DNS 1.

Se disuelven los reactivos Hidróxido de sodio, Tartrato de sodio y potasio (KNaC4H4O6*4H2O), Fenol, Metabisulfito de sodio (Na2S2O5) en aproximadamente 600 ml de agua destilada. 2. Se adiciona el Acido 3,5 dinitrosalicílico (DNS) poco a poco hasta lograr una completa disolución. 3. Se afora a 1 litro de agua destilada. La solución debe guardarse en frasco ámbar y alejado de la luz, a temperatura ambiente durando hasta dos meses, antes de mostrar precipitación o vestigios de descomposición.

DETERMINACION DE AZUCARES REDUCTORES Se adiciona en tubos de ensayo 0.5 ml de la muestra Se añade 1.5 ml de DNS, se agita Se colocan los tubos en baño de agua a punto de ebullición durante 15 minutos Se deja enfriar a temperatura ambiente Se agrega 8 ml de agua destilada y se agita en un vortex Se toman lecturas de absorbancia a 550 nm

Determinación de azúcares reductores Los azúcares reductores pueden reducir al ácido 3,5-dinitrosalicílico (DNS) bajo determinadas condiciones. Preparar el reactivo DNS: 100ml de solución DNS 2mM en NaOH 0,2N y 250ml de solución de tartrato de sodio y potasio 4-hidrato 2,12M. Mezclar ambas soluciones y se llevar a 500ml. Si la muestra contiene proteínas éstas pueden producir falsos negativos, para evitarlos desproteinizar 5ml de leche añadiendo 1 ml de ácido acético 1N; centrifugar a 4.000 x g durante 10 minutos. Si en la muestra es posible la presencia de di, tri o polisacáridos con más de un componente reductor, neutralizar con NaOH 1N para evitar una posterior hidrólisis ácida (se sobrestimaría la cantidad del sacárido).Añadir 4,475ml de agua destilada y 25ml de muestra 500µl de reactivo DNS. Mantener la mezcla en baño de agua hirviendo durante 5 minutos y medir a continuación absorbancia a 540nm, interpolando el valor obtenido con los valores calculados para soluciones de sacárido de concentración conocida.

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