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UNIDAD VI

AGENTES FISICOS Y QUIMICOS DE CONTROL

INTRODUCCIN
Esterilizacin: muerte o eliminacin de todos los organismos viables de un medio de cultivo. Inhibicin: descontaminacin y desinfeccin. Descontaminacin: tratar un objeto o superficie para que su manejo sea seguro (por ejem. Limpiar con un trapo hmedo). Desinfeccin: ataca directamente los organismo patgenos (aunque no los elimine a todos).

CONTROL FISICO ANTIMICROBIANO Usados para descontaminacin


microbiana. Calor, radiacin, filtracin. Impiden crecimiento, o descontaminan zonas o materiales contaminados por microorganismos.

Esterilizacin por calor


A T altas las macromolculas se desnaturalizan. Reduccin decimal (D) = eficacia del calor tiempo requerido para reducir 10 veces la viabilidad de una poblacin microbiana a una T determinada. Tiempo de muerte trmica tiempo que se necesita para matar todas las clulas a una T determinada. Endosporas resistentes al calor. El contenido hdrico de la endospora junto con la concentracin de SASP (Smail acid soluble spore proteins) resistencia al calor.

> [] de SASP y > contenido hdrico baja resistencia al calor. > [] de SASP y < contenido hdrico elevada resistencia al calor.

Muerte microbiana ms rpida en pH cido. Para esterilizacin de endosporas requiere T superiores y tiempos ms largos.

Autoclave
Dispositivo sellado de calentamiento que permite la entrada de vapor de agua bajo presin. Para matar endosporas T sup. a 100C. El autoclave emplea vapor bajo una presin de 1,1 Kg sobre cm cuadrado, lo que permite alcanzar una T de 121C. El tiempo de esterilizacin suele ser de 10 a 15 min.

Pasteurizacin
Proceso que reduce las poblaciones microbianas de la leche y otros alimentos sensibles al calor. Originalmente usada para matar bacterias patgenas tuberculosis. Pasteurizacin de la leche 71C 15 seg enfriamiento rpido Pasteurizacin en flash.

Esterilizacin por radiacin


Radiaciones electromagnticas. Ondas UV roturas en el DNA muerte del organismo expuesto. Radiacin ionizante rad. Electromagntica produce e-, radicales hidroxilo OH- y radicales hidruro H Estas molculas degradan: polmeros biolgicos como ADN y protenas. Unidad de radiacin roentgen Los microorganismos + resistentes a radiacin ionizantes que los org. sup.

Fuentes de radiacin: aparatos de rayos X, tubos de rayos catdicos y nucleidos radiactivos. Suelen utilizarse para descontaminacin de materiales de uso mdico y en la industria alimentaria.

Esterilizacin por filtracin


Para esterilizar lquidos sensibles al calor o gases. Filtro: dispositivo con poros pequeos que permita el paso de los microorganismos. Ampliamente utilizados en virologa.

Tipos de filtros

Filtro de profundidad: hoja fibrosa o capa hecha por amontonamiento al azar de papel, asbestos o fibras de vidrio prefiltros para eliminar partculas ms grandes de una solucin esterilizacin por filtracin de aire.

Filtro de membrana: disco duro compuesto de acetato de celulosa, con diminutos agujeros funciona como una criba, atrapando partculas sobre la superficie del filtro.

Filtro nucleopore: pelculas muy finas de policarbonato (10 m de grosor) usados para microscopia electrnica.

CONTROL QUIMICO DEL CRECIMIENTO


Agente antimicrobiano: producto qumico que mata o inhibe el crecimiento de los microorganismos. Producto qumico sinttico o producto natural. Agentes microbicidas: matan a los microorganismos. Agentes estticos: no matan solo inhiben el crecimiento.

Agentes antimicrobianos con toxicidad selectiva: ms txicos para microorganismo que para tejidos animales agentes quimioterapeuticos para tratamiento de enfermedades infecciosas.

