Bacilos Gram positivos formadores de esporas

Bacillus
Clostridium

Blga. Jessie De la Cruz Lazo

Gnero Bacillus
Bacilos Gram positivos Aerobios, grandes agrupados en cadenas Presentan esporas Muy resistentes a condiciones adversas La mayora son saprofitos Son productoras de antibiticos (polimixinas, bacitracina), vitaminas, alcoholes y enzimas

Especies
Bacillus cereus

Bacillus subtilis

Bacillus anthracis

Bacillus anthracis
Produce carbunco:
Cutneo (anthrax) Respiratorio Gastrointestinal

Caractersticas
Bacilo grande recto 3 a 5um x 1 a 1,2 um Gram + Formador de esporas Extremos rectangulares Catalasa +, inmvil.

Cadenas largas en medios de cultivo. La espora es elipsoidal, central No deforma al soma bacteriano

Patogenia Bacillus anthracis

Piel o mucosas lesionadas en el hombre
Germinan en el tejido Crecimiento de clulas vegetativas Edema gelatinoso Esporas Multiplicacin - Diseminacin

Liberacin de la toxina

Carbunco cutneo
pstula maligna Edema Necrosis Hemorragia

Patogenia Bacillus anthracis

Carbunco Pulmonar
Aspiracin pulmonar Germinacin en Los pulmones o ganglios linfticos traqueobronquiales Esporas

Carbunco Digestivo
Ingestin

Germinacin mucosa Intestinal digestiva

Linfticos mesentricos

Mediastinitis hemorrgica Neumona, meningitis y septicemia

Adenitis hemorrgica

Determinantes de patogenicidad
Espora, diseminacin del MO Cpsula, Actividad antifagocitica y su produccin es regulada por un plsmido Exotoxina, depende de un plsmido, tipo A B.
AP Actuacin Sinrgica Unin a los receptores de las clulas del husped

FE

Activa la adenilciclasa (reaccin edematosa)

FL

Efecto letal

Estructura Antignica
ESTRUCTURALES Antgeno Capsular Exotoxina

Polipeptido de Ac. D.glutmico

Especificidad nica

Carcter antifagocitario

Factor edematgeno (FE) Factor Letal (FL) Antgeno protector (AP)

Medios enriquecidos con suero en atm CO2

COLONIAS MUCOSA

Diagnstico Muestras: de pus y lquidos de la lesin local Frotis teidos: de la lesin local o de la sangre de animales muertos Cultivo
En placas de gelosa sangre: colonias grises no hemolticas Medio semislido, es inmvil Prueba de ASCOLI, extractos de tejidos muestran anillo precipitado Pruebas serolgicas Anticuerpos

Tratamiento En el hombre debe ser iniciado rpidamente Penicilina Tetraciclinas Eritromicina Clindamicina
Epidemiologa y Prevencin Cadveres de animales muertos (suelo) Hombre infecta por contacto Medidas sanitarias Inmunizacin con vacunas del bacilo vivo atenuado. Uso de guantes y mascarillas

Bacillus cereus
Emtico Incubacin: 6 h

Envenenamiento alimentario
Diarreico Incubacin: 1 a 24 h

Intoxicacin

Enterotoxina

Gnero Clostridium
Est formado por un grupo heterogneo de bacilos grampositivos, anaerobios, esporulados Est ampliamente distribuido en el ambiente y en el tracto intestinal de muchas especies animales incluido el hombre, y puede causar infecciones de origen exgeno y de origen endgeno Especies ms frecuentes: Clostridium botulinum, Clostridium difficile, Clostridium perfringens, Clostridium tetani. Algunos tienen capacidad de producir potentes exotoxinas que son las responsables de ocasionar graves cuadros txicos

Caractersticas microbiolgicas de los Clostridium

C. perfringes

C. botulinum

C. difficile

C. Tetani

Tincin de Gramb

Colonia

Clostridium baratii

Bacilo grande. Esporas (ST), RV. No mvil

No hemoltica

C. bifermentans
C. botulinum C. butyricum C. cadaveris C. clostridioforme C. difficile

Bacilo grande. Esporas ovales (ST) a veces en cadenas. Mvil

Bacilo grande. Esporas (ST). Mvil Extremos redondeados. Grandes esporas ovales (ST). Mvil Esporas ovales (T) Gramnegativo. Alargado con extremos en forma de huso y apariencia de barril. Esporas RV Bacilo relativamente largo, delgado. Esporas ovales (T). Mvil

