ENTEROBACTERIAS

Blga. Jessie De La Cruz Lazo

Bacilos Entricos Gram Negativos

Familia Enterobacteriaceae Familia Vibrionaceae Familia Aeromonaceae

Bacilos Gram Negativos Aerobios o Facultativos

Familia Campylobacteriaceae
Familia Helicobacteriaceae

Familia Pseudomonaceae
Familia Pasteurellaceae

Familia Enterobacteriaceae
Gnero Escherichia Gnero Klebsiella Gnero Salmonella Gnero Shigella Gnero Citrobacter Gnero Enterobacter Gnero Morganella Gnero Proteus Gnero Serratia Gnero Yersinia
Es el grupo ms grande y heterogneo de bacilos Gram negativos con importancia clnica Estos gneros se han clasificado segn sus propiedades bioqumicas (bateras bioqumicas), estructura antignica (serotipificacin), hibridacin y secuenciacin del ADN A pesar de la complejidad de la familia menos de 20 especies son responsables de ms del 95% de las infecciones

ENTEROBACTERIAS
CARACTERSTICAS Familia Enterobacteriacea Cocobacilos o bacilos gram negativos No esporoformadores Aerobios, la mayora anaerobios facultativos.
Fermentadores de glucosa, con formacin de cido y produccin CO2. Oxidasa negativos (variable) Reducen nitratos a nitritos

ENTEROBACTERIAS
40 gneros. 150 especies. 20 25 especies responsables de patologa humana. Distribuidas en suelo, agua, alimentos. Flora normal del intestino de humanos y animales.

TABLE 2061 The and Genera of the Family Enterobacteriaceae That con Are Associated with Human Disease Tribus y gneros deTribes la Familia Enterobacteriaceae que estn asociados las enfermedades en humanos Tribe Tribu Escherichieae Genera Gneros

Escherichia Shigella

Edwardsielleae Salmonelleae Citrobactereae Klebsielleae

Edwardsiella Salmonella Citrobacter Klebsiella Enterobacter Hafnia Serratia

Protease

Proteus Morganella Providencia

Yersinieae Erwinieae Miscellaneous genera (not yet assigned to a tribe)

Yersinia Erwinia Buttiauxella Cedecea Ewingella Kluyvera Tatumella

Rahnella

ENTEROBACTERIAS

MORFOLGICAS Y TINTORIALES Bacilos cortos gram negativos, no esporulados, mtiles (flagelos pertricos) o no, capsulados o no, pilis.
BIOQUMICAS Anaerobios facultativos, catalasa positiva, oxidasa negativa, fermentan la glucosa, reducen nitratros a nitritos. No fermentan la lactosa (Salmonellas y Shigellas) CULTIVO Forman colonias lisas, circulares, convexas, con bordes diferenciados (E. coli y otras). Colonias mucoides (Enterobacter) Colonias grandes, muy mucoides y confluyen (Klebsiella)

ENTEROBACTERIAS

CULTIVO E IDENTIFICACIN
MEDIOS DE CULTIVO

1. Medios no selectivos: agar sangre (producen hemlisis) 2. Medios selectivos-diferenciales: agar McConkey, agar EMB (Eosina-Azul de metileno-lactosa-sacarosa) McConkey: colonias rosadas (fermentan lactosa) y colonias transparentes (no fermentan lactosa).

Agar EMB: colonias azules (fermentan lactosa) y colonias transparentes (no fermentan lactosa).
3. Medios altamente selectivos: SS agar, agar XLD, agar Hektoen entrico.

ENTEROBACTERIAS

CULTIVO E IDENTIFICACIN PRUEBAS DE IDENTIFICACIN 1. Pruebas bioqumicas 2. Pruebas serolgicas 3. Pruebas de biologa molecular

ENTEROBACTERIAS

CULTIVO E IDENTIFICACIN
PRUEBAS DE IDENTIFICACIN BIOQUMICAS

Prueba TSI (triple azcar hierro)

produccin

H2S

Contiene lactosa 1 %, sacarosa 1% y glucosa 0.1%, sulfato ferroso extractos de tejidos y un indicador de pH.

Resultados:
- cida/cida: Bacterias fermentadoras de lactosa: E. coli, Klebsiella,

Citrobacter, Enterobacter

- alcalina/cida: Bacterias no fermentadoras de lactosa. Salmonella (H2S+), Shigella (H2S -), Yersinia.

