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UNIVERSIDAD TECNOLOGICA DE LA COSTA

AGROBIOTECNOLOGIA

INTRODUCCIN AL CRECIMIENTO MICROBIANO

M.C. Ocampo Suarez

INTRODUCCIN
La microbiologa industrial es la disciplina que utiliza los moo, generalmente cultivados a gran escala, para obtener productos comerciales. Surgi de los procesos de fermentacin alcohlica tales como los de fabricacin del vino y de la cerveza.

Con las herramientas de la microbiologa se desarrollaron procesos para la produccin de antibiticos Aditivos alimenticio Enzimas Compuestos qumicos como butano y cidos orgnicos

Todos los procesos microbiolgicos se basan en la potenciacin de reacciones metablicas que los microorganismos ya eran capaces de levar a cabo, con el fin el la mayora de los casos de aumentar la produccin del compuesto de inters.

En la actualidad adems de la microbiologa ha surgido una nueva era: la de la biotecnologa microbiana. En biotecnologa los mtodos de manipulacin de los genes ha dado lugar a nuevos productos microbianos, la mayora de los cuales no los producen los microorganismos de forma natural. (mediante mtodos de ingeniera gentica se crean nuevos microorganismos que contienen nuevas dotaciones de genes que les permiten fabricar productos nuevos)

MICROORGANISMOS Y PRODUCTOS INDUSTRIALES


No todos los moo tienen un uso industrial Contrario a los microorganismo aislados de la naturaleza que muestran el crecimiento celular como su principal propiedad fisiolgica. Los moo industrial son organismos que han sido seleccionado cuidadosamente para que produzcan uno o mas productos especficos

Los moo industriales son especialistas metablicos capaces de producir especficamente determinados metabolitos con gran rendimiento Los moo industriales pueden crecer satisfactoriamente bajo las condiciones altamente especializadas de un fermentador , pueden mostrar un crecimiento pobre en ambientes naturales competitivos.

ORIGEN DE LAS CEPAS INDUSTRIALES


La fuente ultima de todas las cepas industriales es el ambiente natural. A travs de los aos conforme se han ido perfeccionado los procesos industriales, se han ido depositando un cierto numero de cepas industriales en colecciones de cultivos.

MEJORA DE CEPAS
Como se ha mencionado anteriormente la fuente inicial de un microorganismo industrial es el ambiente natural, pero el aislamiento se modifica en gran medida en el laboratorio. Como resultado de la modificacin es posible anticipar una mejora progresiva en el rendimiento de un producto

El ejemplo mas espectacular de tal mejora progresiva es el de la penicilina, el antibitico producido por Penicillum chrysogenum Cuando se produjo por primera vez la penicilina a gran escala se obtuvieron rendimientos de 110 ug/ml. A lo largo de los aos, como resultado de la mejora de la cepa acoplada a cambios en el medio y condiciones de cultivo, el rendimiento de la penicilina aumento hasta 50,000 mg/ml (manipulacin y seleccin)

PROPIEDADES DE UN MICROORGANISMO INDUSTRIAL Un moo adecuado para su utilizacin industrial debe de producir el moo de inters Se debe disponer del moo de forma pura Ser genticamente estable Debe crecer en cultivo a gran escala Debe ser posible mantener al moo en cultivos por largos periodos de tiempo ya sea en el laboratorio o a escalas industriales

El cultivo debe de producir esporas a alguna otra forma celular reproductora que facilite la fcil inoculacin el moo en grandes fermentadores. Que el moo crezca rpidamente y produzca el compuesto deseado en un tiempo relativamente corto El moo debe de ser capaz de crecer 3n un medio de cultivo relativamente barato que se pueda obtener en grandes cantidades. (suero d leche, licor de maceracin de maz)

Un moo industrial debera d no ser daino para las personas no para los animales y paltonas Otro requisito es que los moo industrial es que sea posible eliminar las clulas microbianas del medio de cultivo con relativa facilidad (hongos, levaduras y bacterias filamentosas) Un moo debera de ser susceptible a manipulacin gentica

PRODUCTOS INDUSTRIALES
Los productos microbianos industriales de inters pertenecen a varios tipos principalmente: - incluyen a las propias clulas -sustancias producidas pro la clula. - productos de bio conversin ( los moo se utilizan para convertir qumicamente una sustancia especifica de una forma a otra.

