Está en la página 1de 32
Enzimas Q.F. JAVIER MARTINEZ CARRERAS
Enzimas
Enzimas

Q.F. JAVIER MARTINEZ CARRERAS

OBJETIVOS 1. Desarrollar los conceptos de enzimas y de isoenzima 2. Desarrollar sus propiedades generales.

OBJETIVOS

1. Desarrollar los conceptos de enzimas y de

isoenzima

2. Desarrollar sus propiedades generales.

3. Explicar la clasificación y los sistemas de

nomenclatura de las enzimas.

4. Explicar los factores que influyen sobre la

velocidad de las reacciones químicas.

5. Desarrollar el concepto de Inhibición

enzimatica, explicando sus tipos y el

mecanismo de acción.

CONTENIDO 1. Conceptos de enzimas y de isoenzima 2. Propiedades generales. 3. Nomenclatura de las

CONTENIDO

1.

Conceptos de enzimas y de isoenzima

2.

Propiedades generales.

3.

Nomenclatura de las enzimas.

4. Clasificación y naturaleza

5.

Mecanismo de acción enzimatica

6.

Actividad enzimatica. Factores

7.

Inhibición enzimatica

DEFINICIÓN LAS ENZIMAS son proteínas que se comportan como catalizadores muy potentes y eficaces de
DEFINICIÓN
DEFINICIÓN
DEFINICIÓN LAS ENZIMAS son proteínas que se comportan como catalizadores muy potentes y eficaces de las

LAS ENZIMAS son proteínas que se

comportan como catalizadores muy

potentes y eficaces de las reacciones

químicas de los sistemas biológicos.

La

CATÁLISIS

sistemas vivos.

ENZIMÁTICA

es

esencial

para

los

La mayoría de las R.Q. ocurrirían muy lento en

condiciones biológicamente significativas.

Hace posible que en condiciones fisiológicas tengan lugar reacciones que sin catalizador requerirían

condiciones extremas de presión, temperatura o pH.

Las biomoléculas son muy estables a pH neutro, temperatura suave y ambiente acuoso

de presión, temperatura o pH. • Las biomoléculas son muy estables a pH neutro, temperatura suave
PROPIEDADES LOS CATALIZADORES 1º Son eficaces en pequeñas cantidades. 2º No se alteran durante las

PROPIEDADES LOS CATALIZADORES

1º Son eficaces en pequeñas cantidades.

2º No se alteran durante las reacciones en que participan.

3º Aceleran el proceso para la obtención del

equilibrio de una reacción reversible.

4º Muestran especificidad. La acción de la

enzima es extremadamente selectiva sobre un

sustrato específico.

Estructura • La actividad catalítica depende de la integridad de su conformación proteica nativa •

Estructura

La actividad

catalítica

depende de la integridad de

su conformación proteica nativa

Si se desnaturaliza o disocia en subunidades pierde su actividad.

Estructuras 1°, 2°, 3° y 4° son

esenciales

• Si se desnaturaliza o disocia en subunidades pierde su actividad. • Estructuras 1°, 2°, 3°
Estructura Parte proteica ( apoenzima) que le da la estructura y la capacidad de reconocer

Estructura

Parte proteica (apoenzima) que le da la estructura y la capacidad de reconocer determinado sustrato

Parte no-proteica (cofactor) que le da la capacidad de acción sobre el

sustrato El cofactor puede ser:

Naturaleza inorgánica: iones metalicos

Naturaleza orgánica: “coenzima”

apoenzima + grupo prostético

=

holoenzima

inorgánica: iones metalicos Naturaleza orgánica: “coenzima” apoenzima + grupo prostético = holoenzima
COFACTORES Metaloenzimas Iones o moléculas inorgánicas. Fe++, Mg++, Mn++, Zn++ etc imprescindibles en la dieta)

COFACTORES

Metaloenzimas Iones o moléculas inorgánicas.

Fe++,

Mg++,

Mn++,

Zn++

etc

imprescindibles en la dieta)

(oligoelementos

Los cofactores son activadores inorgánicos de la

enzima y actúan induciendo reordenamientos

eléctricos adecuados para la unión E-S.

COENZIMA

Molécula orgánica, por ej. un nucleótido que

contiene una vitamina.

Son coenzimas NAD, FAD, CoA, etc

VITAMINAS • Conjunto compuestos orgánicos muy variados (químico) • Característica común: no sintetizados x

VITAMINAS

Conjunto compuestos orgánicos muy

variados (químico)

Característica común: no sintetizados x

hombre.