Agar Hierro Triple Azucar (TSI) Solamente los fermentadores de lactosa consiguen cambiar de color ambos lados inclinado y el fondo cido (amarillo). El gas sulfuro de hidrogeno es detectado por un depsito negro.

ENTEROBACTERIAS
OTRAS PRUEBAS BIOQUMICAS

Produccin de ureasa Produccin de indol Utilizacin del citrato Motilidad Descarboxilacin de lisina, arginina, ornitina Produccin de fenilalanina desaminasa Produccin de H2S Prueba VP

Prueba Ureasa

Prueba Indol

El indicador de pH utilizado es el rojo fenol. Esta prueba detecta la presencia de la enzima ureasa en el metabolismo bacteriano, la cual al hidrolizar urea forma productos amoniaco que alcalinizan el medio y se evidencia con el cambio de color del medio desde un amarillo plido hasta un rojo fucsia.

La prueba de indol se emplea para detectar la presencia de la enzima triptofanasa en bacterias, que degrada el aminocido triptfano a indol. Al aadir al medio SIM el reactivo de Kovacks o de Erlich que contiene p-dimetilaminobenzaldehdo, reacciona tanto con el indol como con el triptfano produciendo compuestos de color rojizo. Para evitar la interferencia del triptfano, el reactivo est disuelto en alcohol isoamlico inmiscible en agua. A diferencia del triptfano, el indol es soluble en el alcohol y slo este compuesto reaccionar con el aldehdo produciendo el anillo coloreado caracterstico de esta prueba.

ENTEROBACTERIAS
ESTRUCTURA ANTIGNICA Antgeno O: Lipopoliscarido Antgeno K: Cpsula Antgeno H: Flagelina COLICINA Bacteriocinas TOXINAS Y ENZIMAS Endotoxinas Exotoxinas
Antgeno K Cpsula Antgeno O Pared celular

Antgeno H Flagelo

ENTEROBACTERIAS

Enterobacterias No Enteropatgenas Enterobacterias Enteropatgenas

ENTEROBACTERIAS
Enterobacterias no enteropatgenas

Escherichia coli Klebsiella pneumoniae Proteus mirabilis Proteus vulgaris Enterobacter cloacae Citrobacter freundii Serratia marcescens Morganella morganii Providencia

ENTEROBACTERIAS
Enterobacterias enteropatgenas

Escherichia coli Salmonella Shigella Yersinia enterocolitica Yersinia pseudotuberculosis

ENTEROBACTERIAS NO ENTEROPATGENAS

ENTEROBACTERIAS
Enterobacterias no enteropatgenas Factores de patogenicidad generales Endotoxina Cpsula Variacin antignica de fase (Ag K y Ag H) Siderforos (transportador de hierro). Pilis de adherencia o fimbrias

ENTEROBACTERIAS
Enterobacterias no enteropatgenas Infeccin urinaria Meningitis Neumona Abscesos intraabdominales Abscesos cerebrales Septicemia

Patologas

Familia Enterobacteriaceae
Gnero Escherichia Caractersticas:
Bacilos Gram negativos no esporulados anaerobio facultativos fermentadores mviles agente etiolgico de septicemia, infecciones del tracto urinario, meningitis neonatal y gastroenteritis las infecciones son endgenas, mientras que las gastroenteritis son exgenas

ENTEROBACTERIAS
Escherichia coli
Factores de patogenicidad especficos
Pilis 1: manosa Pilis P: gal-gal (uroepitelio - pielonefritis) Pilis de adherencia agregativa (AAF) (uroepitelio e intestinal) Pilis AFC (factor de colonizacin) (epitelio intestinal) Pilis formadores de poros o haces (BFP) (epitelio intestinal) Polisacrido capsular K1 (cido silico): antifagoctico Hemolisina alfa: formadora de poros

E. coli : Patogenicidad y
cuadros clnicos

Infecciones del tracto urinario

Infecciones de otra localizacin Enteritis:
Enterotoxignico (ECET) Enteroinvasivo (ECEI) Enteropatgeno (ECEP) Enteroagregativo (ECEA) Enterohemorrgico (ECEH) Difusamente adherente (ECDA)

