El xido Ntrico

El xido Ntrico, llamado tambin por la IUPAC como xido de nitrgeno (II) o monxido de nitrgeno, ha dejado de ser considerado nicamente como una molcula txica contaminante para convertirse en un gas que transmite seales al organismo. El hecho de que un gas txico sea producido por una clula determinada, atraviese membranas celulares y regule la funcin de otras clulas fue difcil de aceptar en un principio, ya que no exista ningn precedente. De hecho, el modo de accin del xido ntrico representa un mecanismo totalmente nuevo en los sistemas biolgicos. Se califica como un radical libre relativamente estable que se sintetiza a partir del oxgeno molecular y del nitrgeno, a partir del grupo guanidinio de la arginina, en una reaccin catalizada por la NO sintasa. Arginina + 11/2 NADPH + 2CO2 NO + citrulina + 2H2O + 11/2 NADP+

Esta enzima se encuentra en muchos tejidos y tipos celulares: neuronas, macrfagos, hepatocitos, miocitos del musculo liso, clulas endoteliales de los vasos sanguneos y clulas epiteliales del rin. Para explicar brevemente la historia del xido ntrico (NO) se debe decir que es reciente, pero intensa: en 1980, como resultado de estudios de fisiologa orientados a conocer cmo se regula la presin sangunea, se identific un factor relajante del endotelio que es producido por las clulas y que participa en el mantenimiento del tono muscular de los vasos sanguneos y, por tanto, en la regulacin de la presin sangunea. Aos despus se demostr que este factor es el NO y se identific el modo en que las clulas lo sintetizan a partir del aminocido L-arginina (como ya se explic hace un momento). A partir de ese momento, el inters por el NO creci de modo exponencial, as como el reconocimiento cientfico a sus descubridores: entre otros, en 1990 se concedi el Premio Prncipe de Asturias a la Investigacin Cientfica y Tcnica al cientfico hondureo Salvador Moncada por los trabajos que demostraron que el factor endotelial era en realidad el xido ntrico. La prestigiosa revista Science consider al NO la molcula del ao 1992 y, finalmente, el 13 de octubre de 1998 se concedi el Premio Nobel de Medicina a tres de los cuatro investigadores que descubrieron el papel del xido ntrico en las enfermedades cardiovasculares. El descubrimiento del papel del NO en el sistema cardiovascular ha permitido explicar el modo de accin de algunos frmacos como la nitroglicerina, utilizada para el tratamiento de la angina de pecho y ha conducido al desarrollo de otros, entre ellos el del sildenafilo, el principio activo de la pldora contra la impotencia comercializada recientemente con el nombre de Viagra. Como todo gas, tambin tiene sus propiedades: Propiedades Fsicas El NO es un gas incoloro (a 1 atm de presin y temperatura ambiente). Su punto de ebullicin es de 151,7 C a 1 atm. Es una molcula con carcter apolar. Su solubilidad mxima en agua es similar a la del O2 (2-3 mM). Su coeficiente de difusin en solucin acuosa es de 3.3 10-5 cm2/s.

Propiedades Qumicas En la molcula de NO el nmero de oxidacin del N es +2. Su estructura de Lewis es la que se muestra en la imagen frmula 1. Se pueden escribir estructuras de resonancia en la frmula 2.

Formacin en los Sistemas Biolgicos En los sistemas biolgicos el NO se puede formar por distintos mecanismos: 1) Por Reduccin de Nitrato a Nitrito: En enterobacterias y plantas, por accin de las enzimas la nitrato reductasa y el nitrito reductasa. 2) A partir del aminocido L-Arginina: Se realiza a partir de la arginina en una reaccin dependiente de NADPH. Catalizada por la xido ntrico sintasa, un enzima dimrico estructuralmente relacionado con la NADPH citocromo P-450 reductasa. La reaccin es una oxidacin de cinco electrones. Cada subunidad del enzima lleva unida una molcula de cada uno de estos cuatro diferentes cofactores: FMN, FAD, tetrahidrobiopterina y hemo Fe3+. El NO es una molcula inestable y no puede ser almacenada.

Mecanismo de accin: Su sntesis es estimulada por la interaccin del xido ntrico sintasa con la calmodulina Ca++. El calcio activa la NOS que transforma la L-arginina en L-citrulina y xido ntrico. Este ltimo se difunde en la membrana de la clula y activa a la guanilato ciclasa soluble, aumentando as los niveles de GMPc, provocando as su efecto. Existen evidencias de que es sintetizado tambin, en endocardio, miocardio y msculo papilar. La enzima NOS, presenta 3 isoformas: - Las formas constitutivas, incluyendo la forma endotelial (eNOS), la cual media las respuestas vasodilatadoras endotelio-dependientes. - La forma neuronal (nNOS), son calcio-calmodulina dependientes, y estn presentes en el endotelio, plaquetas, miocardio, tejido nervioso y msculo esqueltico. Sintetizan NO en pequeas cantidades en respuesta a la estimulacin del receptor. - La forma inducible (iNOS), es Ca-independiente. La misma puede ser liberada de clulas endoteliales, msculo liso vascular, miocitos, macrfagos y neutrfilos, astrocitomas, luego de la exposicin de stas clulas a citoquinas y endotoxinas. Sintetiza NO en grandes cantidades.

