MATERIAL Y EQUIPO NECESARIO NO PROPORCIONADO - Cronómetro - Lámpara de luz intensa

OBTENCIÓN DE LA MUESTRA No se requiere de una preparación especial del paciente antes de la toma de muestra. 1. Obtener 3.0 mL de sangre por punción venosa.

PROTEÍNA C REACTIVA
AGENTE DE DIAGNOSTICO

2. Centrifugar y separar el suero.

Equipo para investigar por aglutinación de partículas de látex.

INTRODUCCIÓN Tillet y Francis concluyeron en 1930 que la reacción que se origina en el suero de pacientes que sufren de enfermedades inflamatorias precipita con un extracto de pneumococo no proteico llamado polisacárido C. La proteína que causa este tipo de reacción fue llamada Proteína “C” Reactiva. Como un fenómeno no específico, el incremento en la concentración de Proteína C Reactiva se puede presentar en cualquier proceso inflamatorio agudo (ya sea infeccioso o no infeccioso). La concentración de Proteína C Reactiva generalmente se encuentra por debajo de 6 mg/L en el suero de adultos sanos y en enfermedades inflamatorias estos valores frecuentemente se incrementan en un lapso de 4 a 8 horas después de presentarse un evento agudo alcanzando niveles aproximadamente de 20 a 500 mg/L. Varios métodos de inmunoprecipitación se han desarrollado para la detección de Proteína C Reactiva. El principio del procedimiento presentado involucra una reacción inmunológica entre la Proteína C Reactiva (como antígeno) y el anticuerpo correspondiente adsorbido a las partículas de látex (látex sensibilizado con anti-Proteína “C” Reactiva). PRESENTACIÓN Catálogo Núm. 102: Equipo para 50 pruebas REACTIVOS Y MATERIAL PROPORCIONADO - Antisuero adsorbido a partículas de látex. (látex antiPCR) - Suero Control Positivo - Suero Control Negativo - Diluyente Glicina Salina, concentrado, pH 8.2 - Placa de reacción - Pipetas desechables (únicamente para presentaciones de 40 y 100 pruebas) ESTABILIDAD Y ALMACENAMIENTO DEL REACTIVO El látex anti-PCR así como los controles y el diluyente concentrado son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta cuando se almacenan a 2-8°C). las

Preparación del Diluyente Glicina Salina Concentrado: El frasco de Diluyente Glicina Salina Concentrado se afora con agua destilada al volumen suficiente según corresponda la presentación. Ejemplo: - 50 mL (para 50 pruebas) - 100 mL (para 100 pruebas) - 40 mL (para 40 pruebas), etcétera
MÉTODO CUALITATIVO

NOTA: El látex Anti-PCR debe estar a temperatura ambiente antes de ser utilizado.
1. Colocar en una gradilla un tubo de 13 x 100 mm. 2. Agregar 0.95 mL del frasco No. 4 (Diluyente glicina-salina concentrado pH 8.2) diluido. 3. Añadir 0.05 mL del suero problema. 4. Después de haber agregado el suero problema, la dilución obtenida será 1:20 y estará lista para su uso. 5. En un anillo de la placa depositar 0.05 mL del suero diluido. 6. En otro anillo depositar una gota del frasco No. 2 (suero control positivo). 7. En un tercer anillo depositar una gota del frasco No. 3 (suero control negativo). 8. Añadir a cada uno de los 3 anillos una gota del frasco No. 1 (Látex anti-Proteína «C» Reactiva) previamente resuspendido. 9. Mezclar manualmente la placa de reacción durante 2 minutos. 10. Realizar la lectura del resultado en este momento bajo una fuente de luz directa. Interpretación

Resultado Positivo Presencia de agregados macroscópicos (aglutinación comparable al control positivo). Resultado Negativo Ausencia de agregados macroscópicos (sin aglutinación, comparable al control negativo). La no aglutinación o una ligera aparición de granulocidad que no exceda a la observada en el control negativo indican un resultado negativo.

Brown. Drahovsky. 2. 52: 561-571. Al. . Fischel.5 mL del tubo No. G. Continuar esta operación hasta el tubo No. Placa de reacción.E. 3. 4. 11.1505 . Exp. Van Lente Frederick. Estandarizada. No Negociable. de México Tel. 2. In Laboratory Diagnostic Procedures in Rheumatic Diseases. Colocar en una gradilla 5 tubos de 12 x 75 mm y numerarlos. Med. pH 8.: klinische Bedeutung des C-reaktiven Proteins. The Ocurrence During Accute Infections of a Protein not normal present in the blood. 1.: (55) 5362-0299 Fax: (55) 5362-1792 SENSIBILIDAD La sensibilidad de látex de anti-PCR es de 0.S. (1967). 7. 3. Antisuero adsorbido a partículas de látex. 13(12) : 106-3. 4 (Diluyente glicina-salina concentrado.5 mL del frasco No. Medical. Ph D. Depositar 0. 5. Clave: 080. D. W. J. Wood. Mezcle. Klin. Viveros de la Loma C.. 1. 2 al tubo No. pp 20. Realizar la lectura del resultado en este momento. Med. Harrison F. Human Patology.1 (látex Anti-Proteína «C» Reactiva) a cada una de las diluciones. 2 mL. Ziegenhagen. Serological reactions in pneumonia with a non-protein somatic fraction of pneumococcus. Pasar 0. 2 al 5. Para evitar falsos resultados NO es recomendable realizar la lectura después de los 2 minutos. (1930).Propiedad del Sector Salud. 8. 5.. Añadir al tubo No. 33 Col. 0.A. Depositar del tubo No. Ed. 1982 . Fabricado en México por: Laboratorios Licon S. et. 0. Mezclar manualmente la placa de reacción durante 2 minutos.2) diluido. 9. 54080 Tlalnepantla.5 mL del tubo No.95 mL del frasco No. 10. .414. Depositar al tubo No. Ejemplo : Tubo # Dilución 1 1:20 + + + 2 1:40 + + 3 1:80 + 4 1:160 Positivo 1:20 Positivo 1:40 Positivo 1:80 Resultado BIBLIOGRAFÍA 1. and Francis. 4 (Diluyente glicina-salina concentrado pH 8.05 mg/dL LIMITACIONES DEL MÉTODO 1.J. 12.P. Viveros del Rocío No. Mezcle. 6. 3. Ejemplo : El título del suero problema será la última dilución que presente agregados macroscópicos (aglutinación). 5.05 mL del suero problema dilución 1:20.MÉTODO SEMICUANTITATIVO 1. 0. The Diagnostic Utility of C Reactive Protein. Exp. Tillet. 2. Mezcle. Edo. 1 al tubo No. Pasar 0. Compuesto de: Suero control positivo y negativo. 22/06/02 IN-103 Proteína C Reactiva. 4.05 mL de cada una de las diluciones en anillos diferentes de la placa. Añadir una gota del frasco No. E. 2. No deben utilizarse sueros turbios. Equipo para investigar por aglutinación de partículas de látex. Interpretación El título del suero problema será la última dilución que presente agregados macroscópicos (aglutinación). Cohen AS. Boston. 78:24-35 (1983). Seleccionar los sueros positivos obtenidos en la prueba cualitativa. hemolizados o contaminados para realizar la prueba.2) diluido. Little. T. Rev.

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