ENTEROBACTERIAS
Escherichia coli
Patologas
Infecciones urinarias Meningitis en RN Septicemia Neumona Infeccin de heridas Infecciones intraabdominales

Escherichia coli
Infeccin extraintestinal:

70% ITU, 70% infeccin quirrgica 50% infeccin abdominal 10% neumonas comunitarias (mortalidad 50%) 50% infeccin partes blandas: lceras por presin pie diabtico. Bacteriemia 1 o asociada a catter

Escherichia coli

Escherichia coli

Neumona E. coli

lcera por presin E. coli

ENTEROBACTERIAS
Klebsiella
Factores de patogenicidad especficos Pilis: adherencia a epitelios respiratorio y urinario Cpsula antifagoctica Patologas K. pneumoniae y K. oxytoca: infecciones urinarias, neumona y otras infecciones nosocomiales. K. rhinocleromatis: rinoescleroma K. ozaenae: ozena

Klebsiella pneumoniae

Klebsiella pneumoniae
Cpsula

Klebsiella pneumoniae

Rojo de metilo -

Fermentadora de lactosa Colonias grandes, muy mucoides y tienden a confluir

Klebsiella

5% neumona bacteriana comunitaria. 15% infeccin urinaria Bacteriemia 1 o asociada a catter 50% infeccin partes blandas

ENTEROBACTERIAS
Proteus
Factores de patogenicidad especficos

Pilis Ureasa Patologas Infecciones urinarias, bacteremia, neumona: en pacientes debilitados.

Proteus
La rpida motilidad de Proteus contribuye a su capacidad para invadir aparato urinario

Produce infecciones en humanos solo cuando la bacteria abandona el intestino.

Proteus
Patologas frecuentes: - Infecciones del tracto urinario (P. mirabilis) - Bacteriemia - Neumona - Infecciones focales en pacientes debilitados

P. vulgaris y la Morganella patgenos

nosocomiales.

Los antibiticos mas activos para Proteus aminoglucsidos y cefalosporinas Ureasa positiva en agar inclinado

ENTEROBACTERIAS
Enterobacter
Factores de patogenicidad especficos

Pilis

Patologas Infecciones urinarias, septicemia.

Enterobacter

Posee capsula pequea. Puede vivir libremente en el intestino

Enterobacter

Colonia parecidas a E. coli, pero un poco ms mucoides. Fermentadoras de lactosa

ENTEROBACTERIAS
Serratia
Factores de patogenicidad especficos

Pilis

S. marcescens : pigmentos rojos

Patologas Infecciones urinarias, bacteremia, neumona en pacientes debilitados.

Serratia
Pigmento rojo caracterstico: prodigiosina

S. Marcescens es un patgeno oportunista, comn en pacientes hospitalizados

ENTEROBACTERIAS
Enterobacterias no enteropatgenas Diagnstico
- Muestras - Frotis - Cultivo e identificacin: Cultivo: MacConkey o agar EMB (Lactosa positiva) Identificacin: Prueba TSI: cida/cida Otras pruebas bioqumicas: Urea, citrato, indol, motilidad, descarboxilacin de lisina, arginina, ornitina, VP.

ENTEROBACTERIAS
Enterobacterias no enteropatgenas Tratamiento

Antibitico segn antibiograma Resistencia a antibiticos: cromosmica o plasmidial.

ENTEROBACTERIAS ENTEROPATGENAS

ENTEROBACTERIAS
Enterobacterias enteropatgenas

Escherichia coli
Antgenos Antgenos Antgenos Ej: E. coli O: 150 diferentes K H O111:K76:H7
Enterotoxignica : Infeccin entrica, Enteroinvasiva: disentera, Enterohemorrgica: (0157:H7)

ENTEROBACTERIAS
Enterobacterias enteropatgenas Clasificacin de las cepas productoras de diarrea

Escherichia coli

E. coli enterotoxignica E. coli enteropatgena E. coli enterohemorrgica E. coli enteroinvasiva E. coli enteroagregante

ENTEROBACTERIAS
E. COLI ENTEROTOXIGNICA
Epidemiologa: Diarrea infantil en pases subdesarrollados Diarrea del viajero Transmisin oral-fecal Serotipos O: 6, 8, 25, 78, 115, 128 Patognesis: Colonizacin del intestino delgado (pilis AFC) Enterotoxina LT y enterotoxina ST Aumento del AMPc y GMPc Salida de agua y electrolitos Diarrea acuosa

ECET: Cmo acta la enterotoxina?

