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Universidad Autnoma de Aguascalientes Centro de Ciencias Bsicas Departamento de Fisiologa y Farmacologa

Laboratorio de Fisiologa I

Prctica 1 Anatoma Macroscpica de los Sistemas de rganos

Dulce Mara Pedroza Montoya 2C Profesor: M. en C. Eduardo de la Cerda

Instructores: Julio Csar Aguilar Prez Jos Flix Rodrguez Ramrez

Jueves 18 de agosto de 2011

Introduccio n

Laboratorio de Fisiologa

Un sistema biolgico (o sistema orgnico) es un conjunto de rganos y estructuras similares que trabajan en conjunto para cumplir alguna funcin fisiolgica en un ser vivo. Los sistemas orgnicos comparten cierta coherencia morfo funcional, tanto en sus rganos y tejidos, como en sus estructuras y origen embriolgico. Aunque un rgano en particular desempee funciones especficas, hay rganos que funcionan como parte de un grupo denominado sistema; es la unidad de organizacin en que se basa el estudio de la medicina, la clasificacin de las enfermedades y la planificacin de los tratamientos. La funcin de un sistema est relacionada con la de otros sistemas. La comunicacin entre rganos y sistemas es fundamental ya que permite regular el funcionamiento de cada rgano de acuerdo con las necesidades generales del organismo. Las constantes biolgicas se mantienen gracias a la comunicacin. Gracias a este equilibrio, que se denomina homeostasis, no existe ni exceso ni defecto en el funcionamiento de los rganos y cada uno facilita las funciones de los dems.1

Muchas de las investigaciones cientficas son realizadas en animales de experimentacin, dentro de los cuales se incluyen primates no humanos como el mono rhesus, ungulados como las cabras y los borregos. Sin embargo, en la mayora de los experimentos se emplean especies pequeas de mamferos como los roedores; entre stos estn los conejos, los cobayos, los hamsters y, principalmente las ratas y los ratones.2 Las ratas Wistar son ratas albinas que pertenecen a la especie Rattus norvegicus. Esta variedad fue desarrollada en el Instituto Wistar en 1906 para su uso en la investigacin biolgica y mdica, y es la primera cepa de ratas desarrolladas para servir como un organismo modelo en un momento en que los laboratorios utilizaban principalmente Mus musculus, o el ratn comn de las casas. Ms de la mitad de todas las cepas de ratas de laboratorio son descendientes de la colonia original establecida por el fisilogo Henry Donaldson, Milton J. Greenman cientfico administrador, y Helen Dean King, investigadora en gentica y embriloga.

La rata Wistar es actualmente una de las cepas de ratas ms populares utilizadas para la investigacin de laboratorio. Se caracteriza por su cabeza ancha, orejas largas, y con una longitud de la cola que es siempre inferior a la longitud de su cuerpo. La rata Sprague Dawley y cepas de ratas Long-Evans se desarrollaron a partir de ratas Wistar. Las ratas Wistar son ms activas que otras cepas como ratas Sprague Dawley.3
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Objetivos

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Materiales
2 ratas Wistar Jeringas Agujas Gasa Anestsico Pinzas Tijeras

1. Manejo de la rata en el laboratorio. 2. Observaciones bsicas en la rata anestesiada 3. Aprender a aplicar inyecciones subcutneas, intramusculares e intraperitoneales. 4. Identificar y disecar los diferentes rganos que conforman a cada sistema orgnico. 5. Correlacionar los diferentes sistemas de rganos con sus respectivas funciones. Bistur Hilo camo Guantes Balanza Mesa de disecciones Solucin salina isotnica

Maniobras

Se comenz aprendiendo, practicando y dominando el manejo correcto de las ratas, evitando apretarlas, lastimarlas o causarles algun dolor, esto se logr tomandola por la cola con la mano izquierda y colocandola en la mesa, y con la mano derecha la sujetamos por el dorso colocando los dedos indice y anular a los costados de su cuello.

