COLORACIONES ESPECIALES

F-Dsh-A

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agente bacteriano y problemas patológicos .

.Verde metilo pironina Brown Brenn Mucicarmin Zielh Nielsen plata metenamina PAS Giemsa Waysson Griedley Glenn Warthin Starry Perls o azul de Berlín…  Estructuras específicas en los tejidos. (tipo de agentes infecciosos). la forma de agrupación y forma.

VERDE METILO PIRONINA PLATA METENAMINA BROWN BRENN Rutina en algunos laboratorios : sospecha etiología infecciosa . otros usos para el dx histológico de la membrana basal en biopsia renal.COLORANTES ? PLATA METENAMINA: hongos .

.: diferenciar El uso y difusión de esta técnica ha sido recomendada como método rápido y fácil en la detección de bacteriemia en pacientes críticos.GRAM : detecta gérmenes y/o bacterias gram+ y gram.

.Las bacterias Gram positivas. (Lactobacillus acidophilus) retienen el tinte y se colorean de azul.

mucopolisacáridos neutros. mucoproteínas. Perls o azul de Berlín: Fe ZIELH NIELSEN: BK Giemsa : gram+ .PAS: CHO. (glucógenos). entre otros. los hongos.

 Hematopatología: elementos hematolinfoides. incluyendo células cebadas. Se puede usar para evidenciar HP en el moco superficial de la mucosa gástrica.  .

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LEVADITIS(espiroquetas): en sus componentes el nitrato de plata que identifica bacterias color oscuro. color rojo vivo y los núcleos verde azuloso. .VERDE METILO PIRONINA FENICADA: gram -.

. MUCICARMIN DE MAYER: mucoproteínas y Criptococcus y se usa en centros especializados y en infecciones.GRIDLEY: hongos y Endoameba histolítica.

fácil de realizar e interpretar y con una sensibilidad a métodos de coloración convencional: PAS Hematoxilina azul de metileno tiñe microorganismos de azul brillante. +rápida. Cohen utilizó una nueva técnica . -costosa. .WARTHIN STARRY Y WAYSSON : biopsias gástricas (HP) Carnoy's. inmunohistoquímica. completa en pocos minutos. las que se comparan con las muestras histológicas fijadas en formol al 10 % y coloreadas con H/E(…mayor sensibilidad ).

Parásitos TINCIÓN DE IDENTIFICACIÓN Rosado Azul Rojo Rojo Rojo Rojo Bacterias grampositivas Bacterias gramnegativas Bacterias gramnegativas Gramnegativas Bacilos Verde metilo Glenn Zielh Nielsen .TÉCNICA HISTOLÓGICA PAS Brown Brenn AGENTE INFECCIOSO Hongos.

PAS. H/E. H/E. rojo congo . Perls. BK Plata Plata. PAS y tricrómica H/E.PAS H/E.Relación de órganos muestreados según técnicas empleadas ÓRGANOS Pulmón Cerebro Hígado Riñón Piel TÉCNICAS EMPLEADAS PAS.

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lo que demuestra una alta sensibilidad en el diagnóstico de micobacteria. el PCR. .BK Otros autores utilizan para los bacilos ácidos resistente.

Ac. Clorhídrico 20%: HCl = 20 ml H2O destilada = 80 ml

Sol. de ferrocianuro de K 10% Ferrocianuro de K = 10 g H2O destilada = 100 ml Sol diaria

Solución de rojo núcleo

-Desparafinar e hidratar. - Sol. Diaria de HCl – ferrocianuro de K (30min) - Enjuagar las laminas con H2O d. -Solución de rojo núcleo durante 5 min -Lavar en H2O c. (2min) -Deshidratar, aclarar y montar.

H.P.

MARRON

Fondo = amarillo parduzco

acetico 2.tampón 10 ml Solución 2: Sol.64g .5 ml .5 g -Sol.H2O destilada 200 ml Solución de nitrato de Ag: -Nitrato de Ag 0. Tampón 50 ml Solución 1: .Sol .ac.Solución tampón: -Acetato sodico 1.hidroquinona 0.3 g . Acuosa de nitrato de plata 2 % a 60ºC. = 3 ml Solución de trabajo: sol 1 + sol 2 .

aclarar y montar.nitrato de Ag 1 % x 30 – 60 min -Lavar en sol. OSCUROS Fondo = amarillo parduzco . . .Lavar en sol. Tampón. Tampón -Deshidratar. Tampón . H.Sol. -Enjuagar en agua c.P. -Sol de trabajo 3 min.-Desparafinar e hidratar.

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ROJO CONGO .

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5 % 47. -Tratar con permanganato acido de potasio x 30 seg. lavar en H2O destilada. -Deshidratar .5 ml SOLUCION ACUOSA DE ACIDO OXALICO 1 %: PROCEDIMIENTO: -Desparafinar e hidratar. Sulfúrico 3 % 2. .lavar en H2O destilada. Acuosa de ac.H2O destilada 100 ml SOLUCION DE PERMANGANATO ACIDO DE POTASIO: -sol acuosa de permanganato de K 0. X 1 min. aclarar y montar. -Rojo congo 30 min -Sol. .H. -H2O c. x 15 min. lavar H2O c. De carbonato de litio x 15 seg.5 ml . x 2min. De rojo Congo 1 g . .SOLUCIONES: SOLUCION DE ROJO CONGO: -Sol.sol. -Ac oxálico 1 % hasta blanquear.

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polarizada (verde manzana) .

. mucoproteínas. (glucógenos). mucopolisacáridos neutros.Colorea los hidratos de carbonos. los hongos. entre otros.