ENTEROBACTERIAS
E. COLI ENTEROTOXIGNICA
Inmunidad: Anticuerpos IgA de corta duracin Tratamiento: Hidratacin Oral o Parenteral Muchas veces no requiere antibiticos

ENTEROBACTERIAS
E. COLI ENTEROPATGENA
Epidemiologa: Diarrea infantil en pases subdesarrollados Diarrea en menores de 1 ao (20 %) Transmisin oral-fecal Serotipos O: 26, 111, 55, 119, 128 Patognesis: Colonizacin del intestino delgado Lesin de fijacin/borramiento: pilis BFP, protena intimina, protenas de secrecin. Modificaciones del citoesqueleto: destruccin de actina de las microvellosidades. Alteracin de la absorcin Diarrea acuosa

ENTEROBACTERIAS
E. COLI ENTEROPATGENA
Inmunidad: Anticuerpos IgA de corta duracin
Tratamiento: Hidratacin Oral o Parenteral Antibiticos

ENTEROBACTERIAS
E. COLI ENTEROINVASIVA
Epidemiologa Diarrea con moco y sangre en nios menores de 5 aos Relacionada con las Shigellas Transmisin oral-fecal nico reservorio el hombre Serotipos O: 28, 29, 112, 143, 164 Patognesis: Colonizacin de la mucosa del intestino grueso Protenas Ipa: capacidad de invadir y producir lceras en la mucosa colnica Dosis infectante alta Diarrea con moco y sangre (Sndrome disentrico) Tratamiento: Hidratacin

E. Coli enteroinvasiva

Acta en el epitelio del coln (intestino grueso)

ENTEROBACTERIAS
E. COLI ENTEROHEMORRGICA
Epidemiologa: Diarrea en pases desarrollados Asociado al consumo de carne bovina E. coli O:157 H:7 Dosis infectante baja: 100 a 200 microorganismos

ENTEROBACTERIAS
E. COLI ENTEROHEMORRGICA
Patognesis: Colonizacin del intestino grueso Pilis AFC Lesin de fijacin y borramiento Produccin de citotoxina tipo Shiga o Verotoxina Lesiones hemorrgicas Diarrea con sangre Fijacin de citotoxina al glomrulo renal y las plaquetas de la microcirculacin. Sndrome Urmico-Hemoltico

ENTEROBACTERIAS
E. COLI ENTEROHEMORRGICA
Tratamiento: Hidratacin Oral o Parenteral Sndrome urmico-hemoltico: hospitalizacin No dar antibiticos

ENTEROBACTERIAS
E. COLI ENTEROAGREGANTE
Epidemiologa: Diarrea con moco Diarrea crnica + 14 das Transmisin oral-fecal Nios y lactantes
Patognesis: Colonizacin del intestino delgado (pilis adherencia agregativa o AAF) Formacin de bio-pelcula mucosa Diarrea con moco

ENTEROBACTERIAS
Diagnstico de E. coli productoras de diarrea Pruebas de identificacin Aglutinacin en lmina con antisueros (Todas) ELISA y sondas de ADN para deteccin de toxinas (ECET) McConkey sorbitol: sorbitol negativa (ECEH) Prueba de potencial enteroinvasivo en cultivos celulares (ECEI). - Sondas de ADN, patrones de adherencia agregativa en cultivos celulares (ECEAg)

ENTEROBACTERIAS
Tratamiento

ENTEROBACTERIAS
Prevencin

Aliviar obstruccin de la vas urinarias Cierre de la perforacin en un rgano abdominal Reseccin de una porcin bronquiectsica del pulmn Hervir el agua Cocinar los alimentos Eliminar insectos como moscas, cucarachas Quimioprofilaxis

ENTEROBACTERIAS
Enterobacterias enteropatgenas

Shigella

S. dysenteriae S. flexneri S. sonnei S. boydii

Shigella
Caractersticas:
Bacilos Gram negativos no esporulados anaerobio facultativos fermentadores mviles agente etiolgico de gastroenteritis (shigelosis) y disentera (S. dysenteriae) se asocia adems a colitis hemorrgica (CH) y sndrome hemoltico urmico (SHU) invade y se replica intracelularmente Shiga toxina (tipo A-B5) (S. dysenteriae)