Efecto de los agentes antimicrobianos sobre crecimiento Bacteriosttico: inhibe crecimiento


pero no produce la muerte. Inhibidores de la sntesis de protenas, actan unindose a los ribosomas. Bactericidas: matan a las celular pero no producen lisis o rotura de la clula. Bacteriolticos: inducen muerte mediante la lisis de la clula, disminucin del # de cel. O de la turbidez despus de aadir el agente (antibiticos).

Medicin de la actividad antimicrobiana


Determinar la cantidad ms pequea del agente que se necesita para inhibir el crecimiento de un microorganismo concentracin mnima inhibidora (MIC) Tcnica de dilucin en tubo: se prepara una serie de [] crecientes de antibitico en el medio de cultivo. Se inoculan todos los tubos y se incuban. El crecimiento (turbidez) tiene lugar en los tubo con una [] por debajo de la MIC.

Mtodo de difusin en agar: Se prepara una placa que contenga un medio con agar y se inocula de forma uniforme con el organismo control.
Se aaden cantidades conocidas del agente antimicrobiano a pequeos discos de papel de filtro que luego se colocan en la superficie de agar. Durante la incubacin el agente se difunde desde el papel hasta el agar. Formando una zona de inhibicin.

Desinfectantes y antispticos
Desinfectantes: productos qumicos que matan a los microorganismos, se utilizan sobre objetos inanimados. Antispticos: agentes qumicos que matan o inhiben el crecimiento de los microorganismos y son lo suficientemente no txicos como para ser aplicados en los tejidos vivos.

Esterilizacin en frio
Se realiza en dispositivos cerrados similares a autoclaves. Emplean un agente qumico (xido de etileno, formaldehido o perxido de hidrogeno).

Anlogo de factor de crecimiento


Para controlar las enfermedades infecciosas . Agentes que pueden utilizarse internamente. Agentes quimioteraputicos. Requerimiento clave toxicidad selectiva: capacidad de inhibir bacterias u otros organismos sin afectar el cuerpo humano.

Medicamentos con grupos sulfas


Primeros agentes quimioteraputicos. Inhiben crecimiento de bacterias. Sulfanilamida bloquea la sntesis de cido flico.

Antibiticos
Sustancias qumicas producidas por ciertos microorganismos, que inhiben el crecimiento o matan a otros microorganismos. Productos naturales.

Dianas para los antibiticos


Gram+ sensibles a antibiticos que Gram Antibitico de amplio espectro: acta en gram + y gram Antibitico de corto espectro: un solo grupo de organismos, importante para control de microorganismos que no responden a otros antibiticos.

Dianas importantes para la accin de antibiticos en bacterias:


Pared celular Membrana citoplasmtica Procesos biosintticos de la sntesis de protenas y AN.

Antibiticos -lactmicos: penicilinas y cefalosporinas


Medicamente tiles Contienen el anillo -lactmico. Tipos de penicilinas:

Penicilina G: Primer antibitico -lactmico descubierto, acta sobre gram + Ampicilina y carbenicilina: penicilinas semisinteticas que poseen un espectro de actividad antibitica ms amplio.

Mecanismos de acccin
Inhibidores de la sntesis de pared celular. Transpeptidasas son las responsables de unir los PGs se unen a la penicilinas (Protenas de unin a las penicilinas, PBPs) al unirse a las penicilinas dejan de catalizar la unin de PG. El complejo antibitico-PBPs estimulan la liberacin de autolisinas

Cefalosporinas
Poseen un anillo de dihidrotiacina de seis miembros. Tienen el mismo modo de accin que las penicilinas, pero un espectro de actividad ms amplio. Ceftriaxona Neisseria gonorrhoeae l Ha desarrollado resistencia a las lactamasas que rompen el anillo lactmica de la penicilina.

Antibiticos producidos por procariotas.

Antibiticos aminoglicsidos:
Contienen aminoazcares unidos por enlaces glicosdicos a otros aminoazcares. Estreptomicina, kanamicina, gentamicina y neomicina. Contra bacterias gram Estreptomicina contra la tuberculosis. Disminucin de su uso por penicilinas sintticas y porque las bacterias desarrollan resistencia con facilidad.

