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Coloraciones Tricrmicas

Seminario de Histoqumica Especial

Definicin
Coloraciones Tricrmicas

Coloraciones Tricrmicas
Las tcnicas tricrmicas se crean por la necesidad de detectar colgeno y msculo. Implican el uso de 3 colorantes, uno generalmente nuclear y otros dos citoplasmticos y/o extracelulares. Permiten como ventaja observar detalles que con las tcnicas corrientes no se distinguen (granulaciones, etc.) y dan colores intensos con contrastes muy marcados.

Coloraciones Tricrmicas
Se plantea que stas tinciones actan en base al tamao molecular del colorante. En funcin de la porosidad de los tejidos que permite el pasaje de las molculas del colorante tendremos mayor o menor penetracin del mismo.

Coloraciones Tricrmicas
son

Tinciones especiales que permiten visualizar claramente las fibras de colgeno tipo I. Las fibras de colgeno son componentes de los tejidos conectivos, caracterizados por poseer diferentes tipos de fibras y clulas contenidas en una sustancia fundamental.

Tienen funcin de Sostn, transporte, proteccin y tejidos conectivos especializados en su funcin, como la sangre, el tejido seo, cartlago y adiposo.

Clulas: fibroblastos, fibrocitos, adipocitos, linfocitos, plasmocitos, etc Matriz extracelular: fibras: colgenas, elsticas, sustancia fundamental: agua, electrolitos, glucosaminoglicanos, proteoglucanos.

Coloraciones Tricrmicas
1. Permeabilidad: el colgeno y los otros elementos acidfilos del tejido tienen distintos grados de permeabilidad al paso del colorante. Colorantes nucleares: laca de hematoxilina frrica Colorantes citoplasmticos: cido pcrico, orange G, escarlata Biebrich.

El fundamento de estas tinciones depende de varios factores.

Colorantes del conectivo: derivados del anillo trifenilmetano: fucsina cida, azul de anilina, verde luz SF.

por ello los colorantes utilizados para las diferentes tinciones tricrmicas se clasifican en:

Coloraciones Tricrmicas

2. Afinidad: Debido a los grupos catinicos presentes en las estructuras . por ello estas fibras tienen afinidad por los colorantes cidos que estn cargados negativamente.

3. Valor del pH a que se utiliza los colorantes: tienen mejor apetencia por las fibras colgenas.

4. Fenmenos de mordiente: estas sustancias actan como un vnculo entre el tejido y el colorante acrecentando la unin especfica entre ambos. Existen numerosos mordientes de distinta naturaleza, entre los ms importante: cidos: fosfotngstico, molbdico, crmico, pcrico.

Tricrmica de Masson

Tricrmica de Masson

Principio:

Coloracin utilizada en el tejido conectivo, para identificar clulas (fibroblastos, adipocitos, condrocitos, etc.) o fibras (colgeno, reticulina, elastina) y en algunas coloraciones hematolgicas seleccionadas.

Fijacin:

Lquido de Bouin o formol al 10%.

Microtoma:

Cortar secciones de parafina de 6 micrmetro de grosor.

Tricrmica de Masson
1. Desparafinar e hidratar hasta el agua destilada de manera habitual. 2. En material fijado en soluciones de formaldehdo o alcohlicas se recomienda hacer un mordentaje previo con lquido de Bouin durante 1 hora a 56-60 C o toda la noche a temperatura ambiente. 3. Enfriar y lavar en agua destilada hasta que desaparezca el color amarillo. 4. Teir con hematoxilina frrica durante 10 minutos. Lavar en agua corriente durante 10 minutos. 5. Lavar en agua destilada. 6. Teir con la solucin de escarlata-fucsina cida durante 2-5 minutos.

Tricrmica de Masson
7. Lavar en agua destilada. 8. Tratar con la solucin de cido fosfomolbdicofosfotngstico durante 10-15 minutos si se va a colorear con la solucin de azul de anilina, o en la solucin acuosa de cido fosfotngstico al 5% durante 15 minutos si se desea teir con verde luz. 9. Teir con solucin de azul de anilina 15 minutos o con solucin de verde luz 5 minutos. 10. Lavar en agua destilada. 11. Diferenciar en la solucin de cido actico al 1% durante 35 minutos. 12. Deshidratar, aclarar y montar.

Tricrmica de Masson
Resultados: Fibras de colgeno = Azul. Por tanto, el tejido conjuntivo se teir de dicho color. Estructuras oxidadas + Citoplasma = Rojo. Se teirn de rojo la queratina, los glbulos rojos y el tejido muscular. Ncleo celular = Lila, marrn.

Tricrmica de Masson

Fijacin: Lquido de Bouin o Formol al 10% Colorante nuclear: hematoxilina frrica. Colorante citoplasmtico: Escarlata de Biebrich-fuscina cida. Mordiente: cido fosfotngstico Coloracin de tejido conectivo: Light green / azul de anilina

Resultados: Ncleos Negro Citoplasma, queratina, fibras musculares y hemates Rojo Colgeno y reticulina Azul o verde.

Glomerulonefritis proliferativa endocapilar difusa aguda.

Tricrmica de Masson

Necrosis Hepatica Submasiva


Corte histolgico a bajo aumento de un sector de hgado que demuestra reas con trabculas hepticas remanentes, una extensa zona en que se han perdido los hepatocitos (necrosis confluente) con colapso del retculo e intensa hiperemia. A partir de esta zona hay prolongaciones de tejido heptico necrtico y colapso del retculo (necrosis en puente.

Tricrmica de Mallory

Tricrmica de Mallory
Es una tcnica para el estudio del tejido conjuntico.

Los cortes se tien con fucsina cida,solucin de azul-naranja G de anilina y cido fosfotungstico.

Las fibras de colgeno aparecen en azul, la fibroglia, neuroglia y fibras musculares aparecen en rojo y las fibrillas de elastina en naranja

Tricrmica de Mallory
Es utilizada para el estudio del tejido conectivo, glndulas, hongos, piel, lengua, etc. Desarrollada por Frank B. Mallory est constituida por tres colorantes. Fucsina
cida. Colorea de rojo a los ncleos.

Orange G

Colorante cido que se fija al tejido conectivo, citoplasma, msculo, eritrocitos. Tie de color rojo a amarillo. Colorante bsico que en presencia del cido fosfotngstico tie la colgena de color azul.

Azul de anilina.

Tricrmica de Mallory

Resultados: Eritrocitos naranja. Musculo rojo. Colgeno azul.

Tricrmica de Mallory

Fijacin en dicromato de potasio. Mordentaje previo en dicromato.

Resultados Ncleos Rojo Citoplasma, hemates, fibras musculares estriadas Naranja rojizo Msculo liso Violceo Tejido conectivo Azul

Soluciones Fucsina cida cido fosfomolibdico. Solucin de Mallory Azul de anilina Orange G

Tubos colectores de la mdula renal

Tricrmica de Mallory

Tendn y msculo estriado esqueltico


Se observa el tendn (tejido conectivo denso modelado) de color azul y el msculo estriado esqueltico de color rojo oscuro. La coloracin tricrmica de Mallory sirve para visualizar las fibras colgenas

Presentado por: Gisela


Coronado Sihuay. Angel Toralva Echevarra. Jorge Prado Vsquez.

Gracias

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