Documentos de Académico
Documentos de Profesional
Documentos de Cultura
dos hebras de nucletidos sirve como patrn para formar las respectivas hebras complementarias (Modelo semiconservativo)
Meselson y Stahl (1957) demostraron, mediante un elegante experimento con istopos de nitrgeno, que el modelo propuesto por Watson y Crick era correcto.
Actualmente, los conocimientos acerca de la duplicacin del ADN se han incrementado notablemente. Todo el proceso se divide, para su estudio, en dos fases: fase de iniciacin y fase de elongacin
Para explicar el proceso empleando criterios pedaggicos, vamos a utilizar el siguiente esquema para representar al ADN.
5 3
3 5
FASE DE INICIACIN
Para que el proceso se lleve a cabo con la mxima celeridad, la duplicacin comienza simultneamente en muchos puntos de la doble cadena, puntos de iniciacin (oriC) en los que abundan las secuencias GATC.
Los puntos de iniciacin son reconocidos por protenas especficas, entre las que caben citar a las helicasas, que rompen los puentes de hidrgeno entre las bases nitrogenadas, las girasas, las topoisomerasas, y las protenas SSB (single Strand Binding-DNA) o protenas estabilizadoras de las dos hebras de ADN cuando estn separadas.
FASE DE INICIACIN
A partir de los puntos de iniciacin se originan las denominadas burbujas de replicacin, las cuales presentan dos zonas con forma de Y llamadas horquillas de replicacin que se van abriendo gradualmente a medida que se sintetiza nuevas hebras complementarias de ADN
Burbujas de replicacin
5 3
3 5
Horquillas de replicacin
FASE DE ELONGACIN
Es la fase en la que tiene lugar la sntesis de nuevas hebras de ADN complementarias a cada una de las dos hebras de ADN originales. En esta fase intervienen varios tipos de ADN polimerasas que se nombran como I, II y III. La actividad de estos enzimas es por una parte polimerasa, es decir que seleccionan y unen entre s los nucletidos que corresponden a los complementarios de la hebra molde a medida que la van recorriendo, y actividad exonucleasa, por la cual se eliminan nucletidos errneos o mal apareados y fragmentos de ARN colocados provisionalmente, como se ver posteriormente.
Para entender el proceso, vamos a centrar la atencin en una sla horquilla de replicacin, y para un mejor entendimiento se ver independientemente lo que sucede en cada hebra, sabiendo que el proceso transcurre casi simultneamente en las dos hebras.
FASE DE ELONGACIN
Se inicia con la enzima PRIMASA, que coloca en cada horquilla unas hebras cortas de ARN complementarias llamadas CEBADORES en el sentido 5 a 3. Posteriormente, la ADN polimerasa comienza la sntesis aadiendo nucletidos en el extremo 3
3 5 PRIMASA 5 3
3 3 5
La hebra que vemos arriba crece de forma continua, mientras que la otra lo va a hacer de forma discontinua
MIRIAM DIAZ RIOS
FASE DE ELONGACIN
Vamos seguidamente a ver como a medida que la horquilla de replicacin se va abriendo y creciendo el avance en la sntesis de laspolimerasas Para que sigase produce la otra Seguidamente las ADN nuevas hebras complementarias. hebra se ha de formar un nuevo continuan en esta hebra colocando cebador alejado del primero. desoxirribonucletidos, llegando hasta sustituir al primer cebador. A esta hebra En la hebra que vemos arriba la le llama retardada o de crecimiento se ADN polimerasa sigue avanzando discontinuo. ininterrumpidamente, por ello se llama de crecimiento continuo
3 5
5 3
ARN
Fragmento de OKAZAKI Hemos visto que las ADN polimerasas colocan desoxirribonucletidos complementarios de la hebras moldes (3a 5) y que tambin sustituye los ribonucletidos de las cadenas cortas de ARN (5a 3), pero no une los nucleotidos vecinos de la misma hebra.
3 5
FASE DE ELONGACIN
Para que los nucletidos de la hebra de crecimiento discontinuo tengan continuidad hace falta la accin de un enzima llamado LIGASA.
3 Ligasa
5
5 3
3 5
FASE DE ELONGACIN
El proceso visto se repite en las dos horquillas de replicacin de cada burbuja hasta que se llegan a encontrar las nuevas hebras que se han formado en horquillas vecinas y con sentido opuesto. 3 5
5 3
3 5
FASE DE ELONGACIN
El avance en la hebra superior es continuo. En la inferior se forma otro nuevo cebador y un fragmento de ADN (OKAZAKI)
3 5
5 3 3 5
FASE DE ELONGACIN
Ha desaparecido un cebador. Ahora queda que la ligasa una los desoxirribonucletidos de la hebra de crecimiento discontinuo. 3 5
5 3
3 5 Ligasa
FASE DE ELONGACIN
Ya hay continuidad en la hebra inferior. 3 5
5 3
FASE DE ELONGACIN
Aqu vemos que se ha colocado el ltimo cebador en la cadena inferior y que la ADN polimerasa an no ha terminado su trabajo sustituyendo al penltimo cebador,
3 5
5 3 5 3
3 5
FASE DE ELONGACIN
Ya ha sido sustituido el penltimo cebador, pero falta unir los desoxirribonucletidos mediante la ligasa. 3 5
5 3 5 3
3 5
FASE DE ELONGACIN
Finalmente, vemos total continuidad en las dos hebras, pero observamos que en las copias hijas hay fragmentos de ARN. 3 5
5 3 5 3
3
5
FASE DE ELONGACIN
En sta imagen vemos, nuevamente, al resultado de la duplicacin todava con las cadenas cortas de ARN o cebadores que le hicieron falta a la ADN polimerasa para llevar a cabo el proceso.
5 3
5 3 Para concluir la duplicacin, esos dos cebadores colocados en los extremos han de ser eliminados mediante la actividad exonucleasa de el enzima ADN polimerasa I.
3 5
FASE DE ELONGACIN
Apreciamos como el resultado final son dos molculas de ADN a las que le falta en una de sus hebras un pequeo fragmento final.
5 3
3 5
5 3
3
5
CONCLUSIONES
La replicacin es un proceso clave en el ciclo celular y necesario para que se lleve a cabo la divisin celular durante el crecimiento, y reparacin y para la perpetuacin de las especies. Las ADN polimerasas necesitan siempre un fragmento corto de ARN, cebador, con un extremo hidroxilo 3 libre para aadir nucletidos. Las ADN polimerasas siempre recorren la hebra molde en el sentido 3- 5. La replicacin es un proceso semiconservativo, bidireccional
Una hebra se sintetiza en forma continua y la otra en forma discontinua (Fragmentos de Okasaki)
En eucariotas existen multiples origenes de replicacin