CRECIMIENTO Y SNTESIS DEL PRODUCTO EN PROCESOS INDUSTRIALES


Las diversas etapas del crecimiento microbiano contemplan: -etapa de adaptacin Etapa de crecimiento exponencial (Fase lag) Etapa de fase estacionaria .

En estas etapas se producen dos tipos de compuestos: metabolitos primarios y metabolitos secundarios

Un metabolito primario es aquel que se forma durante la fase se crecimiento el moo y es indispensable. Un metabolito secundario es aquel que se forma al final de la fase de crecimiento y durante la fase de adaptacin .

LOS METABOLITOS PRIMARIOS Y SECUNDARIOS ( PRODUCTOS DE FERMENTACIN DE INTERS COMERCIAL)

El etanol es un producto del metabolismo anoxico de la levadura y de algunas bacterias, y se forma como parte del metabolismo de la energa

METABOLITO SECUNDARIO
Un tipo mas complejo de productos industriales es aquel en el que el producto deseado no se produce durante la fase de crecimiento si no durante la fase estacionaria. Son los mas comunes y los mas importantes de inters industrial

CARACTERSTICAS RECONOCIDAS DE LOS METABOLITOS SECUNDARIOS

CARACTERSTICAS DE LAS FERMENTACIONES A GRAN ESCALA


El recipiente en el que se realiza el proceso industrial se denomina fermentadores. El tamao de los fermentadores puede variar entre los pequeos de 5 a 10 litros a escala laboratorio y los enormes de hasta 500,000 litros a escala industrial.

Pequeo fermentador para investigacin cientfica

Interior de un fermentador

Esquema de un fermentador que muestra las construccin y los dispositivos que se utilizan ara la aireacin y para el control del mismo

El tamao del fermentador utilizado depende del proceso y de cmo se va a operar. Los procesos que operan con medio no renovado, requieren fermentadores mas grandes que los procesos que funcionan de modo continuo o semicontinuo.

CRECIMIENTO MICROBIANO

Se define como un incremento en el numero de clulas.

FISIN BINARIA

CRECIMIENTO DE POBLACIONES
El crecimiento se define como in incremento e el numero de clulas microbianas e una poblacin. El crecimiento se puede medir como un incremento en la concentracin de masa cracoviana.

La velocidad de crecimiento es el cambio en el numero de celular o masa por unidad de tiempo El tiempo requerido para que a partir de una clula se formen dos se denomina tiempo de generacin ( es referido tambin es el requerido para duplicarse una poblacin de clulas.

CRECIMIENTO EXPONENCIAL

La figura muestra los resultados de un experimento de crecimiento de una nica clula que posee tiempos de generacin de 30 minutos. Este modelo de incremento de la poblacin en el que el numero de clulas se dobla cada cierto periodo de tiempo y se conoce como crecimiento exponencial

Cuando estos datos se representan en ejes de escala aritmtica , se obtiene una curva caracterstica en la cual va incrementando progresivamente la pendiente

CICLO DEL CRECIMIENTO DE LAS POBLACIONES

FASE DE LATENCIA

Cuando una poblacin microbiana se inocula en medio fresco no ocurre crecimiento inmediatamente, sino despus de cierto tiempo se llama fase de latencia que puede ser mas larga o corta dependiendo de varios factores.

Al trasferir de medios diferentes es de suponerse que carecen de determinados componentes esenciales y tiene que trascurrir un cierto tiempo para que proceda su sntesis. Tambin se requiere adaptacin cuando las clulas han sido daadas por tratamiento trmicos como calor, radiacin, txicos etc., porque se requiere tiempo para reparar los daos Tambin se requiere fase de adaptacin cuando se trasfieran clulas de un medio rico a uno mas pobre. Es necesario que se sinteticen clulas que permitan metabolizar los compuestos presentes en el nuevo medio.

