Está en la página 1de 40

Regulacin Hormonal del metabolismo de glucosa

Dra. Sobeida Snchez Nieto

Formas de regulacin del metabolismo


Cantidad de protena Isoenzimas

Nivel transcripcional o postranscripcional

Nivel postraduccional

Modificacin covalente de la protena Activadores o inhibidores de la actividad de la protena (alosterismo, inhibicin por producto, activadores metablicos)

Objetivos

Conocer la definicin de hormonas. Conocer que las hormonas son una forma de regulacin del metabolismo. Conocer los mecanismos de accin y transduccin de la seal por insulina: activacin de protenas cinasas y de protenas involucradas en transporte y metabolismo. Manejar un modelo experimental animal para medir el efecto de insulina sobre la toma de glucosa por diferentes tejidos. Analizar el efecto de un inhibidor de la cascada de transduccin de seales en el transporte de glucosa.

Qu tipo de seales se producen en la clula? nutrientes


a. Regulacin metablica ejemplo opern Lac

b. Transduccin de sensaciones nutrientes ejemplo quimiotaxis fuente

c. Comunicacin clula a clula

a
a

a a

ejemplo transmisin de informacin gentica en levaduras

Receptores y seales de transduccin

La habilidad para responder al ambiente y controlar la entra y salida a travs de la membrana es una de las caractersticas de cualquier clula. Material soluble en agua, iones, pequeas molculas inorgnicas, polipptidos y protenas no pueden entrar a la clula y para influenciarla, deben reaccionar con una protena en la membrana plasmtica. A estas molculas hidroflcas se les llama ligantes o ligandos y a la molcula en la membrana plasmtica receptor.

Principios de la transduccin de seales


Seal (ligante) Recepcin Amplificacin (segundo mensajero) Transduccin

Respuesta

Respuesta

Respuesta

Hormonas (Del griego hormon poner en movimiento)

Compuestos capaces de modificar la actividad celular de tejidos y rganos. Cualquier clula puede ser el blanco de estos compuestos siempre y cuando exista el RECEPTOR ESPECFICO para este en la clula. Sin embargo, algunos compuestos que son apolares pueden permear la membrana y no se unen a un receptor localizado en la membrana plasmtica.

Mensajeros celulares primarios (hidrofbicos)

La mayora de las hormonas son polares

Transduccin de seales

Al proceso que se lleva a cabo desde el momento de la activacin del receptor hasta la formacin del segundo mensajero se le llama transduccin, porque es la transformacin de un tipo de seal en otra; es decir, de seal extracelular a seal intracelular

Transduccin de seales

Segundo mensajero

Segundos mensajeros

Transmiten la informacin desde el complejo receptor-ligando. Consituyen el siguiente paso en el circuito molecular de la informacin. AMPc, GMPcclico, el in calcio, el inositol 1,4,5-trifosfato (IP3) y el diacilglicerol (DAG). Amplificadores de la seal

Consecuencias de la produccin de segundos mensajeros

Los segundos mensajeros difunden libremente a otros compartimentos celulares. La seal se amplifica, siempre se activan enzimas o conductos membranales. Existen mensajeros comunes para una seal y esto proporciona una conversacin cruzada (cross talk) entre diferentes vas de sealizacin

Amplificacin de la seal

Una sola molcula (hormona) puede llevar a un cambio importante en la concentracin de otras molculas

La fosforilacin de protenas
Forma habitual de transferir informacin

Ser, Thr, Tyr

Mantenimiento de la homeostasis sangunea

Siempre se debe mantener una concentracin de glucosa en sangre (alrededor 70mg/dL). Por arriba o por debajo de ese valor, las hormonas nos ayudarn a regresar al equilibrio.

La insulina

Hormona que facilita la captacin y utilizacin de la glucosa por los tejidos corporales, especialmente en los msculos y el tejido adiposo (tejidos insulino dependientes).

Estructura secundaria y cuaternaria de la insulina

La insulina es liberada al medio extracelular en un mecanismo dependiente de glucosa.

A) B)

C)

La insulina es una protena que se sintetiza como un prepropptido: Pptido seal Protena no funcional (preinsulina) Se libera mediante vesculas

Receptor de insulina

Receptor de insulina

A) B)

C)

Sitio o dominio de unin a insulina (extracelular) Dominio transmembranal Dominio intracelular: Sitio de unin a ATP Sitios de fosforilacin Sitios de activacin de cinasas.

