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FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD ESCUELA PROFESIONAL DE ESTOMATOLOGA

TEMA: PRACTICA N 8

DOCENTE VICTOR ADRIAN ZAPATA

CURSO: MICROBIOLOGA Y PARASITOLOGA

ALUMNO WALTER QUISPE HOLGUN.

CICLO: III-B-3erGrupo

PIMENTEL 2011

INTRODUCCIN

Si bien es cierto que la ciencia para llegar a descubrimientos cuantiosos e importantes ha sido necesaria: la prctica, las comprobaciones y anlisis de dichas hiptesis que necesitaban comprobar, la cual les ayudaban a llegar a una respuesta.

Este informe esta realizado con la finalidad de aprender, practicar y analizar cada prueba que fue tomada de un animal de experimento. El animal de experimentacin debe estar criado bajo condiciones estndares a una determinada temperatura, con alimentacin balanceada y aislados de enfermedades, con el propsito de obtener resultados reproducibles y confiables disminuyendo as la variabilidad que existe entre los experimentos.

Existen diferentes vas de inoculacin, estas pueden ser intravenosa, intraperitoneal, subcutnea, intradrmica, gstrica y por cojinete plantar, pero en este caso realizaremos solo las intradrmica, intraperitoneal y la subcutnea; la cual se le suministrara un antgeno.

Estos procedimientos deben evitar el posible sufrimiento de los animales, ya que el lastimar al animal en el momento de la inoculacin puede alterar los resultados, en este caso reconocimiento y observacin en microscopio de: antgeno, bazo y sangre.

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA:

Practica de sistema inmunolgico, vas de inoculacin y observacin de rganos del sistema inmune con animales de experimentacin.

HIPTESIS: Los antgenos y los anticuerpos eliminan u/o limpian los microorganismos perjudiciales para la salud actuando para su destruccin o neutralizacin. OBJETIVOS:

Es de gran importancia el conocer a si cmo tener experiencia en el manejo de animales, vas de inoculacin y toma de muestra de ellos, ya que en ellos se pueden experimentar o probar sustancias qumicas, medicamentos, vacunas, para el progreso y beneficio de la humanidad. Hay que recalcar que tambin son seres vivos y sienten dolor, por lo que se les debe proporcionar un trato tico y tratando de que estos no sufran ya que ellos son sacrificados para el aprendizaje. En suma podemos decir que nos ayuda a: Conocer y practicar las vas de inoculacin y sangrado en animales. Manejar a los ratones para obtener experiencia.

EXPERIMENTO

MATERIALES Y MTODOS: Guarda polo Guantes Algodn Portaobjetos

Tincin Wright Microscopio Suero fisiolgico Jeringas

1) VIAS DE INOCULACION

Tcnicas de inoculacin

Tcnicas de Sangrado

Sujetar e inmovilizar al animal.

Sujetar e inmovilizar al animal

Anestesiar. Si es necesario Inocular (Intravenosa, intraperitoneal, subcutnea, intradrmica, gstrica y por cojinete plantar)

Anestesiar. Si es necesario Realizar incisin (Cardiaca, yugular, vena axilar, plexo venoso oftlmico etc. Dependiendo del requerimiento)

VA INTRAPERITONEAL Se usa jeringas y aguja calibre 25 27 G. a 1 pulgada, de bisel pequeo. Aplicando la sujecin con una mano e inmovilizando la pata izquierda del ratn, con una inclinacin hacia craneal para producir un desplazamiento de las vsceras con el fin de no lesionarlas. Se inserta la aguja en la piel en el cuadrante izquierdo inferior del abdomen, luego se lleva hacia craneal y se introduce en la cavidad peritoneal, levantando la aguja en contra de la pared abdominal para evitar la puncin en el interior del intestino; la jeringa con aguja debe estar paralela a la columna vertebral. Una rpida administracin del fluido puede causar daos en el tejido y hemorragia debido a la presin interna.

VA INTRAMUSCULAR Se realiza en la regin antero-lateral del muslo con

agujas de 26 a 30G, pulgada con jeringa de tuberculina. El volumen mximo es de 0,05mL. Esta va no es muy usada debido a la poca masa muscular del ratn y al posible dao que se le puede causar a las estructuras vitales.

VA SUBCUTNEA

Esta va es utilizada como alternativa a la intramuscular, en los ratones. Se prefieren los sitios en que abunde tejido conjuntivo, en el dorso a nivel del cuello o los flancos. La aguja se inserta en la piel paralela a la columna vertebral, la cual se utiliza agujas de 25 a 27 G, a pulgada con jeringas de tuberculina.

