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ASOCIACIN ESPAOLA DE TCNICOS DE LABORATORIO ( Resumen Comunicacin Cientfica ORAL PANEL Nmero *):

XXV CONGRESO NACIONAL

Ttulo: DETECCINY SUBTIPADO DE GRIPE EN LA TEMPORADA 2011-12 EN EL SISTEMA DE VIGILANCIA DE GRIPE EN EXTREMADURA Trabajo de: Microbiologa Autor/a/s: MONTES FLORES, ROSA MARA; RODRIGUEZ RODRIGUEZ, GUADALUPE; BERMEJO BERNAL, JUANA JOSEFA Centro de trabajo: HOSPITAL SAN PEDRO DE ALCNTARA Localidad:CCERES Direccin del primer firmante: SIMN BENITO BOXOYO 139 Localidad: CCERES Cdigo Postal: 10004 Provincia: CCERES Telfono fijo: (927184324) Telfono mvil: 666639018 Correo electrnico del primer firmante: rosamaria_8_7@hotmail.com

RESUMEN:

*) A rellenar por AETEL.

El resumen se ajustar al marco establecido. No se admitir ms de una hoja

Introduccin: La gripe es considerada un problema de salud pblica y permanece como causa importante de morbilidad y mortalidad. La capacidad de los virus de la gripe de experimentar constantes cambios antignicos obliga a una adecuada vigilancia epidemiolgica y virolgica, que en nuestro pas se realiza a travs del Sistema Centinela de Gripe, obtenindose informacin tanto de los aislamientos de virus para su anlisis antignico y gentico, como de la potencial capacidad de difusin en las poblaciones. Otros virus respiratorios pueden causar cuadros cnicos similares al de la gripe por lo que es importante un diagnstico etiolgico de los mismos. Material y mtodos: Durante la temporada de gripe 2011/2012 desde la semana 40 a la semana 8 se analizaron 160 muestras de exudados nasofarngeos obtenidos de pacientes que cumplan la definicin de caso procedentes tanto de la red centinela de nuestra comunidad autnoma como de pacientes graves ingresados en los hospitales de la comunidad. Las muestras se recogieron en medio de transporte de virus (Viral Pack, Soria Melguizo) y se llevaron al laboratorio a 4C y en tiempo inferior a 48h. Cada muestra fue procesada para cultivo celular por inoculacin en shell-vials de clulas MDCK (Vircell) y tincin por inmunofluorescencia directa, tras 48 horas de incubacin a 37C, para V.influenzae A y B (ImagenTM Influenza A and B, Oxoid), y tras extraccin de cidos nucleicos por el sistema automtico Cobas AmpliPrep (Roche Diagnostics) se realiz RTPCR multiplex con Anyplex II RV16 Detection (Seegene) para deteccin de virus influenzae A (FLU A)y B (FLU B), virus parainfluenzae (PIV) 1, 2 ,3 Y 4, adenovirus humano(AdV), virus respiratorio sincitial (VRS) A y B, coronavirus humano (CoV) 229E, NL63 y OC43, rinovirus humano (HRV) A/B/C/D, enterovirus humano (HEV), metapneumovirus (MPV) y bocavirus humano (HBoV) 1/2/3/4 y RT-PCR RealTime ready Inflluenza A/H1N1 Detection Set (Roche) para detectar FLU A. Las muestras positivas para V. influenzae A fueron subtipadas por RT-PC ProFlu-St H1n,H1,H3 (Prodessse). Resultados: Con la RT-PCR multiplex RV16 se obtuvieron 94 (59%) muestras positivas: 53 (32%) lo fueron para FLU A, 45 como nico aislado y 7 en coinfeccin con: 1 HRV, 1 AdV, 1 CoV, 1 RSV B, 1 MPV, 1 RSVA+ 1 HRV, 1 AdV + 1 HRV + 1 PIV 4; 2 (1%) para FLU B, 13 (8%) para VRS A y 5 (3%) para VRS B; 12 (7.5%) para HRV; 7 (4%) para CoV; 6 (4%) para PIV 1, 2, 3 y 4; 3 (2%) para AdV; 2 (1%) para MPV; 2 (1%) para HEV y 2 (1%) para HBoV .Las coinfecciones fueron las descritas con FLU A, a excepcin de 2 RSVA con 1 HEV y con 1 CoV. Con RT-PCR RealTime ready Inflluenza A/H1N1se detectaron 46 muestras positivas para FLU A que coincidieron con los resultados de la RT-PCR multiplex. Todos los FLU A resultaron ser H3 a excepcin de un H1N1 pandmico. De las 55 muestras en que se detectaron FLU A y B por RT-PCR, la tincin de shell-vials fue positiva para los 2 (100%) casos de FLU B y slo para 35 (65%) de los positivos de FLU A, no encontrndose ningn cultivo positivo con RT-PCR negativa. Conclusiones: La RT-PCR multiplex permite detectar V.influenzae con mayor sensibilidad que el cultivo celular convencional, adems de la deteccin e identificacin de un espectro ms amplio de virus. El significado clnico de la deteccin molecular de diversos virus en una misma muestra debe ser evaluado cuidadosamente pues dicha deteccin podra se debida a infecciones previas y no implicar infeccin aguda.