Pequeñas cantidades (µg y mg/día) no aportan energía.

Componentes de determinados

coenzimas.

Liposolubles e HIDROSOLUBLES

VITAMINAS FUNCIONES Enfermedades carenciales C (ácido ascórbico) Coenzima de algunas peptidasas. Interviene

VITAMINAS

FUNCIONES

Enfermedades carenciales

C (ácido ascórbico)

Coenzima de algunas peptidasas. Interviene en la síntesis de colágeno

Escorbuto

B1 (tiamina)

Coenzima de las descarboxilasas y de las enzima que transfieren grupos aldehidos

Beriberi

B2 (riboflavina)

Constituyente de los coenzimas FAD y FMN

Dermatitis y lesiones en las mucosas

B5 (ácido pantotínico)

Constituyente de la CoA

Fatiga y trastornos del sueño

B3 (niacina)

Constituyente de las coenzimas NAD y NADP

Pelagra

B6 ( piridoxina)

Interviene en las reacciones de transferencia de grupos aminos.

Depresión, anemia

B12 (cobalamina)

Coenzima en la transferencia de grupos metilo.

Anemia perniciosa

Biotina

Coenzima de las enzimas que transfieren grupos carboxilo, en metabolismo de aminoácidos.

Fatiga, dermatitis

NOMENCLATURA Nombre trivial, enzimas fueron nombradas atendiendo al sustrato sobre el que actuaban, añadiéndole el

NOMENCLATURA

Nombre trivial, enzimas fueron nombradas

atendiendo al sustrato sobre el que actuaban,

añadiéndole el sufijo -asa o haciendo referencia

a la reacción catalizada.

La amilasa, la hidrólisis del almidón; la lipasa, la

hidrólisis de lípidos; la ADNasa, la hidrólisis del ADN; la ATPasa, la hidrólisis del ATP, etc.

Clasificación 1. Oxido-reductasas ( Reacciones de oxido-reducción). Si una molécula se reduce, tiene que haber
Clasificación 1. Oxido-reductasas ( Reacciones de oxido-reducción). Si una molécula se reduce, tiene que haber

Clasificación

1. Oxido-reductasas

( Reacciones de oxido-reducción).

1. Oxido-reductasas ( Reacciones de oxido-reducción). Si una molécula se reduce, tiene que haber otra que

Si una molécula se reduce, tiene que haber otra que se oxide

2. Transferasas

(Transferencia de grupos funcionales)

2. Transferasas (Transferencia de grupos funcionales) · grupos aldehídos · grupos acilos · grupos glucósidos ·

· grupos aldehídos

· grupos acilos

· grupos glucósidos

· grupos fosfatos (kinasas)

Clasificación 3. Hidrolasas Transforman polímetros en monómeros. Actúan sobre: (Reacciones de · enlace
Clasificación 3. Hidrolasas Transforman polímetros en monómeros. Actúan sobre: (Reacciones de · enlace

Clasificación

3.

Hidrolasas

Transforman polímetros en monómeros. Actúan sobre:

(Reacciones de

· enlace éster

(Reacciones de · enlace éster

hidrólisis)

· enlace glucosídico

· enlace peptídico

· enlace C-N

4.

Liasas

· Entre C y C

4. Liasas · Entre C y C

(Adición a los

· Entre C y O

dobles enlaces)

· Entre C y N

Clasificación 5. Isomerasas (Reacciones de isomerización) 6. Ligasas (Formación de enlaces, con aporte de ATP)
Clasificación 5. Isomerasas (Reacciones de isomerización) 6. Ligasas (Formación de enlaces, con aporte de ATP)

Clasificación

5. Isomerasas

(Reacciones de

isomerización)

5. Isomerasas (Reacciones de isomerización)

6. Ligasas

(Formación de enlaces,

con aporte de ATP)

6. Ligasas (Formación de enlaces, con aporte de ATP) · Entre C y O · Entre

· Entre C y O

· Entre C y S

· Entre C y N

· Entre C y C

Isoenzimas • Son enzimas que difieren en su forma estructural pero que poseen la misma

Isoenzimas

Son enzimas que difieren en su forma estructural pero que poseen la misma actividad catalítica, catalizan la misma reacción.

Hidrogenasas, oxidasas, transaminasas,

fosfatasas, transfosforilasas, y enzimas

proteolíticas

Dos isoenzimas de la ciclooxigenasa que son

capaces de convertir el ácido araquidónico en

prostaglandinas: La PGH Sintetasa 1 (llamada

COX-I) y la PGH Sintetasa 2 (llamada COX-II).