Gris, borde irregulares, hemlisis pequea. Lecitina (+)

Pequeas, convexas, translcidas con la superficie moteada o de mosaico Colonias translcidas ligeramente elevadas y con moteado cristalino. Olor a establo o estircol. En medio CCFA amarillentas. Fluorescencia anaranjada bajo luz ultravioleta. Lisas y rugosas. Aerotolerante Blanca, brillante. Fluorescencia anaranjada. Gris, translcida. Puede dar velo. Doble halo de hemlisis. Grande, opaca, tiende a extenderse, sin velo. Doble halo de hemlisis. Fluorescencia roja Cabeza de medusa con bordes irregulares y rizoides. Produce velo que llega a cubrir la placa

C. histolyticum C. inocuum C. novyi C. perfringens C. ramosum C. septicum

Pleomrfico. Esporas ovales (ST). Mvil Pequeo. Esporas (ST). No mvil Mediano. Esporas ovales (ST). Mvil Ancho y corto. Apariencia de ladrillo. Esporas RV. No mvil Frecuentemente gramnegativo. Delgado y pleomrfico, en cadenas. Esporas redondas u ovales (T) y RV. No mvil Largos y delgados, pleomrfico y filamentoso. Puede formar cadenas. Esporas ovales (ST). Mvil

C. sporogenes
C. sordelli C. tertium C. tetani

Filamentoso en cultivos viejos. Esporas ovales (ST). Mvil

Rectos. Esporas centrales o (ST) causan ligera hinchazn de los bacilos y frecuentemente libres. Mvil Esporas grandes ovales (T). Mvil Delgado. Esporas redondas (T). Apariencia de palillo de tambor. Mvil

Borde rizoide. Adherencia firme al agar. Produce velo

Velo o extensin Pequea, brillante. Aerotolerante Gris, translcida. Borde irregular. Pequeo halo de hemlisis.

Clostridium tetani
Produce Ttanos Aparicin de contracturas musculares Caractersticas Bacilos fino grampositivo, esporulado, mvil, acapsulado y anaerobio estricto. Presentan flagelos peritricos Escasa actividad metablica (no son sacarolticos, ni proteolticos). No Invasiva. Sintetiza las toxinas: Tetanospasmina y Tetanolisina (hemolisina oxigeno lbil) Se encuentra en el ambiente.

Las esporas son esfricas, terminales y deforman a soma bacteriano

Epidemiologa
Fuente de infeccin : Medio ambiente Trasmisin: Contaminacin de heridas por las esporas Poblacin de riesgo: No vacunada o vacunada incorrectamente.

Componentes Inmungenos
Componente Antignico Antgeno somtico (0) Antgeno flagelar (H) Caractersticas nico. Se usa como diagnstico (inmunofluorescencia directa) Proteico y termolbil. Permite clasificar al microorganismo en 10 serotipos nico y termolbil Idntica para todas las cepas del germen. Responsable del cuadro clnico Oxigeno-lbil

Antgeno esporal Neurotoxina

Hemolisina

Determinantes de patogenicidad
Por accin de un PLASMIDO

Toxoide
Sintetizada Durante el Crecimiento Exponencial

Por accin del formol

Se libera por autolisis celular

Toxina pasmognica (tetanospasmina)

Activada por proteasa endgena

Sinaptobrevina Toxina L

Hidroliza

Binaria H

Vacuna

Metaloenzima dependiente de Zn

Proceso de liberacin de los neurotransmisores

Transporte de la Neurotoxina Tetnica hasta su sitio de accin en el Sistema Nervioso.

