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Cromatografía
Cromatografía
CROMATOGRAFIA
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ANTECEDENTES
La cromatografia es un poderoso metodo de separacion que tiene aplicacion en todas las ramas de la ciencia. La cromatografia en columna fue inventada y de nominada asi, a principios del siglo xx por el botanico ruso Mikhail Tswett. El empleo la tecnica para separar varios pigmentos vegetales, tales como clorofilas y xantofilas, atraves de una columna de vidrio rellena con carbonato de calcio finamente dividido. Las especies separadas aparecian como bandas coloreadas en la columna, lo que justifica el nombre que eligio para el metodo (del griego CHROMA que significa <<color>>, y GRAPHEIN que significa <<escribir>>.)
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CONCEPTO
La cromatografia es una tecnica de separacion extraordinariamente versatil que presenta distintas variantes. En toda separacion cromatografica hay dos fases (solida, liquida o gas) una movil y otra estacionaria, que se mueven una con respecto de la otra manteniendo un contacto intimo. La muestra se introduce en la fase movil y los componentes de la muestra se distribuyen entre la fase estacionaria y la movil. Los componentes de la mezcla a separar se invierten un tiempo diferente en recorrer cada una de las fases, con lo que se produce la separacion. Si un componente esta la mayor parte del tiempo en la fase movil el producto se mueve rapidamente, mientras que si se encuentra la mayor parte en la fase estacionaria, el producto queda retenido y su salida es mucho mas lenta. Como consecuencia de la distinta movilidad, los componentes de la muestra se separan en bandas o zonas discretas que pueden analizarse cualitativa y/o cuantitativamente.
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Analisis por elucion. Proceso por el cual el soluto es lavado por la columna aadiendo mas disolvente se llama elucion y es la forma mas corriente de hacer una separacion.
Analisis frontal. En este analisis se alimenta continuamente a la columna con una solucion de la muestra. Por desplazamiento. Se introduce la muestra como una solucion. En una sola porcion pero se hacen que los componentes bajen por la columna por la adicion continua de una solucion que por la fase estacionaria que cualquier otro de los componentes de la muestra. La concentracion de cada unu de los componentes puede determinarse por las distancias del cromatograma.
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Rf= distancia del movimiento soluto entre distancia del movimento de solvente.
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INDICADOR
TIEMPO EN SEG.
RF
FENOFTALEINA
ANARANJADO DE METILO
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INDICADOR
TEMPERATURA DE NH4OH
TIEMPO EN SEG.
RF
FENOFTALEINA
ANARANJADO DE METILO
15 C 29 C 37 C 15 C 29C 37 C
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USOS DE LA CROMATOGRAFIA
*LA CROMATOGRAFIA ES UNA TECNICA QUE SE EMPLEA EN EL FRACCIONAMIENTO DE PROTEINAS. *DETERMINA EL GRADO DE PUREZA.
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BIBLIOGRAFIA
PRINCIPIOS DE ANALISIS INSTRUMENTAL DE SKOOG WWW.GOOGLE.COM