MECANISMO DE ACCIÓN ENZIMÁTICA • Sustancia sobre la que actúa la enzima se llama sustrato.

MECANISMO DE ACCIÓN

ENZIMÁTICA

Sustancia sobre la que actúa la enzima se llama

sustrato.

Propiedades cataliticas → “centro activo”

Acción enzimática formación de un complejo

enzima-sustrato (estado de transición).

• Sustrato se une al “centro activo” través de

numerosas interacciones débiles (puentes de

hidrógeno, electrostáticas, hidrófobas, etc)

MECANISMO DE ACCIÓN ENZIMÁTICA 1.- El enzima y su sustrato 2.- Unión al centro activo

MECANISMO DE ACCIÓN ENZIMÁTICA

1.- El enzima y su sustrato

2.- Unión al centro activo

3.- Formación de productos

ENZIMÁTICA 1.- El enzima y su sustrato 2.- Unión al centro activo 3.- Formación de productos
ENZIMÁTICA 1.- El enzima y su sustrato 2.- Unión al centro activo 3.- Formación de productos
ENZIMÁTICA 1.- El enzima y su sustrato 2.- Unión al centro activo 3.- Formación de productos
E + S  ES  E + P
E + S
ES
E + P
¿Cómo actúan las enzimas como catalizadores? MODELO LLAVE-CERRADURA Supone que la estructura del sustrato y

¿Cómo actúan las enzimas como catalizadores?

MODELO LLAVE-CERRADURA

Supone que la

estructura del sustrato y la

del centro activo son

complementarias, de la

misma forma que una llave

encaja en una cerradura. Este modelo es válido en muchos casos, pero no es siempre correcto. (Fischer

1890)

que una llave encaja en una cerradura. Este modelo es válido en muchos casos, pero no
que una llave encaja en una cerradura. Este modelo es válido en muchos casos, pero no
¿Cómo actúan las enzimas como catalizadores? Hipótesis del Ajuste Inducido (Daniel Koshland, 1958) E Induce

¿Cómo actúan las enzimas como catalizadores?

Hipótesis del Ajuste Inducido (Daniel Koshland, 1958)

E Induce al S a configuración aproximada al Edo. Transición

UNE S REDUCE E a IMPULSA Catalisis LIBERA P SE REGENERA

al S a configuración aproximada al Edo. Transición UNE S REDUCE E a IMPULSA Catalisis LIBERA
al S a configuración aproximada al Edo. Transición UNE S REDUCE E a IMPULSA Catalisis LIBERA
Actividad Enzimatica • Principal función es regular la velocidad a la que se desarrolla las

Actividad Enzimatica

Principal función es regular la velocidad a la que

se desarrolla las reacciones

Cinética enzimática, estudia la velocidad de los

procesos catalizados enzimaticamente.

Capacidad catálitica de las enzimas radica en

las propiedades del “Centro Activo”

Estructura depende del plegamiento espacial de

la proteína.

Enzima pH óptimo Pepsina 1.5 Tripsina 7.7 Catalasa 7.6 Arginasa 9.7 Fumarasa 7.8

Enzima

pH óptimo

Pepsina

1.5

Tripsina

7.7

Catalasa

7.6

Arginasa

9.7

Fumarasa

7.8

Ribonucleasa

7.8

Pepsina 1.5 Tripsina 7.7 Catalasa 7.6 Arginasa 9.7 Fumarasa 7.8 Ribonucleasa 7.8
Pepsina 1.5 Tripsina 7.7 Catalasa 7.6 Arginasa 9.7 Fumarasa 7.8 Ribonucleasa 7.8
Pepsina 1.5 Tripsina 7.7 Catalasa 7.6 Arginasa 9.7 Fumarasa 7.8 Ribonucleasa 7.8
Pepsina 1.5 Tripsina 7.7 Catalasa 7.6 Arginasa 9.7 Fumarasa 7.8 Ribonucleasa 7.8
Pepsina 1.5 Tripsina 7.7 Catalasa 7.6 Arginasa 9.7 Fumarasa 7.8 Ribonucleasa 7.8
Pepsina 1.5 Tripsina 7.7 Catalasa 7.6 Arginasa 9.7 Fumarasa 7.8 Ribonucleasa 7.8
Enzima Temp. Ópt. ( o C) Mamíferos 37 Bacterias y algas aprox . 100 Bacterias

Enzima

Temp. Ópt.