Efectos de la insulina sobre los diferentes metabolismos


En general disminuye la concentracin de glucosa en sangre. Aumenta la sntesis proteica Disminuye la utilizacin de los cidos grasos
Estimulacin Inhibicin

Metabolismo

CHO

Protenas

Grasas

Ingreso a la clula Sntesis de glucgeno Gluclisis Ingreso de aminocidos a la clula Sntesis proteca Lipognesis

Glucogenolisis Gluconeognesis Catabolismo proteico Liplisis -Oxidacin cetognesis

Efectos de la insulina sobre el metabolismo energtico


Efecto Entrada de glucosa (msculo) Entrada de glucosa (hgado) Sntesis de Glucgeno (hgado, msculo) Glucolisis hasta AcetilCoA (hgado, msculo) Sntesis de Acidos Grasos (hgado) Sintesis de TAG (tejido adiposo) Degradacin de Glucgeno (hgado, msculo)

Enzima diana Transportador de glucosa Glucoquinasa Glucgeno sintasa PFK-1 y PyrDH AcetilCoA Carboxilasa Lipoproten lipasa Glucgeno fosforilasa

Reclutamiento de transportador de glucosa en la membrana plasmtica

ADP

Diferentes transportadores de glucosa en el mismo organismo (isoformas)


Nombre Distribucin Km (mmol/L) Tamao (aa) Otros GLUT1 Eritrocitos Feto Placenta Cerebro Hgado Rin Intestino Cerebro 5-7 492

GLUT2

7-20

524

GLUT3

1.6

496

GLUT4

Msculo Tejido Adiposo

509

Inducible por insulina

Problema experimental

Identificar el o los procesos mediante los cuales el hgado y el tejido adiposo contribuyen al efecto de la insulina, cuando la glucosa asciende en sangre a concentraciones equivalentes a las proporcionadas por una alta ingesta de carbohidratos.

Eventos celulares encendidos por insulina

Wormanina
Inhibidor de la fosfatidilinositol3-kinasa (PI3K) Se une de manera especfica al sitio de unin de ATP de la enzima

Solucin Krebs-Ringer

Generalmente una solucin amortiguada que contiene una gran cantidad de sales: 100 parts 0.9% NaCl (0.154M) 4 parts 1.15% KCl (0.154M) 3 parts 1.22% CaCl2 (0.11M) 1 part 2.11% KH2PO4 (0.154M) 1 part 3.8% MgSO4.7H2O (0.154M) 21 parts 1.3% NaHCO3 (gassed with 100% CO2 for 1 hour before adding to the other components), aunque puede sustituirse por 1 M HEPES pH 7.45. Adems se le pueden adicionar otros componentes como GLUCOSA

Procedimiento experimental: Incubacin del tejido con insulina

...

Determinacin de glucosa

Mtodo de Cobre-Arsenomolibdato en medio alcalino.

Realizar curva patrn de glucosa (STOCK 200ug/mL). Tubos 1 al 6. Determinar la concentracin de glucosa en los filtrados. Obtener la concentracin de glucosa, considerando que se usaron 2mL de filtrado y que originalmente tenan 50mL y no olvidar que ese valor depender de la cantidad de tejido que pusieron en cada matraz.

Curva patrn y muestras


Mezclar bien y colocar los tubos en agua en ebullicin por 10 min (tapar con canicas durante la ebullicin), enfriar en hielo y mezclar bien. Tubo
Tabla 6.1. Cantidades y orden en el que se realiza la cuantificacin de carbohidratos NH4(AsMoO4)2 200ug/mL Sobrenadantes H 2O RCuM (mL) Glucosa (mL) (mL) 1 2 3 4 5 6 I II III IV V VI W 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 2.0 1.9 1.8 1.7 1.6 1.5 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 H 2O (mL) Abs 520nm

4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0

Tejido

Curva patrn

Clculos

Glucosa inicial: Krebs-Ringer Glucosa

Glucosa residual

Enzimas del hgado que se ven afectadas por Insulina

Discusin

Efecto de la insulina en el hgado

Discusin

Una porcin grande de glucosa es absorbida por el intestino


delgado e inmediatamente es tomado por los hepatocitos, para almacenarlo en forma de glucgeno. Se activa la hexocinasa Inhibe la glucosa-6P fosfatasa Activa a la fosfofructocinasa and glycogen sintetasa.

El efecto neto es claro cuando hay abundante abasto de glucosa, la insulina le dice al hgado que guarde tanto sea posible para usarlo posteriormente.

En el tejido adiposo el efecto de insulina es...

Discusin

Abundante glucosa promueve la acumulacin de triacilgliceroles en el tejido adiposo Se inhibe la lipolisis

Efecto de insulina en la toma de glucosa en el msculo

Efecto de insulina en la sntesis de glucgeno en el msculo