H2O destilada 100 ml 5.Solución de HCl 1 N: -HCl concentrado 8. agitarlo… Solución acuosa de ac. Periyódico 0. Día en frasco hermético y oscuro… adquirió color amarillento.Carbón activado 0.H2O destilada 100 ml Reactivo de Schiff: 1. + 3.Solución de HCl 1 N 10 ml 3.35 ml . agitarlo x 20 min. peryódico 0. Dejarlo hasta sgte.5 g -H2O destilada 100 ml .5 g 4.5 g 2.25 g Disolver 1 en 2 en 4 caliente hasta ebullición. Enfriar.5 % -Cristales de ac. + 5 .Disulfito de Na 0. Fucsina básica 0.

PROCEDIMIENTO: -Desparafinar e hidratar las secciones. . núcleo azul.Aclarar y montar RESULTADO: Las sustancias PAS positivas color rojo. Peryódico 10min -Lavar H2O destilada -Reactivo de Schiff 5-7min -Lavar c/ H2O destilada 3-5min -H x 2 min -Lavar en H2O c. -Deshidratar . -Ac.

RIIÑON = GLUCOGENO .

.Se utiliza también para demostración de producción de mucina por las células tumorales de una neoplasia epitelial.

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X200).El borde en cepillo de los túbulos proximales tiene afinidad por los reactivos usados en la coloración de PAS (flechas). . (PAS.

GLOMERULO NEFRITIS .

tubulares y de la cápsula de Bowman. .tiñe de forma específica las membranas basales glomerulares.

membrana basal .glucógeno .glándulas mucosas . Dentro de las sustancias positivas tenemos: .

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aunque en menor intensidad. . TRICRÓMICA DE MASSON: Fibras de colágeno tipo I que forman fibras gruesas o haces. también evidencia. las fibras reticulares. citoplasma y las fibras de colágeno. diseñados para dar resistencia. Se emplean colorantes para diferenciar los núcleos.

1% 10 ml Solución acido Fosfotúngtico 5 % -Ac. Fosfotúngtico 5g -H2O destilada 100ml Solución de azul de anilina: -Azul anilina 2. B = 1/1 VOL -H (1g) -alcohol absoluto 100 ml Solución FUCSINA ACIDA: -sol. FERRICA: Solución B de HEMATOX. acuosa de fucsina ac. acuosa de escarlata Biebrich 1% 90 ml -sol. Acetico 2 ml -Ac. Acético glacial 5ml Solución A de HEMATOX. A + SOL.5g Solución de acido acético 1%: -Ac. Acetico glacial 1 ml -Ac.Solución de Bouin: -Sol. Acuosa saturada de ac. FERRICA: -cloruro férrico 29% (4ml) -agua destilada 95 ml Solución TRABAJO de HEMATOX. -HCl concentrado 1 ml -SOL. Acético glacial -H2O destilada 100ml -H2O destilada 100ml . pícrico (75ml) -formaldehido comercial 25ml -Ac.

Sol. 10min. - - - - PROCEDIMIENTO: Desparafinar e hidratar hasta agua c. y H2O destilada H2O acética 1% 3-5 min OH 95% y absoluto 2cambios. H. de fucsina ac. De anilina 5 a 10 min. Fijador de Bouin x 1h Lavar hasta desaparecer color amarillo. Fe x 10 min y lavar agua c. X 15 min H2O destilada enjuague Solución acido Fosfotúngtico 5 % Sol. xilol 2 cambios bálsamo .

FIBRAS COLAGENAS Y MOCO= AZUL (ANILINA) . QUERATINA.CITOPLASMA.-NUCLEOS= OSCUROS . FIBRAS MUSCULARES= ROJO .

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. el depósito de colágeno periglomerular y. por ende. X600). la esclerosis intersticial con mayor resalte de la atrofia tubular. Estos "trombos" son positivos para inmunoglobulinas (IgG e IgM). Las técnicas de tricrómico también definen nítidamente las zonas de glomeruloesclerosis. (Tricrómico de Masson.Señalan trombos hialinos intracapilares.

Glomerulonefritis membranoproliferativa .

destacar la cantidad y distribución de la fibrosis y demostración de nódulos en la cirrosis .

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HCl 2 ml Solución de H/E: . x 20 seg.E X 15 seg -Lavar en H2O C. -Deshidratar. Azul . x 2 min -H x 2 min -Lavar en H2O c.ferrocianuro de k 2 g Solución acuosa de HCl 2%: . x 1 min .H2O destilada 100 ml .1 vol.Solución acuosa de ferrocianuro de K 2%: .H2O destilada 100 ml -Desparafinar e hidratar. aclarar y montar. De HCl x 15-20 min hasta tomar colorac.+ 1 vol.lavar c/ H2O c. Ferricianuro de K x 1min . . .

El Fe demostrable por este método se hala bajo forma de hemosiderina.Demostración de hierro trivalente. .  RESULTADOS: Los depósitos de Fe se observan de color azul turquesa.OBJETIVO: . núcleos de color morado y citoplasma rosado.

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sales de Fe = azul Núcleos.Hemosiderina. citoplasma = rosa a rojo .

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.Para hemosiderina: (Perls) especialmente útil en patología hepática para la demostración de cúmulos de Fe en los hepatocitos en distintas situaciones o en casos extremos de hemosiderosis (ejemplo en la enfermedad genética hemocromatosis).

medula ósea y células de Kupffer del hígado. La hemosiderina es una forma parcialmente desnaturalizada de ferritina que se aglomera con facilidad y reconoce en el examen microscópico como unos gránulos azulinos en el citoplasma = debido a la reacción de Perls. (presencia de Fe trivalente). Normalmente se halla en bazo.  .

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GRACIAS POR SU ATENCION .

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