S. sonnei : pases desarrollados S. flexneri : pases en desarrollo S. dysenteriae : infecciones ms graves S. boydii

Invasin, replicacin intracelular e induccin de apoptosis en Macrfagos

Shigella

ENTEROBACTERIAS

Shigella

Epidemiologa: Slo infecta al hombre Dosis infectante de 200 microorganismos Nios de pases subdesarrollados Hacinamiento, moscas y cucarachas Transmisin oral-fecal S. dysenteriae es toxignica (Toxina de Shiga) La especie ms frecuente es S. flexneri La especie ms virulenta es S. dysenteriae

ENTEROBACTERIAS
Shigella
Patogenia: Acido resistencia Invasin de las clulas M de las placas de Peyer del colon Antgenos de invasin IpaA, IpaB, IpaC, IpaD (plasmidos) Ondulaciones en la membrana celular englobamiento de las bacterias - ruptura de la vacuola endoctica multiplicacin en el citoplasma Polimerizacin de la actina Invasin de los enterocitos adyacentes Induccin de apoptosis liberacin de IL-1B (atrae PMN) Formacin de las lceras y microabscesos Toxina de Shiga: enterotxica, citotxica y neurotxica Sndrome disentrico: diarrea con moco, sangre y pus

Shigella
Entra y se disemina

ENTEROBACTERIAS
Shigella
Diagnstico Muestra Frotis Cultivo: MacConkey: lactosa negativo Agar SS: Salmonella-shigella agar Agar XLD: Xilosa-lisina-dexosicolato Identificacin: TSI: alcalina/cida, H2S negativo Serologa: aglutinacin en lmina con antisueros especficos.

Crecimiento de Shigella en medio MacConkey

Lactosa negativo Colonias incoloras

Crecimiento de Shigella en SSA

Agar que suprime a otras enterobacterias y microorganismos gram positivos

ENTEROBACTERIAS Shigella
Antibiticos: Ciprofloxacino, ampicilina, tetraciclinas, trimetropin-sulfa, cloranfenicol. No usar antiespasmdicos ni antidiarreicos. Prevencin Saneamiento ambiental: (agua, alimentos, leche), disposicin de basura. Control de insectos. Aislamiento de pacientes y desinfeccin de excretas. Deteccin de casos subclnicos y portadores (manejo de alimentos). Tx antibitico de individuos infectados. Tratamiento

ENTEROBACTERIAS
Enterobacterias enteropatgenas

Salmonella
Clasificacin

S. enterica, subespecie entrica

Serotipos

S. enteritidis S. typhimurium S. typhi S. paratyphi A S. paratyphi B (Salmonella schottmuelleri) S. typhi C (Salmonella hirschfeldii)

Salmonella
Dotados de movilidad por sus flagelos

Sobreviven en agua congelada durante periodos prolongados

Familia Enterobacteriaceae
Gnero Salmonella Caractersticas:
Bacilos Gram negativos no esporulados fermentadores mviles anaerobio facultativos agente etiolgico de fiebre entrica (S. typhi), enteritis (S. cholerasuis, S. enteritidis) y bacteremias en la actualidad se han descrito mas de 2000 serotipos O diferentes

Fiebre tifoidea (S. typhi)

ENTEROBACTERIAS
Salmonella
Epidemiologa: Todas los serotipos, excepto S. typhi y S. paratyphi, infectan al hombre y animales como mamferos, aves y anfibios Dosis infectantes 1000 microorganismos Productos aviarios: huevos crudos Sociedades industrializadas Ms frecuente en poca de calor El uso de anticidos aumenta la incidencia Nios menores de 5 aos y mayores de 70 aos. Producen diarrea o fiebre entrica

Intoxicacin de alimentos

Intoxicacin de alimentos

ENTEROBACTERIAS
Salmonella
Patologas: Gastroenteritis Bacteriemia e infeccin a distancia Fiebre tifoidea o paratifoidea

ENTEROBACTERIAS
Salmonella enteritidis
Patognesis de la gastroenteritis:

