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Microbial Cell Factories, 2007; 6: 7-7 (ms artculos en esta revista)

Molecular y bioingeniera estrategias para mejorar el alginato y polydydroxyalkanoate produccin de Azotobacter vinelandii
BioMed Central Enrique Galindo (galindo@ibt.unam.mx) [1], Carlos Pea (carlosf@ibt.unam.mx) [1], Cinthia Nez (cinthia@ibt.unam.mx) [2], Daniel Segura (Segura @ ibt.unam.mx) [2], Guadalupe Espn (espin@ibt.unam.mx) [2] Biosintesis del alginato

Va para la biosntesis de alginatos (Figura 1] es similar tanto en el Azotobacter y Pseudomonas especies y ha sido objeto de una revisin reciente [9]. En pocas palabras, alginato se sintetiza a partir de fructosa-6-P, que es isomerizado por una enzima bifuncional phosphomannose isomerasa / guanosina diphosphomannose pyrophosphorylase, (PMI de prcticas correctas de fabricacin o alga) con el fin de producir manosa-6-P; que a su vez es convertida por phosphomannomutase (PMM o AlgC) en manosa-1-P; PMI-GMP (alga) cataliza la conversin de manosa-1-P para convertirse en el PIB-manosa; PIB manosa se oxida por el PIB-manosa deshidrogenasa (GMD o AlgD) y el PIB - mannuronic cido. Polimerizacin del PIB-mannuronic cido se lleva a cabo por la Alg8 de protenas, un mannuronate polimerasa (MP) [10]. La molcula resultante polymannuronic es modificado por un complejo compuesto por acetylase ALGI, AlgV, AlgF protenas (ALGI, AlgJ y AlgF para P. aeruginosa), y algunos de los noacetilado mannuronate residuos son epimerized a guluronate por un mannuronate epimerase (o ME AlgG) y luego exportados a travs de la membrana externa a travs de los poros de la formacin de protenas AlgE (AlgJ en A. vinelandii) (Figura 1].

En el caso de A.vinelandii pero no en el de las especies de Pseudomonas, exportado polmero se convierte en el final de alginato de una familia de siete homloga secretada mannuronan C-5 extracelular epimerases (AlgE1-7) [11] (Figura 1]. Estos epimerases son esenciales para la formacin de quistes maduros, como una mutacin que desactive el tipo I de la secrecin de sistema responsable de la exportacin de la AlgE1-7 epimerases producido quistes que carecen de la exina intine y abrigos y en consecuencia no pudieron sobrevivir a la desecacin. Esto sugiere que el cido guluronic residuos en alginato son importantes para la formacin de alginato de la capa que rodea los quistes [12]. Se cree que la AlgG AlgK, AlgX y AlgL protenas forma un andamio que gua el polmero a travs de la periplasm, para luego ser secretado a travs de la membrana externa [13, 14]. AlgL es tambin un alginato lyase enzima [15]. La idea de que AlgL desempeado un papel en la A.vinelandii, en relacin con la degradion de la cpsula de alginato quiste durante la germinacin, se descart, ya que la germinacin no fue afectado en un mutante algL [16]. El papel principal de AlgL Pseudomonas en la especie es para degradar alginatos que dejar de ser exportados fuera de la clula y, por tanto, permanecer en el periplasm [14, 17, 18].

Alg44 Aunque originalmente fue considerada como un componente del complejo de la polimerasa, se ha propuesto recientemente a formar parte de la periplasmic andamiaje y / o para desempear un papel en la transicin Alg8 en la membrana citoplasmtica con AlgE (AlgJ en A. vinelandii) [ 9]. Alg44 protena tiene un dominio Pilz, un putativo diguanosil monofosfato cclico (c-di-GMP) vinculante de dominio [19]. c-di-GMP es una nueva molcula reguladora identificado como un mensajero universal de secundaria en las bacterias [20, 21]. De este modo, la presencia de un dominio Pilz, sugiere un papel regulador para Alg44. Los genes que codifican para las enzimas de la biosntesis de alginato en A.vinelandii han sido identificados (Figura 2]. Con la excepcin de algC, forman la algD-8-44-KJGXLIVFA grupo [22 - 28]. Varios promotores transcribir biosntesis de alginato este grupo de genes han sido identificados (Figura 2]. Tres promotores: algD p1, algD p2 y algD p3 situado aguas arriba algD [22], p alg8 situado aguas arriba alg8 [25], y un sigma 70 putativo promotor situado aguas arriba algG [27]. Dos promotores fueron identificados aguas arriba algC: algC p1 y algC p2 [28]. Expresin de la biosntesis de alginato de genes en A.vinelandii se ha demostrado que el estar bajo el control de la algUmucABCD grupo de genes, donde algU cdigos alternativos para el factor sigma E, necesarios para la transcripcin de la algC p1 y ALG Dp2 promotores [28, 29]. MucA y MucB protenas actan como factores antisigma E (Figura 2]. Por lo tanto, la inactivacin mutacional de algU resultados en el deterioro de alginato de sntesis [30], mientras que la inactivacin de mucA conduce a exceso de alginato [31]. Expresin de la algD promotores es tambin bajo el control de los dos componentes del sistema mundial de reglamentacin CCGGacA, CCG, donde acta como un sensor de histidina protena quinasa que phosphorylates GacA, regulador de la respuesta que activa la transcripcin de los genes objetivo en su forma fosforilados. CCG inactivacin de genes o gacA abroga la transcripcin de algD de sus tres promotores [32, 33]. El rpoS gen que codifica el factor sigma S se encuentra bajo el control de GacA. Inactivacin de rpoS ha demostrado afectar la transcripcin de la algD p1 promotor [33]. De este modo, un regulador de cascada que incluye los reguladores GacA mundial y RpoS participa en el control de algD transcripcin (Figura 2].