Concentracin del Pentobarbitl Sdico: 6.5 gr /100ml Dosis Rata 1 = (2.5 ml X 90 gr) / 5000 gr = 0.045 ml

Frmula para obtencin de la dosis adecuada = (2.5 ml X peso de la rata en gr) / 5000 gr Dosis Rata 2 = (2.5 ml X 140 gr) / 5000 gr = 0.052 ml
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Se realizaron los clculos pertinentes para determinar las dosis requeridas de anestsico:

Se tom la FC localizando el corazn y sintiendo cada latido, una vez identificado, se procedi a contarlos durante un minuto. Tambin se obtubo la FR observando los movimientos de inspiracin y espiracin de la caja torcica, de igual modo se contabilizaron durante un minuto. Ambas frecuencias se tomaron antes y despus del efecto de la anestesia. Se sujet a la rata dejando expuesto su abdomen y deteniendo sus patas para evitar que se movier o mordiera, se procedi a realiza la puncin intraperitoneal para la administracin del anestsico. Cuando estubo la rata bajo el efecto del antestsico, se sujetaron con el hilo caamo sus extreidades y se le coloc sobre l mesa para disecciones y se fijo a ella atndola a cuartoa puntos cercanos a las esquinas cada uno. Cada integrante del equipo realiz una inyeccin intramuscular en el muslo de la rata sobre la zona de mayor masa muscular y con la aguja de la jeringa en direccin oblicua (45 aproximadamente). Acontinuacin se estiro la piel de la linea media del abdomen y se realizo un corte con las tijeras hasta el cuello, se separ la piel del tejido muscular y ste se corto con el bisturi dejando as expuestas las cotsillas y el contenido de la cavidad adbominoplvica.

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Enseguida se procedi a identificar los rganos del sistema cardiovascular, urinario, respiratorio, digesivo, nervioso, endcrino y reproductor. Una vez identificados se realiz la diseccion de los diversos rganos o sistemas.

Resultados

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Exploracin de la anatoma externa de la rata

Nota: Las ratas presentaban pelo blanco y ojos de aspecto rojizo debido al albinismo (falta de melanina).
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Tabla que indica el sexo, peso y dosis de Pentobarbitol Sdico administrado

Sexo Peso Dosis de Pentobarbitol Sodico

Rata 1 Hembra 90 gr 0.045 ml

Rata 2 Macho 104 gr 0.052 ml

Tabla compartiva del estado fsico de la rata antes y despus de la aplicacin del anastsico va intraperitoneal.

Comportamiento Frecuencia Respiratoria Frecuencia Cardica Sentidos

Consciente, alerta, inquieta, reacciona ante el medio y los estmulos Ojos abiertos, olfato muy activo (movimiento de vibrisas) 111 respiraciones por minuto 129 latidos por minuto

Antes

Sin control ocular, se cerraron. Olfato sin actividad aparente. 56 respiraciones por minuto 112 latidos por minuto

Inconsciente, no reacciona a estimulos

Despus

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Exploracin de la anatoma interna de la rata (Diseccin)

Nota: adems de los rganos sealados, se logr localizar tambin el bazo, la glndula tiroides, la trquea, la aorta torcica, la aorta abdominal, las arterias iliacas primitivas, la mdula espinal, el encfalo, los nervios pticos, las costillas, la apfisis xifoides, los msculos espinales, el apndice, los riones con su glndula suprarrenal, prstata, ductos seminfero y en la rata hembra los oviductos y el tero bicrneo.

Imagen que muestra los principales rganos identificados en la rata disecada

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Discusio n

En la imagen superior se observan los rganos disecados por los miembros del equipo.