( o C)

Mamíferos

37

Bacterias y algas

aprox.

100

Bacterias Árticas

aprox.

0

37 Bacterias y algas aprox . 100 Bacterias Árticas aprox. 0 Bacterias en muestra de hielo
37 Bacterias y algas aprox . 100 Bacterias Árticas aprox. 0 Bacterias en muestra de hielo

Bacterias en muestra de hielo antigua

El aumento de temperatura aceleran las reacciones químicas: por cada 10ºC de incremento, la velocidad

El aumento de

temperatura aceleran las

reacciones químicas: por cada 10ºC de incremento, la velocidad de reacción se duplica. Las

reacciones catalizadas por

enzimas siguen esta ley general.

Proteínas (desnaturalizar)

La temperatura a la cual la actividad catalítica es máxima se llama temperatura óptima.

Efecto de la temperatura en

la actividad enzimática

la actividad catalítica es máxima se llama temperatura óptima. Efecto de la temperatura en la actividad
• Desviaciones de pocas décimas por encima o por debajo del pH óptimo pueden afectar

Desviaciones de pocas décimas

por encima o por debajo del pH

óptimo pueden afectar drásticamente su actividad.

Así, la pepsina gástrica tiene un

pH óptimo de 2, la ureasa lo tiene a pH 7 y la arginasa lo tiene a pH

10.

Como ligeros cambios del pH pueden provocar la

desnaturalización de la proteína

(amortiguadores fisiológicos)

Efecto del pH en la

actividad enzimática

provocar la desnaturalización de la proteína (amortiguadores fisiológicos) Efecto del pH en la actividad enzimática
Estructura globular  Hervir con HCl  Tripsina  Temperatura elevada  pH extremo Funcionalidad
Estructura globular
Estructura
globular
 Hervir con HCl  Tripsina  Temperatura elevada
 Hervir con HCl
 Tripsina
 Temperatura elevada

pH extremo

Funcionalidad

Estructura globular  Hervir con HCl  Tripsina  Temperatura elevada  pH extremo Funcionalidad Inactiva

Inactiva

EFECTO DE LAS CONCENTRACIONES SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA Aunque se aumente la concentración de sustrato

EFECTO DE LAS CONCENTRACIONES

SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA

Aunque se aumente la

concentración de sustrato la

velocidad no aumenta linealmente, aparece un efecto de saturación.

La saturación se debe a que todos los centros activos están ocupados.

La velocidad depende de la

cantidad de enzima con

sustrato suficiente

a que todos los centros activos están ocupados. La velocidad depende de la cantidad de enzima
INHIBICION ENZIMATICA • Cualquier sustancia que reduzca la velocidad de una reacción catalizada enzimáticamente se

INHIBICION ENZIMATICA

Cualquier sustancia que reduzca la velocidad de

una reacción catalizada enzimáticamente se

puede considerar que es un inhibidor.

Drogas, antibióticos, preservativos, venenos y toxinas

Clasif.: irreversibles (enl. Covalentes inactivación permanente) y reversibles, inh. fisiologicos (enl.

No covalentes inactivación parcial)

Inhibición competitiva Poseen estructura semejante al sustrato y reconocidos por el centro activo. El inhibidor

Inhibición competitiva

Poseen estructura semejante al sustrato y reconocidos por el centro activo.

El inhibidor (I) compite con el sustrato ya que se une a la enzima y baja su concentración efectiva

E + S

ES -> E + P

+

I

EI

Inhibidor competitivo

Inhibidor competitivo

Inhibidor competitivo
Inhibición no competitiva • Inhibidor no impide la unión del sustrato a la enzima. •

Inhibición no competitiva

Inhibidor no impide la unión del sustrato a la enzima.

Se une a sitios de unión especificos en la molecula de la

enzima distinto del centro activo

Alteran la conformación espacial de la enzima,

impidiendo su unión al sustrato

Inhibidor presenta afinidad tanto por la enzima libre como por el complejo ES

E + S + I

ES -> E + P + I

EI

ESI

Inhibidor no competitivo

Inhibidor no competitivo

Inhibidor no competitivo
Inhibición acompetitiva Inhibidor se une al complejo ES. Carece de afinidad por la enzima libre.

Inhibición acompetitiva

Inhibidor se une al complejo ES.

Carece de afinidad por la enzima libre.

E + S

ES -> E + P

+

I

ESI