INTRODUCCION En este informe trata, lo que respecta a la experimentación práctica realizada en el laboratorio, en el cual se trabajó con una solución

estándar de creatinina, agua destilada y picrato alcalino, en diferentes concentraciones, para luego mediante en espectrofotómetro registrar la absorvancia de cada uno de los tubos de ensayo preparados. Este informe cuenta con 2 graficas una de curva de calibración, y otra hecha con el ajuste de mínimos cuadrados para determinar la validez de la ley de Lambert-Beer. TRAMITANCIA Y ABSORBANCIA, LEY DE LAMBERT-BERR Disponemos de una fuente emisora de radiación electromagnética (lámpara de wolframio), unos sistemas de rendijas para hacer que la radiación incida perpendicularmente en la muestra, un dispositivo que permite seleccionar la longitud de onda que incide sobre la muestra (red de difracción) y un sistema de medida electrónico de intensidad de luz. Se hacen dos medidas de la intensidad de luz: En la primera medida, la muestra será un adisolucion con la misma matriz que el analito que deseemos determinar pero en ausencia de este ( disolución blanco. La intensidad de radiación que llega al lector será (Io). En la segunda medida se hará en presencia del analito que deseemos estudiar. En este caso la intensidad de luz que llega al lector será (I). Como trabajamos con analitos que absorben radiación a la longitud de onda que selecciona la red de difracción, lógicamente I< Io. Existen dos maneras de expresar la relación entre I e Io. la relación directa se le denomina tramitancia (T), mientras que se denominda absorbancia al - logaritmo de la tramitancia. La ley de Lambert-Beer establece que la absorbancia esta directamente relacionada con las propiedades intrínsecas del analito, con su concentración y con la longitud de la trayectoria del haz de luz de radiación al atravesar la muestra (A=C.ε.L). A= Absorbancia de la muestra C= Concentración del cromoforo L= Longitud del paso óptico que contiene la muestra

agua destilada y picrato alcalino.0 3 1. en el cual se trabajó con una solución estándar de creatinina.25 1.0 1.5 1. para esto se debe realizar la calibración del equipo.75 1. PORCEDIMIENTO En el laboratorio se utilizan concentraciones variables y conocidas de creatinina que se determinaran tomando 10 tubos de ensayo y que sean uniformes.25 1. Depende del cromoforo en si mismo.75 1.0 7 0. mediante inversión.0 2 1.0 5 1.0 6 0. Se toma el 1 tubo de ensayo y se ingresa en es espectrofotómetro y se calibra la aguja a 100. Picrato alcalino de sodio 1 2. Este informe cuenta con 2 graficas una de curva de calibración. luego se dejan reposar 15 minutos y se procede a realizar las lecturas de % de Tramitancia en cada uno de ellos con el espectrofotómetro a una longitud de onda de 50nm.0 10 2. T…) puesto que la absorbancia es adimensional.0 1.75 0.ε=en absorptividad molar. de las condiciones de medida (PH. para luego mediante en espectrofotómetro registrar la absorvancia de cada uno de los tubos de ensayo preparados.0 1. en diferentes concentraciones. este paso se realiza unas 3 veces hasta estar seguro de su calibración y posteriormente se procede con la lectura de cada uno de los tubos y se registra. En este informe trata. de la longitud de onda.0 1.75 1.5 1. luego se saca el tubo y debe quedar en 0.0 8 0.0 9 2./Tubo Agua destilada Estándar: 20ug/ml Creatinina [] descono. . sus concentraciones son : concentración-1 Longitud-1. se marcan con los números de 1 a 10 y en cada uno de ellos se procederá a adicionarles cantidades variables de agua destilada.0 1.0 Se mezclan cada uno de los tubos.5 1.25 1. y creatinina como se indica en el siguiente cuadro : Sust.0 4 1.5 0. y otra hecha con el ajuste de mínimos cuadrados para determinar la validez de la ley de Lambert-Beer.25 0. lo que respecta a la experimentación práctica realizada en el laboratorio.

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