La primera condicin del cientfico que trabaja con animales de laboratorio es el respeto por la vida, el dolor o el sufrimiento a que stos pueden ser sometidos en los trabajos de experimentacin bajo su responsabilidad. Siempre que se usen animales en investigacin, se debe considerar que un objetivo tan importante como el de obtener resultados experimentales, ser el de minimizar cualquier dolor o angustia que dichos animales puedan sufrir. El refinamiento de los procedimientos para conseguir que estos no causen sufrimiento debe ser parte integrante de toda investigacin cientfica. Esto es importante tanto desde el punto de
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Es muy importante que durante las prcticas en que se utilizan seres vivos como material de trabajo e investigacin, estemos conscientes del manejo correcto de stos, tratarlos con respeto y con sumo cuidado, evitndoles dolor y sufrimiento en la mayor medida posible como lo explica la Q. F. Flor de Mara Fuentes Paredes en la Gua de manejo y cuidado de animales de laboratorio: ratn la secuenciacin del genoma del ratn ha dejado muy claro que, al menos a un nivel puramente gentico, los ratones y los hombres somos prcticamente hermanos gemelos. De hecho, a pesar de que han pasado aproximadamente 75 millones de aos desde que roedores y humanos divergieron en el proceso de la evolucin, la realidad es que no slo tenemos aproximadamente el mismo nmero de genes que estos animales (unos 30.000), sino que un 99% de nuestro ADN es idntico. Hasta tal punto nos parecemos, que incluso se ha descubierto que el organismo humano posee el gen que regula el crecimiento de la cola de los ratones. Esta extraordinaria similitud gentica entre Mus Musculus y Homo sapiens es una excelente noticia desde un punto de vista biomdico, ya que confirma la enorme utilidad del ratn como modelo animal para estudiar las causas genticas de muchos trastornos, as como para comprobar la eficacia de nuevas terapias experimentales. De hecho, el mapa gentico que se acaba de crear demuestra que el 90% de los genes asociados a enfermedades son idnticos en roedores y hombres. 5 La rata es utilizada por los cientficos en diversos laboratorios como objeto de experimentacin gracias a su gran similitud con el humano.

vista de la preocupacin humanitaria como para cumplir con los requisitos de la legislacin sobre animales de investigacin. Los investigadores que trabajen y experimenten con animales estn moralmente obligados a manifestarles tres tipos de actitudes: respeto, afecto y gratitud. Respeto: por tratarse de seres vivos y sensibles, que estn experimentando sufrimiento y podran terminar perdiendo la vida, tratrseles con todas las consideraciones que el caso merece. Afecto: considerndolos partcipes con nosotros, del misterio de la vida. Gratitud: reconocimiento por la importante ayuda al constituirse nuestros ms ntimos colaboradores. 4

Sin embargo, como esta revisin demuestra claramente, la biologa celular anatoma, fisiologa y molecular de los pncreas de rata (y tambin, probablemente, el pncreas de un ratn) difieren sustancialmente de los de los humanos. De hecho, se diferencian ms en la rata / ratn que cualquier otra especie de laboratorio comunes. Estas diferencias pueden ser irrelevantes si se est utilizando el pncreas como un modelo genrico en el que estudiar, por ejemplo, la exocitosis de clulas acinares o de sealizacin. Pero si uno est interesado en aspectos ms especficos de la funcin pancretica humana,
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El hgado se ubicaba sobre la cara caudal del diafragma extendindose a ambos lados del plano mediano desde el arco costal derecho hasta el izquierdo. Presentaba para su estudio las caras: parietal (craneal) de forma convexa relacionada al msculo diafragma y una cara visceral (caudal) cncava relacionada al estmago y parte craneal del duodeno. Se observ que estaba dividido en los lbulos derechos (lateral y medial), izquierdos (lateral y medial), cuadrado (muy pequeo) y caudado el cual presenta los procesos caudado y papilar (subdividido en parte dorsal y ventral). El proceso caudado tomaba contacto con el rin derecho y el proceso papilar acabalgaba sobre la curvatura menor del estmago. No presentaba vescula biliar.7

Al observar los rganos de la rata nos percatamos de que el pncreas se encuentra difuso y no como un rgano bien definido y localizado, del modo en que sucede en la anatoma del ser humano.

especialmente la funcin del conducto, en la salud y la enfermedad, en mi opinin la respuesta ms sencilla a la pregunta formulada por el ttulo de este artculo es: no, otras especies son ms adecuadas. 6

Lbulos hepticos de la rata7


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Como se pudo encontrar en la bibliografa citada, y constatar mediante la diseccin de la rata durante la prctica, el hgado de sta presenta mayor cantidad de lbulos que el de un humano, y as mismo no presenta vescula biliar.