La toxina tetnica se transporta a travs de los axones motores dentro de vesculas, e ingresa al sistema nervioso central por las races anteriores hasta alcanzar las astas anteriores de la mdula espinal donde se acumula en los somas de las neuronas motoras. De all, se libera retrgradamente para actuar sobre las interneuronas inhibitorias espinales

Despus de liberada por la bacteria, la toxina viaja por va linftica o circulatoria hasta llegar a la unin neuromuscular

Patogenia del Ttanos

Manifestaciones clnicas
Periodo de Incubacin: 4 das varias semanas Formas Clnicas:
Ttanos generalizado Ttanos localizado Ttanos Neonatal

Ttano Generalizado

Sntoma Inicial: contractura o espasmo de los msculos que rodean la puerta de entrada y trismus.

Ttano Local

La afectacin se limita a los msculos prximos a la puerta de entrada, por que la toxina se fija a las zonas medulares de los nervios que lo inervan. Puede evolucionara un ttano generalizado.

Ttano Neonatal

Tras un periodo de 7 das aparece dificultad o incapacidad de succin. Espasmos musculares, trismus e irritabilidad y rechazo a la limentacin.

Diagnstico
Directo Bacilos finos gram + o , con una espora esfrica deformante terminal Cultivo e identificacin Siembra en agar sangre anaerobiosis Muestra se somete a un calentamiento (10 min), para eliminar flora acompaante, se siembra e incuba.

Identificacin
Crecimiento de colonias en velo e inhibicin por la adicin de suero equino antitetnico a la mitad de la placa de cultivo. Presencia de formas muy finas en cultivos jvenes y en palillo de tambor en las viejas. Ausencia de actividad proteoltica y sacaroltica Produccin de Indol en la mayora de cepas. Anlisis por cromatografa gas lquido de los productos cidos voltiles de cadena corta del metabolismo Comprobacin de la produccin de toxina en prueba de proteccin en inoculacin animal

Tratamiento
Medidas de sostn Mantener funciones vitales y mitigar los sntomas clnicos hasta la eliminacin de la toxina del sistema nervioso Neutralizacin de la toxina Se administra Ig especfica o suero equino antitetnico. Eliminacin de la fuente de produccin de la toxina. Desbridizacin y drenaje. Trat. Antibitico con penicilina G, tetraciclinas o macrlidos.

Clostridium botulinum
Producen botulismo Debilidad muscular o parlisis flcida descendente y simtrica (por ingestin de alimentos con toxinas preformadas). Caractersticas Bacilos gram +, esporulados, mviles, acapsulados, anaerobios estrictos y producen toxinas Pueden ser proteolticas o no. Toxinas tienen 8 tipos inmunognicos (A H)

Las esporas son ovales, subterminales y distienden el soma bacteriano, con flagelos peritricos

Epidemiologa
Reservorio : Medio ambiente (telrico) Trasmisin: Ingestin y contaminacin de heridas por las esporas

INTOXICACION ALIMENTARIA

BOTULISMO DE HERIDAS

BOTULISMO DEL LACTANTE

Determinantes de patogenicidad
Citoplasma
Se acumulan en Se liberan por lisis

Toxoide

Neurotoxinas
Cadena proteica atoxica (protoxina o toxina progenitora)
Activada por enzimas proteolticas endgenas o exgenas

Son los venenos mas potente neuroparalticos

Toxina A

Binaria B

PATOGENIA DEL BOTULISMO

Botulismo de heridas Incubacin: 4 14 d Produce manifestaciones neurolgicas y de disfuncin autnoma, sin sntomas gastrointestinales.

Intoxicacin alimentaria Accin patgena Incubacin: 8 10 d Produce manifestaciones neurolgicas y de disfuncin autnoma

Botulismo del lactante Incubacin: 8 10 d Produce estreimiento y manifestaciones neurolgicas (dificultad en la alimentacin: succin, deglucin). Debilidad muscular e hipotona

Diagnstico
Muestras: alimento sospechoso, heces, material de origen digestivo, exudados de heridas y tejidos Presencia de la Toxina Prueba de neutralizacin en el ratn. PCR Tcnica inmunoenzimatica Cultivo Tratamiento trmico o con alcohol para enriquecer la muestra Medio no selectivo (agar yema de huevo) y selectivos.