2) LA INFLAMACION La inflamacin es una respuesta defensiva del organismo ante un agente irritante o infectivo. Puede ser aguda o crnica, y se manifiesta mediante hinchazn, enrojecimiento, calor, dolor y alteracin en el funcionamiento del rea u rgano afectados. Cuando un tejido es daado, por un golpe, por ejemplo, sus clulas liberan una sustancia llamada histamina, que produce la dilatacin de los vasos sanguneos y, por consiguiente, el aporte de grandes cantidades de sangre hacia el rea afectada. Adems, los tejidos inflamados liberan lquido intracelular, conocido como exudado inflamatorio, que puede acumularse infiltrando los tejidos y dificultando o imposibilitando el funcionamiento del rgano o de la regin afectada. Las inflamaciones pueden ser agudas o crnicas. Son agudas cuando presentan un perodo de hinchazn, dolor e incapacidad crecientes, que luego disminuyen en poco tiempo; se denominan crnicas cuando se prolongan durante meses o aos, presentando perodos de mayor o menor intensidad, de acuerdo con factores como la humedad, la dieta o el estado del propio sistema inmunitario. La gravedad, la duracin y las caractersticas peculiares de cada respuesta inflamatoria dependen del rea afectada, de su estado previo y de la causa que la provoca.

SINTOMAS La presencia extra de sangre y de lquidos en el rea afectada produce una tumefaccin o hinchazn perceptible con facilidad, al tiempo que el aumento del volumen sanguneo provoca el enrojecimiento y la sensacin de calor en la zona circundante.

El dolor de esa zona est causado por la presin sobre las terminaciones nerviosas ejercidas por la tumefaccin, as como por la intensa estimulacin o irritacin de las terminaciones sensitivas, provocada por algunos de los componentes del exudado inflamatorio. Otras manifestaciones clnicas de las inflamaciones pueden ser la limitacin funcional del rgano involucrado, por accin directa de los factores patgenos, la alteracin de la circulacin sangunea en la zona o un cambio en el volumen del rgano afectado.

Una inflamacin puede afectar slo una pequea rea del cuerpo, como cuando se produce un corte de un dedo, o bien todo el organismo, como en el caso de una afeccin reumtica. CAUSAS Las causas de las inflamaciones son muy numerosas y abarcan todos aquellos agentes que pueden ocasionar algn dao a los tejidos del organismo. Por lo tanto existe una relacin directa entre los agentes patgenos y el tipo de inflamacin producida por ellos; as, los grmenes pigenos, nombre con que se conoce los microbios ordinarios que producen el pus, siempre causan supuracin. En otros casos, como ya se ha indicado, la inflamacin es idioptica, es decir, de causa desconocida, y muchas veces est ligada a procesos de autoinmunidad. De todas maneras, la relacin entre los microbios y el tipo de inflamacin no es constante, y para el diagnstico debe considerarse que la inflamacin puede variar por el estado circunstancial del organismo o por el tipo de accin de la causa nociva. Adems, debe tenerse en cuenta las dolencias, por lo general crnicas, que pueden influir de una manera directa o indirecta en la propensin a sufrir inflamaciones, como la diabetes o la uricemia, entre otras. En algunas ocasiones se producen inflamaciones debido a que el cuerpo fabrica demasiados anticuerpos sin razn aparente; esto sucede en los casos de fiebre reumtica entre los nios. Tambin el organismo genera anticuerpos para luchar contra sustancias por lo comn inofensivas, que causan ciertas reacciones originando una inflamacin; esto sucede ante las alergias, como la fiebre del heno. DE FORMA ESQUEMTICA PODEMOS DIVIDIR LA INFLAMACIN EN CINCO ETAPAS (PROCESO): 1Liberacin de mediadores: Son molculas, la mayor parte de ellas, de estructura elemental que son liberadas o sintetizadas por el mastocito bajo la actuacin de determinados estmulos. Efecto de los mediadores: Una vez liberadas, estas molculas producen alteraciones vasculares y efectos quimiotcticos que favorecen la llegada de molculas y clulas inmunes al foco inflamatorio. Llegada de molculas y clulas inmunes al foco inflamatorio: Proceden en su mayor parte de la sangre, pero tambin de las zonas circundantes al foco. Regulacin del proceso inflamatorio: Como la mayor parte de las respuestas inmunes, el fenmeno inflamatorio tambin integra una serie de mecanismos inhibidores tendentes a finalizar o equilibrar el proceso. Reparacin: Fase constituida por fenmenos que van a determinar la reparacin total o parcial de los tejidos daados por el agente agresor o por la propia respuesta inflamatoria.