Anatoma del Hgado Humano8

Otra diferencia identificada en la rata hembra fue la presencia de tero bicrneo, es decir con dos cuellos uterinos comunicados entre s por una sola vagina, tal como lo menciona Gabriela Nocetti (9). En Recomendaciones para la Eutanasia de los Animales de Experimentacin: Parte 2 podemos leer lo siguiente: El manual de prctica recomendaba utilizar como anestsico ter etlico administrado median una mscara, sin embargo se inyect pentobarbitol sdico.

ter y cloroformo. No se deben utilizar bajo ninguna circunstancia para el sacrificio de roedores. Ambos son extremadamente peligrosos para el tcnico y el ter produce irritacin de las vas areas al ser inhalado. Pentobarbital sdico. Acta rpida y humanitariamente en el sacrificio de todo tipo de roedores inyectado por va intravenosa o intraperitoneal. Se debe entrenar a todo el personal en el mtodo de inyeccin. El pentobarbital sdico produce irritacin del peritoneo, lo que puede evitarse diluyndolo. Se recomienda habitualmente el triple de la dosis anestsica. 10 Aunque ninguna de las dos sustancias sera utilizada para la eutanasia, dado que la muerte de la rata fue producida por un paro cardiorrespiratorio provocado al ingresar
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a la cavidad torcica durante la diseccin, la mejor eleccin fue anestesiar del modo que se hizo, as no lastimamos las mucosas respiratorias del roedor ni las nuestras.

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Adems utilizando la mascarilla con ter etlico, se corra el riesgo de que accidentalmente o por un descuido la rata dejara de inhalar el anestsico si se le era retirado, despertndose y sintiendo dolor, en cambio con la inyeccin intraperitoneal no se contaba con este peligro.

Conclusiones

1. La rata wistar es un elemento de importancia en la ciencia y en nuestro laboratorio, as mismo, como todo ser vivo debe ser tratado con respeto y sensibilidad. 2. La rata y el humano comparten caractersticas genticas, por lo tanto son parcialmente similares morfolgica y fisiolgicamente. 3. La diseccin es una herramienta bsica para el estudiante de medicina, debido a que nos permite observar eventos fisiolgicos que no se comprenden por completo solo con la literatura y experimentar maniobras que no podramos realizar en seres humanos solo para practicar. 4. A pesar de las grandes y numerosas similitudes humano-rata, estos difieren tambin en muchos aspectos, comenzando por el tamao, caractersticas fsicas externas como el labio leporino y caractersticas internas como pncreas, hgado, o proporciones, etc. 5. La anatoma macroscpica comparada nos permite entender mejor la anatoma propia del ser humano, y as mismo nos despierta la curiosidad por saber qu factores producen dichas diferencias, o en qu aspectos fisiolgicos difieren al ser distintos a otra especie. 6. Para la aplicacin de inyecciones tanto intramusculares como intraperitoneales debemos considerar que elementos anatmicos se localizan en el rea de inters y que funcin desempean para saber dnde y de qu manera introducir la aguja durante la puncin, esto con el fin de no lesionar a la rata, y en el caso de la prctica clnica al paciente. 7. En la diseccin de un ser vivo es importante elegir el anestsico adecuado en la dosis correcta para evitar su malestar, dolor y sufrimiento, y tambin lograr trabajar cmodamente sin incidentes. 8. Al extraer y disecar rganos, debemos ser observadores y cuidadosos para lograr obtener un material en buenas condiciones que nos permita percibir y entender la anatoma de a rata, compararla con la del ser humano y relacionarla con su funcin. 9. Los rganos y sistemas estn conformados y dispuestos, tanto en la rata, y en el humano, as como en otros animales, en base a la morfologa y fisiologa de la especie a la que pertenece, pudiendo tener variaciones anatmicas individuales.
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Anexos

10. Para lograr una inyeccin efectiva, o una diseccin exitosa, es indispensable el conocimiento y dominio de la tcnica, que se logra incorporando los conocimientos tericos con la prctica.

