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1.

- Aumentar duracon del estmulo

P: Usando la memoria, genere un potencial de accin con los valores iniciales del programa, es decir use un estmulo de amplitud de 30 A y duracin de 0.1ms. Estimule nuevamente aumentando la duracin a 0.2 ms. Que ocurre? R: El estmulo de 0.2 ms de duracin aumenta la velocidad de despolarizacin de la membrana La inyeccin de una corriente despolarizante por ms tiempo permite reclutar una mayor cantidad de canales de sodio por unidad de tiempo, por lo que se alcanza ms rpidamente el valor de umbral de disparo.

2.- Disminucin del gradiente de sodio

P: Usando la memoria genere un potencial de accin con un estmulo de amplitud de 30 A y duracin de 0.1 ms. A continuacin modifique las concentraciones extracelular de sodio a 300, 200, 150 y 100 mM y vuelva a estimular. Qu ocurre y porqu? R: Al disminuir el Na externo disminuye la amplitud y se demora ms en alcanzar el valor de umbral de disparo. Al haber un menor gradiente electroqumico para el movimiento de sodio, con la misma intensidad de corriente no se alcanza a despolarizar la membrana tan rpidamente como en condiciones control

3.- Disminucin del gradiente de potasio

P: Regrese a la configuracin inicial de concentracin de sodio extracelular de 440 mM. Estimule usando 30 A y 0.1 ms de duracin. A continuacin modifique las concentraciones extracelular de potasio a 2, 5, 50 y 100 mM y vuelva a estimular. Qu ocurre y porqu? R: K < 10 mM incrementa el gradiente de K e hiperpolariza la clula, por lo que sta se aleja del umbral de disparo. K > 10 mM disminuye el gradiente de K y la clula se despolariza ms fcilmente. Al haber menor gradiente la repolarizacin toma ms tiempo.

4.- PA evocado en mamfero y calamar.

P: Estos valores de concentraciones inicas intracelular y extracelular corresponden a un mamfero. Que ocurri con la forma y duracin del potencial de accin? Cunto se modificaron los potenciales de equilibrio de cada in? R:En el PA de mamfero, el gradiente de sodio es mayor, por lo tanto con el mismo estmulo despolarizante, la intensidad de la corriente de sodio ser mayor en el PA mamfero, por lo que el PA es ms rpido y de mayor amplitud que el de calamar

5.- Efecto de TTX sobre el PA evocado

P: Usando la memoria genere un potencial de accin con un estmulo de 30 A y una duracin de 0.1 ms. A continuacin modifique la concentracin de tetrodotoxina a 0.1, 1, 5, 10 y 50 nM y repita la estimulacin Qu ocurre y porqu? Relacione su respuesta con el grado de bloqueo de los canales. R: TTX > 1 nM se comienza a observar el bloqueo de canales de sodio. A mayor concentracin de TTX, mayor es la poblacin de canales bloqueados

6.- Efecto de TEA sobre el PA evocado

P: Usando la memoria genere un potencial de accin con un estmulo de amplitud de 30 A y duracin de 0.1 ms. A continuacin modifique la concentracin de TEA a 0.1, 1, 5, 10 y 50 mM y repita la estimulacin Qu ocurre y porqu?. Relacione su respuesta con el grado de bloqueo de los canales. R: TEA > 1 mM se observa un aumento en la amplitud y duracin del PA, producto del bloqueo de los canales de K.

7.- Identificacin de las corrientes de accin

P: Reinicie el programa y genere un potencial de accin usando las condiciones iniciales. Use la a la opcin ANLISIS. Dibuje el registro e identifique en l las corrientes de entrada y de salida de iones. No olvide colocar la escala de tiempo. Cmo podra demostrar a que in le corresponde cada una de las corrientes observadas? Aislar las corrientes con bloqueadores especficos: para ver slo las corrientes de sodio, agregar TEA 10 mM, etc

8.- Perodo refractario

P: Aplique dos pulsos simultneos, ambos de 30 A de amplitud y 0,5 ms de duracin. Observe que no se produce un segundo potencial de accin. R: Tiempo mnimo de retraso 10.8 ms, el tiempo necesario para que la mayor parte de los canales de Na vuelva desde el estado inactivado a estar listo par abrirse

9.- Corrientes macroscpicas evocadas.

1.Usando un potencial de membrana en reposo de -70 mV y un despliegue de 2 ms/div, estimule (pulso 1) con una duracin de 10 ms y con amplitudes de -80, 70, -60, -50, -40, -30,-20, -10, 0, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80 mV. Slo hasta +20 mV

9.- Curva IV (Vh= -90 mV)


4000

uA/cm2

3000 2000 1000 0

Na K
0 20 40

-100

-80

-60

-40

-20 -1000 -2000 -3000

mV

10.- Curva I-V en presencia de TEA 100 mM

11.- Curva I-V en presencia de TTX 50 nM

CONTROL
4000

uA/cm2

3000 2000 1000 0

Na K
0 20 40

-100

-80

-60

-40

-20 -1000 -2000 -3000

mV

TEA 100 mM
4000

uA/cm2

3000 2000 1000 0

Na K
0 20 40

-100

-80

-60

-40

-20 -1000 -2000 -3000

mV

TTX 50 nM
4000

uA/cm2

3000 2000 1000 0

Na K
0 20 40

-100

-80

-60

-40

-20 -1000 -2000 -3000

mV