Invade clulas M del intestino delgado y grueso La adherencia (fimbrias especficas para cada especie) produce ondulaciones en la superficie celular. Sistema de invasin PAI (invA, invB, spaP, spaQ) Formacin de una vacuola endocitica Transcitosis Paso a la submucosa Englobadas por los macrfagos intestinales sobreviven a la fagocitocis gracias a la apoptosis de los macrfagos Inflamacin y ulceracin de la mucosa y submucosa intestinal Invasin del torrente linftico y luego circulatorio

ENTEROBACTERIAS
Salmonella typhi
Patognesis de la Fiebre Tifoidea
Factor de virulencia Vi (cpsula) inhibe la fagocitosis por los PMN Invade clulas M del intestino delgado Transcitosis Fagocitosis por los macrfagos intestinales Multiplicacin dentro del macrfago Invasin del torrente linftico: Colonizacin de los rganos del SER (ganglios mesentricos, bazo, hgado y medula sea), invade torrente circulatorio y siembra a distancia Liberacin de endotoxinas Circuito enteroheptico Epidemiologa : El reservorio es el Hombre Se trasmite nicamente Hombre-Hombre, va oral-fecal Portador crnico en la vescula biliar Manipuladores de alimentos Dosis infectante moderada 105 a 106

Fiebre tifoidea

ENTEROBACTERIAS
Salmonella enteritidis
Diagnstico
Muestra: heces Frotis y Gram Cultivo: Agar MacConkey: lactosa negativo SSA Agar XLD Identificacin: TSI: alcalina/cida y H2S + Serologa

ENTEROBACTERIAS
Salmonella typhi
Diagnstico - Cultivos: Primera semana: hemocultivo Segunda semana: coprocultivo Tercera semana: urocultivo Cuarta semana: mielocultivo - Prueba de Widal

SALMONELLA SSA

ENTEROBACTERIAS
Salmonella
Tratamiento
Sndrome diarreico: uso discutido de antibiticos Fiebre tifoidea: cloranfenicol, cefalosporinas, quinolonas

ENTEROBACTERIAS
Salmonella
Prevencin
Higiene ambiental Higiene personal Coccin de los alimentos Vacuna de bacterias inactivadas Vacuna de bacterias vivas atenuadas Eliminacin de los portadores sanos de S. typhi

ENTEROBACTERIAS
Enterobacterias enteropatgenas

Yersinia enterocoltica y Yersinia pseudotuberculosis

Epidemiologa: Las infecciones por Yersinia son zoonticas. Alimentos o aguas contaminadas. Frecuente causa de enterocolitis en pases Escandinavos y Europeos. Tasa baja de aislamiento.

Yersinia enterocolitica

Gnero Yersinia
Caractersticas:
Bacilos Gram negativos no esporulados anaerobio facultativos fermentadores inmviles Y. pestis posee una cpsula proteica agente etiolgico de peste bubnica (Y. pestis), diarreas acuosas agudas (otras especies)

Y. pestis Y. enterocolitica Y. pseudotuberculosis

Y. pestis

Gnero Yersinia
Diagnstico
Se realiza por los signos y sntomas clnicos Aislamiento de las bacterias desde las heces, el crecimiento a 4C puede mejorar la seleccin

Muerte negra

Tratamiento
Estreptomicina (Y. pestis) Las infecciones entricas son generalmente autolimitadas.

ENTEROBACTERIAS
Yersinia enterocoltica y Yersinia pseudotuberculosis
Patogenia: Invaden las clulas M de la placas de Peyer Protena invasina se fija a las integrinas Protenas de la membrana exterior de Yersinia (pmeY): Efectos citotxicos: alteracin de procesos bioqumicos como desfosforilizacin, cinasa de la serina, alt de funciones sensoras y del citoesqueleto de actina Genes PAI: siderforos Multiplicacin en las clulas del SER Ganglios mesentricos Formacin de microabscesos Diseminacin

ENTEROBACTERIAS
Yersinia enterocoltica y Yersinia pseudotuberculosis
Patologas Linfaadenitis mesentrica Enterocolitis Fiebre intestinal Sndrome poliartrtico Ileitis terminal Tratamiento Ampicilina, tetraciclina, cloranfenicol Y. enterocolitica resistente a penicilina y cefalosporina (betalactamasas)

Yersinia pestis