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Por qu el corazn continu latiendo an despus del paro cardiorrespiratorio que se le provoc a la rata? Porque el msculo cardaco es miognico. Esto quiere decir que, a diferencia del msculo esqueltico, que necesita de un estmulo consciente o reflejo, el msculo cardaco se excita a s mismo. Las contracciones rtmicas se producen espontneamente, as como su frecuencia puede ser afectada por las influencias nerviosas u hormonales, como el ejercicio fsico o la percepcin de un peligro.

El termino regulacin extrnseca del flujo sanguneo se refiere al control ejercido por el SNA y por el sistema endocrino. La eficacia del bombeo cardiaco esta tambin controlada por los nervios simpticos y parasimpticos, que inervan profusamente al corazn, pero la parte ms importante del SNA para la regulacin de la circulacin es el SNS.11

Qu es el Sistema Nervioso Entrico y cmo influye en las vsceras?

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Cmo la circulacin sistmica afecta a la FR y FC?

El corazn bombea la sangre al cuerpo, es decir que la circulacin sistmica depende de la velocidad con que ste la bombee, y dicha velocidad se mide con cada latido o pulsacin llamndose Frecuencia Cardiaca. tero de la rata: Los tejidos requieren oxgeno y los eritrocitos lo transportan, es decir que a mayor Frecuencia Respiratoria mayor FC y ms rpida es la circulacin sistmica.

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La hembra tiene un tero bicorne. Los dos cuernos se fusionan en sus terminaciones cervicales pero tienen aberturas separadas en la vagina. Los cuernos se extienden desde la vagina, cranealmente casi hasta los polos caudales de los riones. Superiormente los cuernos uterinos estn relacionados a los oviductos y los ovarios.13

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Bibliografa

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1. http://www.msd.com.mx/publicaciones/mmerck_hogar/seccion_01/seccion_0 1_001.html Consultada por ltima vez el 22/08/11 2. http://docencia.izt.uam.mx/retana/fisiologia_general/practicas/practica1.pdf Consultada por ltima vez el 22/08/11 3. http://lebi.ucr.ac.cr/index.php?option=com_content&view=article&id=43&Ite mid=44 Consultada por ltima vez el 22/08/11 4. Fuentes Paredes, Flor de Mara; Mendoza Yanavilc, Rosa Amelia. Gua de Manejo y
Cuidado de Animales de Laboratorio: Ratn. Centro Nacional de Productos Biolgicos. Instituto Nacional de Salud. LIMA, 2008. Pgina 22 http://www.elmundo.es/universidad/2002/12/05/tecnologia/1039076011.html

5. ANGELA BOTO /PABLO JAUREGUI El mapa del genoma del ratn, un 99% coincidente con el del hombre. 09 de Diciembre de 2002.

Consultada por ltima vez el 23/08/11 6. R. Maynard. Is the Rat Pancreas an Appropriate Model of the Human Pancreas?. Facultad de Ciencias de la Vida de la Universidad de Manchester. Manchester, Reino Unido. March 3, 2006. http://content.karger.com/ProdukteDB/produkte.asp?Doi=91849#OLN Consultada por ltima vez el 23/08/11 7. MLLER, R. & VAZQUEZ, N. Anatoma del hgado de la rata Wistar (Rattus norvegicus). Int. J. Morphol., 29(1):76-79, 2011. 8. http://anatomiahumanaipn.blogspot.com/2009/10/higado_02.html Consultada por ltima vez el 23/08/11 9. Reproduccin de la Rata. Gabriela Noceti. 5 de juli de 2010. http://mibioterio.blogspot.com/ Consultada por ltima vez el 23/08/11 10. B Close, Battleborough Croft, Battleborough Lane, Brent Knoll, Highbridge, Somerset TA9 4DS, U. Recomendaciones para la Eutanasia de los Animales de Experimentacin: Parte 2. Octubre de 1996 (30: 293-316). 11. http://www.zaragoza.unam.mx/podcast/bct2/Frecuencia%20cardiaca.pdf Consultada por ltima vez el 24/08/11 12. http://mural.uv.es/monavi/disco/primero/fisio/Tema45.pdf Consultada por ltima vez el 24/08/11
13. Stuckhart JL, Poppe SM. Fresh visceral examination of rat and rabbit foetuses used in teratogenicity testing. Ter, Car, and Mut 1984; 4:181-188.

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