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ARAUJO ROMAN LESSLY KATHERINE

INTRODUCCION
El mtodo Papanicolau para colorear extendidos cervicales Usado desde hace aprox. 50 aos en todo el mundo Consiste en el uso de un colorante nuclear (hematoxilina) y colorantes citoplasmticos que compiten entre si permitiendo una tincin policomatica

Es el mtodo de tincin mas utilizado para material citolgico. La coloracin de Papanicolaou es la tcnica por excelencia de la citologa general como la hematoxilina eosina lo es para el mtodo histolgico

Tincin Papanicolaou
Tincin de rutina elaborada por el Dr. Georges Papanicolaou, tienen un valor prctico en la diferenciacin celular tanto citoplasmtica como nuclear y sus modificaciones. Para este mtodo se necesitan 3 soluciones especificas:

Hematoxilina de Harris Orange 6 (OG6) Eosina Azur 36, 50 65 (EA-50)

Para la Coloracin de Papanicolaou es necesario que los preparados sean previamente fijados en alcohol 96.

Tincin de Papanicolaou

Hematoxil ina de Harris

Coloracin Tricrmica

Orange G

EA 50

TECNICA DE COLORACION
- Alcohol 96

- Agua corriente 10 pasajes. - Hematoxilina 45 Seg. Virar en agua corriente hasta que esta quede transparente sin trazas de colorante. - Alcohol 96 10 pasajes. - OG6 3 Min. - Alcohol 96 10 pasajes. - EA 3 Min. - Alcohol 96 10 pasajes. - Alcohol 100 10 pasajes. - Alcohol 100 10 pasajes. Dejar secar al aire Montar.

Hematoxilina de Harris

2 soluciones Stock:
Solucin A: Hematoxilina al 10% en alcohol.

Solucin B: Alumbre de potasio al 10% en agua

destilada.

+ xido de mercurio

Orange G
Colorante cido debido a la presencia de grupos sulfnicos Bajo peso molecular Tie:

Clulas maduras
Clulas con hiperqueratosis

Los citoplasmas sin queratina no retienen el colorante.

EA 50

Compuesto por:
Eosina
Verde Luz Pardo bismarck

Tie de rosado (eosinfilas) las estructuras ms diferenciadas de los citoplasmas. Las menos diferenciadas son teidas con el verde luz, desplazando a la eosina y quedando teidas de color azul ( basfilas).

COLORANTE Hematoxilina de Harris OG 6 EA 50

ELEMENTOS CELULARES Afinidad por la cromatina. Tie el ncleo. Tie la queratina. Penetra rpidamente al citoplasma Tie el citoplasma de las clulas escamosas cianofilas y eosinoflas. Nuclolos y cilios.

NUCLEOS
La cromatina y la membrana nuclear toman el color azul oscuro o prpura mientras el nuclolo obtiene el color rojo, rosado o naranja

CITOPLASMA
Adopta el color amarillo o naranja, si hay presencia de queratina. Caso contrario el color vara de verde, azul o gris.

Muestra citolgica cervicouterina. Tincin Papanicolaou observada con un aumento de 4x.

Muestra citolgica cervicouterina. Tincin Papanicolaou observada con un aumento de 10x

CELULAS SUPERFICIALES

Frotis de exocrvix normal (examen de Papanicolaou). Clulas exfoliadas de un epitelio escamoso normal. A la izquierda, dos clulas intermedias, poligonales de citoplasma azul verdoso, con ncleo central redondo, de estructura conservada. A la derecha, una clula superfcial poligonal, de citoplasma eosinfilo y ncleo retrado, oscuro, puntiforme.

CELULAS BASALES Y PARABASALES

Frotis de un carcinoma invasor. Clulas exfoliadas de un carcinoma espinocelular del cuello uterino. En general poligonales, de tamao variable y citoplasma abundante. Relacin ncleo-citoplasmtica aumentada. Ncleos de tamao y forma variables, hipercromticos, algunos homogneos y otro con grumos de cromatina que alternan con espacios claros. Algunos ncleos con bordes irregulares.