PRCTICA 12: HIDRLISIS DE UNA

PROTENA Y ENSAYOS PARA PROTENAS Y

AMINOCIDOS.

OBJETIVOS GENERALES

Efectuarla hidrlisis total de una protena.

Identificar algunos aminocido presentes en un hidrolizado de protena, por medio de sus propiedades fsico-qumicas. Identificar por cromatografa en placa fina algunos de los aminocidos presentes en un hidrolizado de protena.

OBJETIVOS PARTICULARES

Se realizar una hidrlisis cida a la grenetina para descomponerla en sus aminocidos. Por medio de diferentes reacciones se realizar la identificacin de los aminocidos obtenidos. A travs de la tcnica de cromatografa en placa fina se realizar la separacin e identificacin de algunos aminocidos.

FUNDAMENTOS TERICOS

AMINOCIDOS
Son molculas orgnicas que tienen dos grupos funcionales: Grupo amino bsico Grupo carboxilo cido

Los aminocidos pueden asociarse en grandes cadenas formando enlaces amida entre la amina de un aminocido y el cido carboxlico de otro. De esta forma se estructuran: Pptidos: Cadenas de menos de 50 aminocidos. Protenas: Cadenas con ms de 50 aminocidos.

EL ZWITTERION
Ya que hay un grupo cido y uno bsico en el aminocido presentan una reaccin acido base presentndose en la forma de un ion dipolar llamado zwitterion (del alemn "zwitter" "hbrido", "hermafrodita")

CARACTERISTICAS DEL ZWITTERION

MOMENTOS DIPOLARES GRANDES

SOLUBLES EN AGUA

SUSTANCIAS CRISTALINAS

PUNTOS DE FUSIN ALTOS

TIENEN COMPORTAMIENTO ANFOTRICO

ACCIN REGULADORA DE LOS AMINOCIDOS

ANFTEROS: Reacciona con cidos o con bases, ya
que contiene ambos iones: Carboxlico ( -CO2-) y el amonio (-NH3+). Catin

Anin

Los aminocidos se clasifican en: Aminocidos cidos: Tienen cadenas laterales con grupos carboxilos. cido
o

glutmico

Aminocidos bsicos : Tienen cadenas laterales con grupos amino.

Lisina

Aminocidos neutros: El resto de los aminocidos.

Polares:
Serina

No polares:

Valina

AMINOCIDOS

ESENCIALES

NO ESENCIALES

Deben ser adquiridos en la dieta

Son sintetizados en el cuerpo

PROTENAS
Son grandes molculas orgnicas formadas por una larga cadena de aminocidos. Las protenas se clasifican de acuerdo a su: Funcin. Estructura.

FUNCIN

FIBROSAS O ESTRUCTURALES

CONJUGADAS

GLOBULARES

Funcionan como materiales estructurales. Tienen funciones de proteccin y movimiento. Queratina. Colgeno

No solo estn formadas por aminocidos, tienen otros componentes orgnicos o inorgnicos llamado grupo prosttico. Lipoprotenas (fosfolpidos, colesterol, etc.) Glucoprotenas (carbohidratos) Fosfoprotenas (cido fosfrico)

Esferoidales o compactas. Enzimas Protenas de transporte.

SECUNDARIA

TERCIARIA

CUATERNARIA PRIMARIA

ESTRUCTURA

HIDRLISIS DE UNA PROTENA

Hidrlisis

Bsica

cida

Enzimtica

DESNATURALIZACIN DE PROTENAS
La desnaturalizacin de las protenas es una desorganizacin en la conformacin nativa de las protenas, lo cual provoca la prdida de su actividad biolgica. L desnaturalizacin es causada por pequeas cantidades de energa, cambios ambientales o tratamientos qumicos. A las protenas que se encuentran en su estado natural se llaman protenas nativas, y despus de haber sido sometidas al cambio se les llama protenas desnaturalizadas.

GRENETINA

Hidroxiprolina 13.1% Prolina 17.0% Glicina 23.5% Alanina 7.7% Valina 2.5% Leucina 3.2% Isoleucina 1.4% Cistina y Cisteina 0.1% Metionina 1% Fenilalanina 2.2% Treonina 0.9% Serina 0.4% Tirosina 0.5% Acido asprtico 5.6% Acido glutmico 10% Arginina 7.1% Lisina 3% Histidina 0.8%

LA CLARA DE HUEVO

ALBMINA (OVOALBMINA)
Es la protena ms importante de la clara de huevo y representa ms de la mitad del contenido proteico. Se desnaturaliza fcilmente por agitacin o batido, presenta relativa estabilidad ante el calor . Es rica en cistena y metionina.

PARTE EXPERIMENTAL

PREPARACIN DE SOLUCIONES

I. HIDRLISIS DE GRENETINA

*HCl *Carbono activado

MECANISMO DE LA HIDRLISIS CIDA DE PROTENAS

II. SOLUCIN NEUTRALIZADA DE HIDROLIZADO DE GRENETINA

Se utilizar para : *Cromatografa *Prueba de ninhidrina *Accin reguladora de aminocidos

*NaOH

III.

SOLUCIN DE GRENETINA SIN HIDROLIZAR.

IV.

SOLUCIN DE ALBMINA

REACCIONES DE IDENTIFICACIN

1. REACCIN XANTOPROTICA

*HNO 3

1. MECANISMO DE LA REACCIN XANTOPROTICA

2. REACCIN DE PRECIPITACIN

3. REACCIN DE BIURET

3. REACCIN DE BIURET

SULFATO DE COBRE
0
Solido cristalino de color azul transparente. Formula qumica CuSO4 . 5H2O Solubilidad Fcilmente soluble en agua caliente

4. REACCIN CON NINHIDRINA

4. REACCIN CON NINHIDRINA

5. REACCIN CON CIDO NITROSO

*NaNO 2

5. REACCIN CON CIDO NITROSO

6. ACCIN REGULADORA DE AMINOCIDOS

ROJO CONGO

Estado fsico: slido Color: pardo rojizo

Olor: caracterstico
Valor pH a 10 g/l H2O (20 C) ~ 6.7

FENOLFTALENA

TEMPERATURA DE EBULLICIN, C: 264C SOLUBILIDAD EN AGUA, g/ml: No se dispone de informacin Insoluble en agua

ESTADO FSICO, COLOR Y OLOR:

Ninguna Solido, polvo amarillo sin olor.

7. CROMATOGRAFA EN PLACA FINA

BIBLIOGRAFA
Qumica Orgnica John McMurry editorial CENGAGE Learning 7 edicin pp: 592-561, 10731079. Tratado de Nutricin ngel Gil Hernndez 2 edicin tomo II. Pag: 90-92 Qumica orgnica moderna Roger W. Griffin JR. Pag 464-469. Ciencia de los polmeros Fred W. Billmeyer. JR. Editorial Revert. Pag 35-39