Tratamiento
Neutralizar o eliminar la toxina Induccin del vmito o lavado gstrico Antitoxina Trivalente (A, B, E) Mantener las funciones del husped Funcin respiratoria Desbridacin y drenaje de la herida

Administracin de Antimicrobianos No debe administrarse en casos de formas vegetativas en el intestino

Clostridium perfringes
Produce la gangrena gaseosa, celulitis, Tosxiinfecciones alimentarias, enteritis necrosante, diarreas enterotoxicasno relacionada con alimentos e infecciones inespecficas. Bacilo Gram+, capsulado, esporulado, inmbil y anaerobio poco estricto. Metablicamente activo: es sacaroltico y produce gas (H2 y CO2) Se divide en 5 tipos: A, B, C, D, E. (toxinas: alfa, beta, psilon, iota) En el hombre se da el tipo A (parte de la flora normal del suelo y del intestino de animales).

Bacilo corto y ancho, no suele aparecer esporulado

Epidemiologa
Los pacientes con enfermedades vasculares subyacentes son ms propensos a manifestar gangrena gaseosa espontneamente, la cual es de progresin rpida y con frecuencia mortal.

Determinantes de patogenicidad
12 Toxinas Histotoxicas Son exotoxinas proteicas, antignicas y solubles

Infecciones humanas (tipo A, alfa es letal dermonecrtica y hemoltica)

Enterotoxina

Tiene accin en el leon. Estimula la secrecin de agua y electrolitos.

Acta:

Enzimas

Neuraminidasa Colagenasa Hialuronidasa Desoxirribonucleasa

Fosfolipasa C y Esfingomielasa

Gangrena gaseosa Destruccin muscular progresiva y toxemia Incubacin 1-4 d

Accin Patgena

Celulitis necrotizante y fascitis difusas Se produce en tejidos blandos

Intoxicacin alimentaria Incubacin 8 24 h Dolor abdominal y diarrea acuosa sin sangre o moco Se mantiene 12 18 horas Desaparece espontneamente

Diagnstico
Tincin Gram Hay ausencia de PMN (destruidos por la toxina alfa) Cultivo en agar sangre y agar yema de huevo en anaerobiosis Actividad lecitinsica se inhibe aadiendo antisuero a la mitad de la placa (prueba Nagler) Tecnicas serolgicas para presencia de toxina en heces

Produce una doble hemlisis (una interna mas intensa tox. beta y una externa menos intensa tox. alfa

Tratamiento
Medidas quirrgicas Practica de fasciotomias favorece la irrigacin muscular Tratamiento antibiotico con Penicilina G, clindamicina o metronidazol, imipenem, meropenem Oxigeno Hiperbrico (puro a 3 atm)

Clostridium difficile
Produce Entercolitis seudomembranosa Bacilo Gram+, esporulado, mvil, capsulado y anaerobio Sintetiza dos toxinas: A (enterotoxina) y B( citotoxina) Se encuentra en heces de neonatos y lactantes (70%) Son susceptibles a la infeccin los ancianos y pacientes con administracin de antimicrobianos.

Espora oval y subterminal

Esporas y celulas vegetativas de Clostridium difficile son ingestadas

Rectosigmoidoscopia
Muchas celuas vegetativas son eliminadas en el estmago, pero las esporas superviven a los cidos del ambiente

C. Difficile se multiplica en el colon

Accin patgena Produce diarreas asociada a antimicrobianos Por su espora produce una colonizacin persistente Hay diarrea sanguinolenta retortijones, leucocitosis y fiebre

Las esporas de C. difficile germinan en el intestino delgado sobre la exposicion a los acidos biliares

Los flagelos facilitan el movimiento del C. difficile, un polisacrido de la cpsula inhibe la fagocitosis

La mucosa de los intestinos facilita la adherencia para colonizar el epitelio

Accin de la Toxina A en C. difficile

Bacilos Gram positivos no formadores de esporas

Corynebacterium Propionibacterium Listeria

Corynebacterium diphteriae
Produce la Difteria Caractersticas Bacilos Gram positivos, 05 1 um dimetro (pleomrficos) Son aerobios Catalasa positivos Tienen los biotipos: Gravis, Intermedius, Mitis Reservorio: hombre portador u enfermo Puede resistir la desecacin y la luz por 3 meses Sensibles al calor y desinfectantes habituales

