol por inhibicin de la aldehdo deshidrogenasa (antabus) Potencial carcingeno en estudios preclinicos Evtar 1 trimestre embarazo, lactancia suspender h/24 hs despus Potencia el efecto de la warfarina INTERACCIONES Fenobarbital y Rifampicina Anticidos Alcohol Eritromicina y cimetidina Entoameba Coli Gnero: Entoameba Grupo: Coli Es una ameba patgena del intestino del humano, que produce un cuadro llamado amebosis o amebiasis. EPIDEMIOLOGA E. coli es de distribucin mundial, y no es patgena, por lo que no requiere tratamiento. Se localiza en el intestino grueso del hombre y otros primates. La transmisin es fecal-oral, directa, de persona a persona o de animal a persona, o indirecta, por agua, alimentos, manos o utensilios contaminados. MORFOLOGA Trofozoto: 15-50, de movimientos lentos. Uninucleado, ncleo con cromatina nuclear perifrica irregularmente distribuida, y cariosoma ms bien excntrico. Quiste: 15-22 . En su estado maduro posee 8 ncleos En l se observan cuerpos cromatoides en forma de bastn con extremos aguzados y una vacuola de glucgeno. Patognesis E. coli se transmite en forma de quiste viable que llega a la boca por contaminacin fecal y se deglute. Es un parsito de la luz intestinal (intestino grueso). No patgeno y no produce sntomas. Diagnstico E. coli hay que distinguirla de otras amebas patgenas como Entamoeba histolytica y/o E. dispar. El diagnstico se realiza mediante un anlisis directo de las heces, mtodos de concentracin y/o tinciones especiales (tricrmica, hematoxilina frrica, entre otras).
Blastocystis Hominis Familia : Blastocystidae Es un sarcomastigforo, capaz de producir un cuadro denominado blastocistosis. Es un organismo ameboide que presenta forma qustica y trofozoto. ste, a su vez, presenta tres fases: vacuolar, ameboide y granular. EPIDEMIOLOGA Es de distribucin cosmopolita y puede ser ms frecuente en zonas tropicales y subtropicales. La transmisin, si bien no est totalmente esclarecida, es indudablemente fecal-oral, Desempea un papel importante la contaminacin del agua y los alimentos. No hay estudios que determinen si B. hominis puede encontrarse en otros mamferos. MORFOLOGA Forma vacuolar. Es la forma tpica de la clula de Blastocystis en los cultivos, utilizada a menudo en la identificacin del organismo. La forma vacuolar vara mucho en tamao, con dimetros que oscilan entre 2 y 200 m. Se denomina tambin forma central porque presenta una gran vacuola central rodeada de una estrecha banda perifrica de citoplasma que contiene otros orgnulos. Se observa material amorfo esparcido de manera desigual por toda la vacuola. Forma granular. Es hasta cierto punto morfolgicamente similar a la forma vacuolar, salvo que se observan distintos grnulos en la vacuola central y/o en el citoplasma. Forma amoeboide. Esta forma es inmvil y fuertemente adhesiva. Un estudio de investigacin ha informado que la forma ameboide se produce slo en cultivos tomados de individuos sintomticos, mientras que la forma vacuolar se aisla exclusivamente de individuos asintomticos. Quiste: Presenta un gruesa pared de varias capas y, en comparacin con las otras formas, generalmente es ms pequea. Carece de vacuola central, pero se observan algunos ncleos, mltiples vacuolas y grnulos de reserva. El quiste es la forma ms resistente del parsito y es capaz de sobrevivir a condiciones muy duras debido a las mltiples capas de la pared. Los experimentos que se han llevado a cabo han mostrado su capacidad para soportar los cidos gstricos, no se abren cuando se colocan en agua destilada y pueden sobrevivir a temperatura ambiente durante un mximo de 19 das. 7
8 En otro experimento el quiste fue capaz de sobrevivir en un medio de cultivo conteniendo drogas antiprotozoales CICLO VITAL PATOGENICIDAD Para que sea considerado como agente etiolgico de un cuadro clnico de enteritis o colitis, debe ser el nico germen detectado en los exmenes de heces, una vez descartada una posible etiologa bacteriana o viral y otras no infecciosas. Aparentemente no tiene accin citoptica y tampoco invade la mucosa intestinal, aunque puede haber edema e inflamacin. SINTOMATOLOGIA Los principales sntomas de la infeccin por B. hominis son: dolor y distensin abdominal, alternancia de diarrea y constipacin, vmitos, fatiga y anorexia. La intensidad de la sintomatologa se correlaciona positivamente con la carga parasitaria. Puede haber cuadros agudos o crnicos. Agudos: con diarrea, dolor y distensin, 1 a 25 evacuaciones diarias, heces lquidas, ocasionalmente con sangre y con muchos parsitos. Duran de 3 a 10 das. Crnicos: diarrea y dolor persistentes por semanas o meses, relacionados con sndrome