Antibiticos macrlidos
Contienen grandes anillos lactnicos unidos a una parte glucdica. Eritromicina, oleandomicina, esparimicina y tylosina. Eritromicina: inhibidor de la sntesis de protenas interfiriendo con la unidad 50 s del ribosoma. Usada en pacientes alrgicos a la penicilina. Contra Legionelosis Legionella pneumophila.

Tetraciclinas
Antibitico de amplio espectro (gram+ y -) Sistema con un anillo de naftaceno. A este anillo se unen diversos componentes:

Clorotetraciclinas atm de cloro Oxitetraciclina hidroxilo (OH) adicional.

Inhibidor de la sntesis de protenas. Interfiere con la funcin de la subunidad ribosmica 30s. Usadas en medicina veterinaria.

Control de virus

Inhibicin qumica
Agentes antivricos especificos Rifamicina: inhibidor de la Rna polim rasa en las bacterias por no en eucariotas y arqueas. La RNA polimerasa del virus de la vacuna y de otros poxvirus es tambin inhibida por la rifamicina. El antibitico inhibe de manera especifica la replicacin de poxvirus.

Azidotimidina (AZT): inhibe a retrovirus como el VIH. Qumica relacionada con la timidina. Bloquea la sntesis del DNA intermediario y se utiliza para inhibir la multiplicacin de VIH. Muestra nivel de toxicidad. Con el tiempo pierde su potencia antivrica.

Interferones
Son sustancias antivricas producidas por muchas clulas animales, en respuesta a la infeccin por ciertos virus. Protenas de bajo peso molecular. Impiden la multiplicacin de los virus en clulas normales.

Tres tipos moleculares:


IFN- leucocitos IFN- fibroblastos IFN- linfocitos

Son especficos del hospedador no del virus.

Control de hongos
Toxicidad del frmaco para los animales superiores. Muchos frmacos anti fngicos solo pueden utilizarse para aplicaciones tpicas.

Inhibidores del ergosterol


En hongos el ergosterol reemplaza al colesterol componente de la membrana celular de eucariotas. Polienos

Se unen al ergosterol, lo que altera la funcin de la membrana y en ultimo termino causan perdida de la permeabilidad de la membrana y muerte de la celula.

Azoles y alilaminas inhiben selectivamente las biosntesis de ergosterol. Azoles:

Incapacidad para producir una membrana normal Daos en la membrana Alteracin de funciones crticas de la membrana como el transporte de nutrientes.

Alilaminas:
Solo son tiles de forma tpica porque las clulas y los tejidos animales no las toman ni las incorporan fcilmente.

Otros agentes antifngicos

Polioxinas:
Inhiben la sntesis de pared celular, al interferir con la biosntesis de quitina.

Griseofulvina:
Altera la agregacin de los microtbulos durante la mitosis.

Vincristina, vinblastina y toxol:


Eficaces agentes antifungicos, con propiedades anti cancergenas.

Resistencia a los antibiticos


Capacidad adquirida por un organismo para resistir los efectos de un antibitico ante el cual es normalmente susceptible. La adquieren a travs de un proceso de intercambio gentico.

Mecanismos de resistencia
1. 2. 3. 4.

5.

6.

El organismo puede carecer de la estructura diana sobre la que acta algn antibitico. El organismo puede ser impermeable al antibitico. El organismo puede ser capaz de alterar el antibitico pasndolo a aun forma inactiva. El organismo puede modificar la diana de un antibitico. Por intercambio gentico, puede tener lugar la alteracin de una va metablica que bloquea el agente antimicrobiano. El organismo puede ser capaz de bombear hacia fuera el antibitico que va entrando en la clula.

Mecanismos de resistencia mediados por plsmidos R


La resistencia a antibiticos mediada por genes cromosmicos surge a casusa de una mutacin de la diana de accin del antibitico. La resistencia de un plsmido R. en la mayora de los casos se debe a la presencia en los plsmidos R de genes que codifican nuevas enzimas o bien evitan la incorporacin del antibitico o bien lo bombean activamente hacia afuera.