FASE EXPONENCIAL
Esta fase es la consecuencia de que una clula se divida en dos, estas en otras dos y as sucesivamente. La mayora de los moo. Crecen exponencialmente . El crecimiento exponencial se ve influenciado por las condiciones ambientaos (T, composicin del medio) as como por las caractersticas genticas del moo.

FASE ESTACIONARIA
Es imposible mantener el ritmo de crecimiento exponencial de in moo en un cultivo donde el medio no es renovado. Lo que sucede en esta etapa es que los nutrientes en un medio no renovado se agota al mismo tiempo que se acumulan productos de desecho que alcanzan concentraciones altas que hacen posible la inhibicin del crecimiento exponencial.

No hay incremento neto del numero de moo. Sin embargo si ocurren funciones celulares que hacen posible la produccin de compuestos.

FASE DE MUERTE
Si la incubacin contena despus de que l moo ha alcanzado la fase estacionaria las clulas deben permanecer vivas y metabolicamente activas, pero tambien deben morir. Si esto ocurre se dice que las celulas entran en la fase de muerte.

MEDICION DEL CRECIMIENTO

El crecimiento de una poblacin microbiana se mide siguiendo los cambios en los nmeros de celulas o el peso de la biomasa celular.

EFECTOS DE FACTORES AMBIENTALES SOBRE EL CRECIMIENTO


Hasta ahora se han descrito las etapas del crecimiento microbiano en condiciones ideales de l laboratorio. El entendimiento de la influencia medioambiental sobre los moo ayudara a explicar su distribucin en la naturaleza y disear mtodos de control as como su destruccin si fuese necesaria.

EFECTO DE LA T SOBRE EL CRECIMIENTO MICROBIANO


La temperatura es uno de los factores ambientales mas importantes que afatan el crecimiento y a la supervivencia microbiana. La temperatura afecta el crecimiento de dos formas: 1. a medida que aumenta la temperatura las reacciones enzimticas son mas rpidas y el crecimiento se hace mas rpido.

2. Sin embargo por encima de una cierta temperatura , las protenas, los cidos nucledos y otros componentes celulares sufren daos irreversibles.

TEMPERATURAS CARDINALES DE CRECIMIENTO


Temperatura mnima: por debajo de la cual no existe crecimiento Temperatura optima: a la cual el crecimiento ocurre lo mas rpido posible Temperatura mxima: a la cual no existe el crecimiento

EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBRE LA VELOCIDAD DE CRECIMIENTO Y LA CONSECUENCIAS MOLECULARES

CLASES DE MOO SEGN LA T


Psicrofilos: crecen a temperaturas optimas bajas Mesofilos: crecen a temperaturas optimas medianas

Termofilos: crecen a temperaturas optimas altas Hipertermofilos: crecen a temperaturas optimas muy altas.

RELACIN DELA TEMPERATURA Y VELOCIDADES DE CRECIMIENTO DE LOS MOO.

ACIDEZ Y ALCALINIDAD
La acidez y alcalinidad se expresa en una escala en la que la neutralidad es pH 7. los valores de pH por debajo de 7 son cidos Los valores de pH por encima de 7 se consideran bsicos

PH Y CRECIMIENTO MICROBIANO.
Cada moo. Tiene un rango de pH dentro del cual es posible el crecimiento y normalmente posee un pH optimo muy bien definido. La mayora de los ambientes naturales tiene valores de pH 5.9 y es al pH al que coexisten muchas diferentes especies de moo. Los moo que crecen por debajo de ese rango de pH de les denomina moo acidofilos. Los moo que crecen a pH por encima del optimo se demos minan alcalofilos.

La escala del pH. Ntese que anqu los microorganismos pueden vivir a pH muy altos o muy bajos, el pH interno permanece cerca de la neutralidad.

DISPONIBILIDAD DEL AGUA


Todos los moo. Requieran agua y la disponibilidad de ella es un factor importante para el crecimiento microbiano en la naturaleza. La disponibilidad de agua se expresa generalmente en trminos de agua tales como actividad de agua. Los valores de actividad de agua se expresa con valores que van de 0 a 1 , siendo los valores mas cercanos a cero los que presentan mas poca disponibilidad de agua. Y los mas cercanos a 1 los que tienen mayor disponibilidad de la misma.

OXIGENO

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