Presentan dilataciones irregulares caractersticas e uno de sus polos

Patogenia de C. diphtheriae
Difteria respiratoria La puerta de entrada puede ser va mucosas (nasal, palatina, amigdalar o faringea) Tipos:
Faringoamigdalar Nasal Laringea y traqueobronquial Conjuntival, vaginal y oido (excepcional)
Secretan la toxina

Patogenia de C. diphtheriae
Difteria cutnea En rea tropicales A veces puede ser transmitido por picadura de algn insecto
Secretan la toxina

seudomembrana

Toxina Diftrica
Fragmento A Inhibe la elongacin de la cadena polipeptidica Fragmento B Carece de actividad independiente

EF-2 Inactiva

NAD

Corynebacterium diphteriae
Factores de virulencia Exotoxina (inhibe la sntesis proteica y ocasiona destruccin de clulas del husped)
Se forma por la presencia de un bacteriofago lisognico tipo beta (tox+) Produce en la zona inflamada una pseudomembrana

Antgeno O Antgeno K (antifagocitico)

Corynebacterium diphteriae
Diagnstico: Muestra de la zona inflamada hisopo o raspado Medios de cultivo Suero coagulado (Loeffler), colonias pequeas granulares y grisceas. Placa Gelosa sangre + telurito, colonias son grises a negras. Pruebas de virulencia Deteccin de la toxina por inmunodifusin (Placas de agar Test Elek)

Pruebas de virulencia (toxigenicidad)

Prueba in vivo
Toxigenas

Cepas

Atoxigenas
De un bacilo toxigeno

Prueba in vitro
Subcultivos seriados Antisuero especfico Prueba de contra fagos cultivo de tejidos temperados

TOXIGENAS y LISOGENA

ATOXIGENAS

HERENCIA

Tratamiento
Rpida supresin de bacterias productoras de toxinas por frmacos
Penicilina Eritromicina

Administracin temprana de la antitoxina diftrica (toxoide) o antisuero Prevencin: inmunizacin activa (toxoides lquido, toxoide para absorcin retardada)

Propioniobacterium
Es parte de la flora normal cutnea y conjuntiva Son bacilos Gram +, no esporulados Son anaerobios

Acn vulgaris
Participan en la patogenia del acn (P. acnes) al producir lipasas, liberando ac. grasos de los lpidos cutneos. Los ac. Grasos pueden causar inflamacin tisular y contribuir al acn. Puede producir infeccin en vvulas cardiacas y de derivaciones artificiales de LCR.

Listeria monocytogenes
Produce Listeriosis en humanos Cocobacilos Gram positivos Anaerobio facultativo Catalasa positivo Presenta antgeno O y antgeno H (16 serovariedades) Es mvil, (flagelos peritricos) Se transmite con los alimentos

Ciclo de la Listeria monocytogenes

Es un patgeno intracelular Factores de virulencia: presenta factores antifagocticos de superficie, adhesinas, hemolisina (toxina citoltica, catalasa y superoxido dismutasa, filamentos de actina y siderforo).
a) Penetra

b) sobrevive

c) Se multiplica

Listeria monocytogenes
Es de alto riesgo en inmunodeprimidos (neonatos, ancianos, transplantados, diabticos), enfermos de SIDA. Viven en el suelo, agua, plantas, heces de animales y el hombre. Se trasmiten por contacto directo (piel conjuntiva ocular) con animales o materiales infectados: va placentaria y por el canal del parto, va digestiva con alimentos contaminados. Tratamiento: Ampicilina (penicilina + aminoglucsido), gentamicina (granulomatosis infantil sptica), cotrimoxasol (en alergicos)

Diagnstico:
Listeria monocytogenes
Diagnstico directo: Tincin Gram Diagnstico indirecto:
Muestras: sangre, lquido amnitico, secreciones de tracto genital, LCR, heces Medio Selectivo: Agar Triptosa (colonia verde azul) o Agar sangre de carnero. (crece entre 0 -50 C, normal 30 37 C) Prueba bioqumica: es oxidasa negativa y catalasa positiva