de colon irritable y enfermedad inflamatoria del colon. Algunos autores sugieren que B. hominis se comporta como oportunista en sujetos inmunodeprimidos, pero otros lo niegan. Existe relacin entre el parsito y pacientes con enfermedades de evolucin crnica, y en pacientes con VIH/SIDA la blastocistosis si bien no es ms frecuente, es ms grave. Parece entonces prudente considerarlo como un patgeno potencial. DIAGNOSTICO La fase ms frecuentemente observada es la vacuolar, la identificacin de quistes es ms difcil porque son muy pequeos, ms escasos, y adems, al ser de descripcin reciente (ao 1988), suele faltar experiencia de los microscopistas. Se utiliza tincin con lugol, tinta china (no lo colorea, limita su periferia), y tinciones permanentes como tricrmico y Giemsa. ACANTHAMOEBA Uno de los protistas ms comunes del suelo y tambin frecuentes en agua dulce y otros hbitats. Las clulas son pequeas, usualmente de 15 a 35 m de longitud y de forma oval o triangular cuando se mueven. Los seudpodos forman un claro lbulo semiesfrico en la parte anterior y tiene varias extensiones filosas cortas a los lados del cuerpo ESPECIES A. castellanii, A polyphaga, A. hatchetti, A. culbertsoni. A. rhysodes, A. griffini, A. quina, A. lugdunensis MORFOLOGA Los trofozotos se presentan ameboideos, poco mviles y de unos 25 a 35 m, se movilizan a travs de finos seudpodos de aspecto acicular. El quiste mide entre 15 a 20 m y contiene una doble pared, la cual se forma cuando las condiciones del medio ambiente no son adecuadas. CICLO VITAL
Patogenicidad En pacientes inmunocomprometidos se ha descrito compromiso neurolgico como la meningoencefalitis granulomatosa amebiana (MGA) y cuadros cutneos. En pacientes inmunocompetentes seobservan cuadros de queratitis DIAGNSTICO Para la deteccin de Acanthamoeba en un lente de contacto en el laboratorio, se usa una placa de agar sangre de carnero con una capa (sustracto) de E. coli. Parte de la lente de contacto se coloca sobre la placa agar. Si estn presentes Acanthamoeba, se alimentarn de las bacterias, dejando una marca clara alrededor del rea en la que est la lente Recogida de la muestra Tcnica de histopatologa Tcnicas de cultivo Determinacin in vitro de la sensibilidad de las cepas Microscopa confocal in vivo Queratitis por Acanthamoeba La queratitis por Acanthamoeba es una enfermedad producida por la invasin de la crnea del ojo por amebas del gnero Acanthamoeba. 1
La infeccin se ve favorecida por diferentes circunstancias, como la exposicin a agua contaminada a temperatura templada, los traumatismos sobre la crnea o los cuerpos extraos en el ojo. Sin embargo el factor ms frecuentemente implicado es la utilizacin de lentes de contacto que actan como fuente de infeccin, sobre todo si no se desinfectan adecuadamente ni con la frecuencia recomendada, o se utilizan en piscinas durante el bao. 1
Clnica Al principio los sntomas son leves y las amebas colonizan nicamente la parte ms superficial de la crnea o epitelio. Poco a poco el proceso empeora y los microorganismos invaden capas ms profundas de la crnea, produciendo lceras en la misma que se acompaan de sntomas llamativos como dolor en el ojo, lagrimeo, fotofobia y enrojecimiento ocular. Si la enfermedad sigue avanzando se producen complicaciones, como la presencia de pus en la cmara anterior del ojo (hipopion), uveitis, elevacin de la presin intraocular (glaucoma), visin borrosa, catarata e infecciones secundarias por otros grmenes. En casos muy graves se deteriora considerablemente la capacidad visual. Diagnstico Para establecer el diagnostico de certeza es preciso obtener una muestra de raspado corneal que se enviar al laboratorio de microbiologa, donde se proceder a observarla directamente con el microscopio a bajo aumento. En caso de que no se observen Acanthamoeba , debe procederse a realizar un cultivo en medios especiales que debe observarse peridicamente durante al menos 6 semanas, pues a veces se demora ese tiempo la proliferacin de los protozoos en nmero suficiente para ser visibles. Puede ser til la toma de muestras de la propia lentilla o del lquido que se ha utilizado para su limpieza, con objeto de determinar si se encuentran contaminados
TRATAMIENTO Tratamiento antiamebiano por va tpica con diamidinas y biguanidas Otros tratamientos antiamebianos por va tpica y sistmica Corticoides tpicos. La utilizacin de 2 o 3 biocidas combinados es la mejor alternativa. Se han utilizado: Isetionato de propamidina, polihexametilen- biguanida (PHMB), gluconato de clorhexidina, isetionato de hexamidina, (Brolene), clotrimazol, ketoconazol, miconazol, itraconazol, otros.