Aunque el NO no es selectivo para la circulacin pulmonar, ste se elimina rpidamente de la circulacin, por lo que al suministrarse por inhalacin produce vasodilatacin pulmonar sin llegar a originar vasodilatacin sistmica. Rol Fisiolgico: 1) En el Endotelio Vascular: Las clulas endoteliales que recubren las arteriolas y pequeas arterias sintetizan varias sustancias que, cuando se liberan, afectan al grado de relajacin o contraccin de la pared arterial. La ms importante de ellas es una sustancia llamada factor relajante derivada del endotelio, compuesto principalmente por NO, que tiene una semivida en la sangre de solo 6 segundos. Estas clulas sintetizan xido ntrico como relajante muscular y lo hacen como respuesta a los estmulos de sustancias que circulan en la sangre y por el propio estiramiento de la arteria en cada latido, el pulso. Una vez producido, este gas se transmite a la parte muscular de la arteria y la relaja y, con ello, produce su dilatacin. El NO se une a la enzima guanilato ciclasa y la activa. Esta enzima cataliza la formacin de GMP cclico (GMPc) a partir de GTP que acta induciendo la vasodilatacin. El resultado de la entrada de NO es, por tanto, la sntesis del mensajero intracelular GMPc. En las mismas clulas el exceso de GMPc es transformado en GMP por otra enzima, la GMPc fosfodiesterasa. Puesto que el NO tiene una vida media corta, es necesario un aporte continuo por parte de las clulas como respuesta a las fuerzas de cizalla del flujo sanguneo sobre la pared arterial.

2) En la inflamacin: Aqu su accin es doble: Relaja el msculo liso vascular e induce vasodilatacin, por lo que contribuye a la reaccin vascular, pero tambin es un inhibidor del componente celular de las respuestas inflamatorias. En NO reduce la agregacin y la adherencia plaquetaria, inhibiendo varias caractersticas de la inflamacin inducida por los mastocitos, e inhibe el reclutamiento de los leucocitos. Dada estas acciones inhibitorias se cree que la produccin de NO es un mecanismo endgeno de control de las respuestas inflamatorias. 3) En la Hemostasia La activacin y la agregacin plaquetaria son Ca++ dependientes. Esto se relaciona al AMPc, el cual se encarga de regular bomba de Ca++ que est almacenada en los depsitos intracelulares. Si la concentracin de AMPc disminuye en la clula, se da la hemostasia. El NO es un potente inhibidor de la hidrlisis del AMPc. Por lo tanto, inhibe la activacin y la agregacin plaquetaria. Esta NOS es estimulada por el ADP, trombina, citocinas y otros factores producidos durante la coagulacin

4) Sobre los leucocitos Especialmente los macrfagos, cuando van a destruir microorganismos fagocitados, producen intermediarios reactivos del nitrgeno, en especial xido ntrico, por la accin de la enzima iNOS. Esta enzima curiosamente falta en los macrfagos en reposo, pero puede inducirse como respuesta a los productos microbianos que activan a los RTT, sobre todo en conjuncin con el IFN-y. Su accin cataliza la transformacin de arginina en citrulina, con la liberacin del gas NO, de libre difusin. En el interior de los fagolisosomas, el NO puede combinarse con el agua oxigenada o con el superxido, generando por la oxidasa fagoctica, y producir unos radicales de peroxinitrito que son muy reactivos, capaces de destruir a los microbios. La funcin cooperadora y redundante de las ERO (especies reactivas de oxgeno) y el NO queda al manifiesto al observarse que los ratones sometidos a la inactivacin de sus genes y que carecen por ello de iNOS y de oxidasa fagoctica son las ms vulnerables a las infecciones bacterianas que si solo falta una de ellas.

5) Como Neurotransmisor: Se segrega especialmente en los terminales nerviosos de las regiones enceflicas responsables de la conducta a largo plazo y de la memoria. El xido ntrico difiere de otros transmisores de molcula pequea por su mecanismo de produccin en el terminal presinptico y por sus acciones en el terminal postsinptico. No est formado con antelacin y almacenado en las vesculas en el terminal presinptico como los dems NT. En su lugar, se sintetiza casi al instante segn las necesidades y a continuacin difunde fuera de los terminales presinpticos durante un periodo de segundos en vez de ser liberado en paquetes vesiculares, todo hacia las neuronas postsinpticas cercanas. En ellas no suele modificar el potencial de membrana, sino que modifica las funciones metablicas intracelulares que cambian la excitabilidad neuronal durante segundos, minutos o tal vez incluso ms tiempo.