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3) RGANOS DEL SISTEMA INMUNE Sistema linftico: El sistema inmunitario est formado por los rganos linfoides y por los linfocitos, adems de otros leucocitos que circulan por la sangre y la linfa. Al igual que el sistema sanguneo (circulatorio) es un sistema diseminado por todo el cuerpo. rganos linfoides.- Son los lugares donde maduran los linfocitos pueden ser: A) PRIMARIOS: Son los lugares principales en la formacin de linfocitos; Son: -TIMO localizado en el trax junto al corazn. Interviene en la formacin de linfocitos T -Mdula sea Formacin de Linfocitos B B) SECUNDARIOS PERIFERICOS: Es el lugar donde los linfocitos ya maduros reaccionan entre s con el Antgeno y desarrollan la respuesta inmune son: -Ganglios linfticos -Bazo -Tejido linfoide: Amgdalas, placas de Pyer e intersticio Hay 2 tipos de linfa: intersticio (zona interna) y circulante (la que est en los vasos linfticos. Su circulacin es de rgano de corazn. Clulas del sistema linftico: Leucocitos o glbulos blancos que pueden ser granulocitos que son los responsables de la respuesta inespecfica intervienen en inflamacin aguda.

Proteccin frente a microorganismos hay 3 tipos: 1) Neutrofilos: Son los ms abundantes, los primeros que llegan a la infeccin y son macrfagos. 2) Eosinfilos: Son macrfagos, menos abundantes y aparecen cuando hay parsitos. 3) Basfilo: liberan histaminas PROCEDIMIENTO

SUERO FISIOLGICO El suero fisiolgico es una disolucin acuosa de sustancias compatibles con los organismos vivos debido a sus caractersticas definidas de osmoticidad, pH y fuerza inica. Est compuesto de agua, electrolitos y, a veces, distintas sustancias, como por ejemplo la glucosa, fuente de carbono y energa para el organismo, y de algunos polisacridos expansores. Se emplea como sustituto de la sangre cuando disminuye drsticamente la volemia y como va de aplicacin de diversas sustancias (por ejemplo, inyectables). Tambin es bueno en las curaciones de perforaciones en la piel, en vmitos constantes (oralmente) y en obstrucciones nasales.

La que observamos en el dibujo es la va intradrmica; cual comenzamos mojando el pelaje del cuy descubriendo as su piel para una mejor observacin, desinfectando la parte en que se realizara la inyeccin, pasamos luego a listar la jeringa con el suero para inyectar, formando una ppula como se aprecia en la imagen; recordando k ira hacia arriba el bisel de la aguja y sin burbujas (dando pequeos golpes a la jeringa)

En la va subcutnea se hace el mismo procedimiento (mojar el pelaje, limpiar la parte a tratar, alistar jeringa con suero y misma posicin de la aguja), en este tipo de va la inyeccin a ejecutar es ms profunda ocasionando en algunos casos un poco de sangrado ya que es ms profunda que la intradrmica.

Y por ultimo realizamos la va intraperitoneal para ello es la misma preparacin (animal y jeringa), como se puede observar en la imagen se realiza en el abdomen parte baja; ah la inyeccin es ms profunda ya que se realiza en el tejido conjuntivo la cual se inyectara el antgeno; dejndolo reposar por unos minutos al cuy.

Despus de lo observado se va sacar el antgeno inyectado poniendo una pequea muestra en un portaobjeto estril dejar secar y ejecutar el proceso de tincin Wright. Tambin se extraer un fragmento del bazo del cuy se fagocitara con suero y se cortara en pequeas partculas con sacando una muestra ms en otro portaobjetos estril, mismo proceso de tincin que el anterior (tincin Wright). Por ltimo se sacara una gota de sangre del mismo para hacer una observacin (misma tincin k los anteriores).

RESULTADOS Y ANALISIS:

CONCLUSIONES Pudiendo llevar la prctica adecuadamente se pudo llegar a las conclusiones y al aprendizaje: por primera parte las diferentes vas de inoculacin como son la intradrmica, sub cutnea y la intraparietal, a travs de estas se pudo observar la accin del organismo por parte de las clulas inmunolgicas por la reaccin y la memoria inmunolgica. La otra parte es el proceso de inflamacin que se dio en dos pasos: La agresin se dio con la inyeccin del antgeno Respuesta celular de accin que dio el organismo enviando macrfagos y neutrofilos.

Y por otra parte se pudo diferenciar los diferentes rganos del sistema inmune como son el bazo y la cadena de ganglios linfticos en la regin axilar. Por parte ultima se tomo muestras del bazo del animal de experimentacin, se extrajo tambin el antgeno que se le haba inyectado al cuy y por ultimo se tomo muestra de sangre y a todo esto se le hizo tincin Wright pudiendo observar en el microscopio lo explicado.

BIBLIOGRAFIA Y LINKCOGRAFIA

Manual de practicas de MICROBIOLOGIA DE LA ULADECH Chimbote EDITORES: varios Profesores Ctedra Microbiologa- 2009 www.uco.es/grupos/inmunologia.../etexto13.htm www.uclm.es/ab/enfermeria/.../pinflamatorio4.htm -